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Biotium/Steady-Luc Firefly HTS Assay Kit/30028-2/1000-assays
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Biotium/Steady-Luc Firefly HTS Assay Kit/30028-2/1000-assays
品牌 / 
Biotium
货号 / 
30028-2
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Fireflyluciferaseiswidelyusedasareporterforstudyinggeneregulationandfunction,andforpharmaceuticalscreening.Biotium’sSteady-Luc™HTSassaysystem isahomogeneousfireflyluciferasereportergeneassaykitwithahalf-lifeofabout3hoursforthequantificationoffireflyluciferaseexpressioninmammaliancells,allowingbatchprocessinginmicroplates.

Fireflyluciferaseiswidelyusedasareporterforstudyinggeneregulationandfunction,andforpharmaceuticalscreening.Itisaverysensitivegeneticreporterduetothelackofendogenousactivityinmammaliancellsortissues.However,thelightproductionresultingfromthereactionleadstoformationofsuicidaladenyl-oxyluciferinattheenzymesurface.Itresultsinveryshorthalf-lifeofthelightemissionwithaflash-typekinetics.Becauseofthis,flash-typeluminescencemustbedetectedimmediatelyafterinitiatingthereaction,whichisnotcompatIBLewithbatchanalysisofsamples.

Biotium’sSteady-Luc™HTSassaysystemisaproprietarymixtureofsubstancesthatmodifytheenzymaticreactiontoproducealonglastingsignal(steadyglow)bypreventingtheformationofadenyl-oxyluciferinattheenzymesurface.Itisahomogeneoushighsensitivityfireflyluciferasereportergeneassaykitwithahalf-lifeofabout3hoursforthequantificationoffireflyluciferaseexpressioninmammaliancells,allowingbatchprocessinginmicroplates.

Glow-typeluciferaseassayslikeSteady-Luc™havelowerluminescencesignalcomparedtoflash-typeassays.Thesensitivityandlimitofdetectionoftheassaywilldependonluciferaseexpressionlevelsinyourexperimentalsystemaswellasluminometersensitivity.

BiotiumalsooffersSteady-Luc™FireflyHTSAssayKit(Lyophilized)(catalogno.30028L),anewpackagingformatthatincludeslyophilizedassaybufferforconvenientroomtemperatureshippingandstorageat-20°C.

KitComponents:

  • D-Luciferin
  • Steady-LucFireflyAssayBuffer

Features:

  • Simple:singlestephomogeneousassay.
  • Glowkinetics:luminescencehalflifeofabout3hours.
  • Economic:saveupto45%comparedtootherbrands.

MoreLuciferaseKits

CatalognumberProductDescription
30085FireflyLuciferaseAssayKit2.0Flash-typefireflyluciferaseassaykit.
30075FireflyLuciferaseAssayKit(Lyophilized)Fireflyluciferaseassaykitwithlyophilizedassaybufferforeconomicalroomtemperatureshippingandconvenientstorageat-20°C.
999235XFireflyLysisBufferExtralysisbufferforusewithFireflyLuciferaseAssayKits,onlyrequiredifusingwellsizeslargerthan24-well.
30028Steady-Luc™FireflyHTSAssayKitGlow-typefireflyluciferaseassaywithsignalhalf-lifeofabout3hoursforhigh-throughputscreeninginmulti-wellplates.
30028LSteady-LucFireflyHTSAssayKit(Lyophilized)Steady-Luckitwithlyophilizedassaybufferforeconomicalroomtemperatureshippingandconvenientstorageat-20°C.
30082RenillaLuciferaseAssayKit2.0Flash-typeRenillaluciferaseassaykit.
999125XPassiveLysisBufferExtralysisbufferforusewithRenillaLuciferaseAssayKits,onlyrequiredifusingwellsizeslargerthan24-well.
30081FireflyandRenillaLuciferaseSingleTubeAssayKitAssaykitformeasuringfireflyandRenillaactivitiessequentiallyinthesamesampleinasingletube.
99821-100mL1XPassiveLysisBuffer2.0ExtralysisbufferforusewithFirefly&RenillaSingleTubeAssayKits,onlyrequiredifusingwellsizeslargerthan24-well.
30020ATP-Glo™BioluminometricCellViABIlityAssayKitFlash-typeluminescence-basedassayformeasuringcellviabilityorATPconcentration.
22003MiniCellScrapersMini-cellscrapers,usefulforlysingcellsin96-well,48-well,or24-wellplates.

References

n/a

Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,公司位于美国加利福尼亚的BAYAREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多,包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料GelRedGelGreen,以及最新推出的CheetahTaq热启动酶个CF系列蛋白质标记染料等等。


GelReD®是一种超灵敏、极稳定和环境安全的荧光核酸染料,用于取代高毒性溴化乙锭(EB),用于在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中染色dsDNA、SSDN或RNA。GelRed®比EB敏感得多,无需拆解步骤。
GelReD®和EB具有几乎相同的光谱,因此您可以直接更换EB与GeldRead®,而不改变您现有的成像系统。
凝胶红可用于琼脂糖凝胶中dsDNA、ssDNA或RNA的预染色或后染色。凝胶红还可用于聚丙烯酰胺凝胶中dsDNA、ssDNA或RNA的后凝胶染色。因此,凝胶化与下游DNA操作(如限制性消化、测序和克隆)兼容。
优势

1.比EB更安全:Ames试验和其他试验显示无致突变和非细胞毒性

2.易处理:通过直接排放到下水道或常规垃圾中的环境安全试验

3.超灵敏:比EtBr和SYBR®安全型更灵敏

4.非常稳定:可在水中使用,在室温下长期储存稳定,可微波

5.使用简单:非常简单的预处理或电泳后凝胶染色程序

6.与标准紫外线透照仪兼容:无需改变光学设置即可替代EtBr

7.与下游应用兼容:凝胶纯化、限制性消化、测序和克隆



GelRed和GelGreen是设计以取代剧毒的代替高毒性的溴化乙锭(EtBr)的新一代核酸凝胶荧光染料。Biotium科学家研发的GelRed和GelGreen集低毒性、高灵敏性和出色的稳定性等优点于一体,效果由于EtBr及其他EtBr替代品。


几十年来,EtBr因极其低廉的价格,一般的灵敏度,一直被用作核酸凝胶染色的主要染料。然而EtBr是一个高度诱变的物质。该染料的使用安全隐患,净化及废物处置的相关费用等,终导致其代价高昂。正因如此,近年来市场上出现了一些替代品,如SYBR系列染料等。尽管这些替代染料减少了致突变性,但却丧失了染料其他方面的功能。例如,SYBRSafe的灵敏度很低,SYBRGreen及SYBRGold的稳定性远远低于EtBr。SYBR染料能快速的进入细胞,结合线粒体及细胞核DNA,是的染料在一定浓度是有毒的。事实上,在紫外线或其他诱变剂诱导下,SYBRGreenI强烈的突变性已经被广泛认知。(Ohta,etal.MutRes492,91(2001))

为了保证GelRed和GelGreen的安全性,Biotium的科学家采用一种新型非常简单的概念:阻止染料进入活细胞减少遗传毒性。我们相信,不给DNA结合染料渗透活细胞中结合基因组DNA的机会,便可以保证染料没有或大幅度减少其诱变性作用。因此,我们设计的GelRed和GelGreen染料拥有独特化学结构保证其无法渗透细胞膜。Ames试验验证即使浓度远远高于实验者操作凝胶染色的工作浓度,GelRed和GelGreen也无诱变性。此外,环境的安全性试验表示,GelRed和GelGreen是完全无害的,对水生生物无毒。因此,废弃的GelRed和GelGreen可以直接倒入下水道,或按照普通垃圾处理。


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2018-12-26
METHOD 1:Formaldehyde preservative – 2% formaldehyde solution in protein-free phosphate-buffered saline (PBS).Prepare as follows:Add 2 g paraformaldehyde powd 查看更多>
2018-12-26
Invertebrate embryos develop at different rates depending on the temperature of incubation. Descriptive stages based on the number of cells and their arrangeme 查看更多>
本方案中,我们介绍了载体(请见图 17-4) 转染哺乳动物细胞后,测量荧光素酶表达的方法。用本方案所述方法制备的细胞裂解物,也可以直接测量其他如 CAT、β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶的酶活性。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。 查看更多>
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L-乳酸脱氢酶测定实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/themes/ifra... 查看更多>
免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。 查看更多>
2018-12-26
原代培养细胞,关键是消化,我一般酶液是新配的,要足量啊(又一次还剩三排的时候,一同学把酶液碰到水浴锅,害的我借得酶液,耽误了时间,而且组间数据紊乱,最后浪费细胞和染料,大家要注意保护好酶液啊),这样每次心理都有底,而且放入水浴37度30min,甚至扔到培养箱(不建议采用)升温。 查看更多>
Steve HahnLast updated 9/30/98This Dye measures DNA concentration using a fluorescent dye which binds only double stranded DNA. The fluorescence of this dye is 查看更多>
培养细胞可用各种方法染色,有一般和特殊之分;一般染色为观察细胞一般形态之用,特殊染色为用于观察细胞的特殊成分和结构的染色方法。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社) 查看更多>
本实验方法来源于第四军医大官方网站 查看更多>
三酰甘油脂肪酶,三酰甘油酰基水解酶。 查看更多>
AP Buffer: 100 mM Tris-HCl, pH 9.5 100 mM NaCl 10 mM MgCl2 PTM: PBS 0.1% Tween-20 2 mM MgCl2 Since this is generally done in conjunction with lacZ staining, em 查看更多>
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荧光染料是一些具有特殊结构的化合物,其结构特征主要有以下三点:
(1)、分子内含有发射荧光的基团,如羰基、氮氮双键、碳氮双键等。
(2)、分子内含有助色基团。助色基团使光谱红移并增大荧光效率,如伯胺基、仲胺基、羟基、醚键、酰胺基等。
(3)、分子内含有刚性平面结构的共轭π键。分子内共轭体系愈大平面性愈强其荧光强度愈高。一些能提高共轭度的因素能提高荧光效率,并使荧光波长向长波方向移动。 就是荧光染料的附着物,主要作用有帮助荧光染料展色、提高荧光染料与下游树酯的相溶性、保护荧光染料的性能。通常载体树脂是强极性树脂,分子中含有胺基、羟基、醚键、酰胺基等强极性基团,一方面有助色作用,增大荧光效率;另一方面与荧光染料有很好的相溶性,有助于染料的均匀分散。
荧光颜料常用的载体树脂有胺基树脂、苯代三聚氰胺一甲醛树脂、聚丙烯酸酯树脂、聚酰胺树酯、聚酯树脂、聚氨酯树脂等。 (1)、热塑性荧光颜料:线型
(2)、热固性荧光颜料: 体型
(3)、可溶解色精荧光颜料
(4)、水乳型荧光颜料 (1)、胺基树酯
(2)、聚酰胺树酯
(3)、聚酯树酯
(4)、丙烯酸乳液 (1)、塑胶类
低温型
中温型
高温型
(2)、涂料类
水性涂料
油性涂料
粉末涂料 (1)、含甲醛
(2)、不含甲醛
第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白(phycobiliproteins)和从蓝藻(cyanobacteria)中提取的触角光合色素(photosynthetic antenna pigments)。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团(bilin chromophores)。这些生色基团都包裹在一种基质结构中,这样就能将它们的淬灭作用降至最小,因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头(分子量高达200KD)”也限制了它们在细胞内的扩散,因此,它们也只能与抗体联用,在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。

请问各位大神,哪些荧光染料可以直接用来染色细菌的胞外多糖,然后再用激光共聚焦显微镜观察。是关于生物被膜方面的。求各位高手帮忙啊,谢谢!

目前荧光免疫产品中多数用的是荧光素还是荧光微球还是荧光染料
抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法
⑴荧光物质
1)荧光色素
许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有:
⑴异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4,最大吸收光波长为490--495nm,最大发射光波长520--530nm,呈现明亮的黄绿色荧光,结构式如下:
有两种同分异结构,其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好,在冷暗干燥处可保存多年,是应用最广泛的荧光素。其主要优点是:①人眼对黄绿色较为敏感,②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
⑵四乙基罗丹明(rhodamine,RIB200)为橘红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮。性质稳定,可长期保存。结构式如下:
最大吸收光波长为570nm,最大发射光波长为595~600nm,呈橘红色荧光。
⑶四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC)结构式如下:
最大吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合,但荧光效率较低。
⑵其他荧光物质
1)酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。
2)镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕(Eu3 )、铽(Tb3 )、铈(Ce3 )等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光,其中以Eu3 应用最广。Eu3
螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于分辨荧光免疫测定。展开
大家好!因为是新手,所以想知道只有molecularprobe的SYBEGREENI荧光染料,其他都是用于普通PCR的(Mg2+、Taq酶),仪器是ABI7900实时定量PCR系统,是否能作相对定量PCR啊?:~(?)(?)(?)
染料的荧光跟重金属之间没有必然联系。一般含有重金属的染料都是金属络合染料,现在几乎绝迹了。现在大多数染料都是活性、直接、还原和分散这几种类型。都是不含重金属的。而带有荧光的染料是非常少的,只有那么几种,跟重金属没有丝毫关系。
生物物质,比如细胞内的大分子,都会产生荧光。不过比起专门的荧光染料来,强度要低很多。被激光照射后,所产生的荧光就是背景荧光
细胞膜片钳实验123
弘水山2017-10-02
光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopeCLSM)近代先进细胞物医析仪器目前激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、理、立体结构重组、态变化程等研究并提供定量荧光测定、定量图像析等实用研究手段结合其相关物技术形态、
荧光染料与DNA作用机制123
zhang8404072021-08-17
我最近要用到嵌入DNA双链间的荧光染料,只找到一个EB,可是它的毒性特别大,后来在文献看到GelRed和GelGreen染料、SYTOX系列染料,我想请教高人一下,这些染料是通过嵌插方式与DNA双链作用的吗?而且不能插入到双链的大、小勾之间,必须是插入到碱基之间的。...
我发过的帖子,版主为什么给我删了?
我想用共聚焦观察间期染色体,用涂染探针,有一个问题很困扰我,我想涂染完染色后用DAPI复染细胞核,但是目前哈尔滨的共聚焦都没有紫外激发光,不能激发DAPI,我怎么才能实现,用红色涂一条染色体,用绿色涂另一条,用DAPI蓝色染核,同时成像呢,所说的双光子显微镜可以么?我实在很迷惑,求求版主别再删我的帖子,尽管我现在只是一个索取者,还不能给大家提供有用的信息,但是相信有一天会为大家做贡献的,谢谢了
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。向左转|向右转
荧光染料激发光和发射光什么意思123
鱼死网破痰蘸92021-08-09
荧光激发光谱:让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光,而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上,然后以激发光波长为横坐标,以荧光强度为纵坐标所绘制的图,即为荧光激发光谱。荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关 。 荧光发射光谱:...