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This antibody reacts with the stage-specific embryonic antigen-4 (SSEA-4), a glycolipid carbohydrate epitope that is expressed upon the surface of human teratocarcinoma stem (EC), embryonic germ (EG), embryonic stem (ES), and induced pluripotent stem (iPS) cells. No immunoreactivity is evident with undifferentiated murine EC, ES/iPS and EG cells. Expression of SSEA-4 is down regulated following differentiation of human EC cells. In contrast, the differentiation of murine EC and ES/iPS cells may be accompanied by an increase in SSEA-4 expression.
Sample Data
Figure A: FC analysis on H1 human ES cells at a 1:100 dilution.Red histogram represents SSEA-4 Antibody and open histogram represents isotype control. A PE-conjugated anti-Mouse IgG was used as the secondary antibody. Figure B: ICC analysis on H1 human ES cells. Cells were stained with SSEA-4 Antibody at a 1:100 dilution followed by an Alexa 488-conjugated secondary antibody (green). Nuclei were counterstained with DAPI (blue).
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Details
| Concentration | 0.5 mg/mL |
|---|---|
| Species Reactivity | Human |
| Host | Mouse Monoclonal |
| Clone | MC-831-70 |
| Isotype | IgG3 |
| Immunogen | Human embryonal carcinoma cell line 2102Ep |
| Formulation | Aqueous buffer, 0.09% sodium azide. |
| Storage and Stability | Store at 2-8°C. Stable for 6 months from date of receipt when stored as directed. |
| Applications Tested | Flow Cytometry (FC), Immunocytochemistry/Immunofluorescence (ICC/IF) |
| Recommended Dilutions | Flow Cytometry 1:100Immunocytochemistry/Immunofluorescence 1:100It is recommended that the antibody be titrated for optimal performance for each application. |
| Alternative Names | Stage-specific embryonic antigen 4 |
| References | Battula, V.L., et al. (2007) Human placenta and bone marrow derived MSC cultured in serum-free, b-FGF-containing medium express cell surface frizzled-9 and SSEA-4 and give rise to multilineage differentiation. PMID: 17288545Kannagi, R., et al. (1983) Stage-specific embryonic antigens (SSEA-3 and -4) are epitopes of a unique globo-series ganglioside isolated from human teratocarcinoma cells. EMBO J 2: 2355-2361. PMID: 6141938 |
| Technical Documents | ST11015 Technical Data Sheet |
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但是在选择的时候，也需要注意其他的一些问题。
1、采用何种原料和抗体，是否高效、灵敏、特异
2、规范包被操作，吸附是否均匀
3、重复性、可靠性
6、是否提供技术服务
7、适用于血浆、血清、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种类型的样本
8、可检测动物类型是否丰富
9、可检测指标是否齐全
elisa试剂盒就查下博欧特生物
使用方法：
1、 血清：操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆：EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液：1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液。
5、 保存：如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
近期，上海公卫临床研究中心的一位研究生应用两种转染试剂Turbofecttransfectionreagent（Thermo）和EntransterTM-R4000（Engreen）进行了一次RNA转染比较。比较情况如下：
实验方法
转染试剂：Turbofecttransfectionreagent（Thermo）和EntransterTM-R4000（EngreenBiosystemCo,Ltd）
待处理细胞：humanCD8+T细胞
1.针对Turbofect转染的方法
每孔培养体积均为100μL，细胞数目在105左右。
取0.5μLagomir，加入9.5μL无血清RPMI1640，充分混匀；
取0.2μLTurbofecttransfectionreagent和agomir稀释液充分混合。
转染复合物制备完成；混匀后室温下孵育15-20分钟，直接取10μL加入已铺好细胞的孔中，继续培养24h收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。
转染Mix的配制：100nMago/N.C.：（0.5μLagomir+0.2μLTurbofect+9.3μL无血清的RPMI1640）×2.5=1.25+0.5+23.25
2.EntransterTM-R4000转染
每孔培养体积均为100μL，细胞数目在105左右。
取0.5μLagomir，加入9.5μL无血清RPMI1640，充分混匀，制成10μLagomir稀释液；
取0.25μLEntransterTM-R4000，然后加入9.75μL无血清稀释液体，充分混匀，制成10μLEntransterTM-R4000稀释液；
将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合（可用振荡器或加样器吹吸10次以上），室温静置15分钟。
转染复合物制备完成；
将20μL转染复合物加入孔中的细胞悬液中，前后移动培养皿，混合均匀；
转染后6h观察细胞状态，并更换培养基，继续培养24h后收取细胞，用PBS洗涤3次以上，以备RNA抽提。
转染Mix的配制：100nMago/N.C.：（0.5μLagomir+9.5μL无血清的RPMI1640）×2.5=1.25+23.75；Etranster稀释液：（0.25μLEtranster+9.75μL无血清的RPMI1640）×5=1.25+48.75（室温静置5分钟），取20μL至ago和N.C.管中，室温静置15分钟。
实验结果
结论：从目的miRNA表达水平的检测结果来看，转染24h后，英格恩生物公司（EngreenBiosystem）的EntransterTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。
讨论：从实验结果来看，英格恩生物公司（EngreenBiosystem）的EntranstenTM-R4000(ago/NC:422912倍)转染试剂的效果优于Turbofect转染试剂(ago/NC:285870倍)。EntransterTM-R4000是英格恩生物（EngreenBiosystem）最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。EntransterTM-R4000不仅可以转染小RNA，而且针对mRNA等长链RNA优化。该试剂可将RNA导入多种细胞系，包括原代细胞和悬浮细胞。无论有无血清、抗生素存在均可获得很高的转染效率。
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分，主要是脂多糖中的类脂A，在细菌被裂解时被释放出来，由于其化学结构和特性，在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率，此外会激活造血细胞（如B细胞、巨噬细胞等）的非特异免疫反应，造成实验的假阳性，所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
对重复性要求不高的试验，一般没有问题的，只不过可能需要增加一些转染试剂用量了。
为了避免这个问题，推荐收到货之后，进行适当分装，用多少，拿出来多少最好。
如题，PolyplusTransfection转染试剂在中国区的代理商有哪些？求推荐1-2个靠谱的，谢谢！
