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RandominsertionofR6KoriginforrescueofflankingDNAorplasmids
- InsertR6KoriginrandomlyintoanyDNAsequenceinvitro
- Skipprimerwalking-simplifySangersequencingoflargeDNAinserts
- RescueclonesinE.colihostexpressingthepirgeneproduct
- MinimizeinsertionbiaswiththehyperactiveTn5system,knownforhighestlevelofrandomness
Applications
- "Rescue"ofplasmidsoranyothercircularizedDNA(e.g.,mitochondrialDNA)thatwouldnototherwisereplicateinE.colibecausetheylackarecognizableoriginofreplicationand/oraselectableMarker.
- PreparationofDNAsequencingtemplatesfromtransposoninsertioncloneswithoutprimerwalkingoradditionalsubcloning.
- Creationofalibraryofrandomgeneknockoutsinvitrotofacilitategeneticanalysisofplasmid-encodedgenes.
TheEZ-Tn5™<R6Kγori/KAN-2>InsertionKit*facilitatesthesequencingandgeneticanalysisofplasmidsoranyothercircularizedDNAthatwouldnototherwisereplicateinE.coli.1,2ThekitisbasedupontheEZ-Tn5™<R6Kγori/KAN-2>TransposonwhichcarriestheE.coliR6Kγconditionaloriginofreplication(R6Kγori)andakanamycinresistancemarker.Asimple,one-step,2-hourinvitroreactionrandomlyinsertsthetransposonintothetargetDNA.ThenanaliquotofthereactionisusedtotransformanE.colihostexpressingthepirgeneproduct,whichisrequiredforreplicationfromtheR6Kγori.Insertionclonesareselectedonkanamycinplatesandcanbesequencedbidirectionallyusingtheprovidedprimersthatarehomologoustotheendsofthetransposon.ClonescanbemaintainedinEpicentre'sTransforMax™EC100D™pir+orTransforMax™EC100D™pir-116strains.3
 | Figure1.AplasmidcontainingtheEZ-Tn5™<R6Kγori/KAN-2>TransposoncanbemaintainedinTransforMax™EC100D™pir+cellsat~15copiespercell(Lanes1-4)orTransforMax™EC100D™pir-116cellsat~250copiespercell(Lanes5-8).ColoniesfromrandomlychosencloneswereprocessedusingtheColonyFast-Screen™Kit.A5-microliteraliquotoflysatewasloadedperlane.M,supercoiledDNAladder. |
References
- Jendrisak,J.etal.(2002)EpicentreForum9(1),14.
- Yoon,Y.andKoob,M.(2003)EpicentreForum10(2),10.
- Metcalf,W.W.etal.(1994)Gene138,1.
*Coveredbyissuedand/orpendingpatents,exclusivelylicensedorassignedtoEpicentre®(anIllumina®Company).
ORDERINFORMATION
EZ-Tn5™Transposase,EZ-Tn5™<R6Kyori/KAN-2>Transposon,EZ-Tn5™10XReactionBuffer,EZ-Tn5™10XStopSolution,ForwardandReversePrimers,ControlTargetDNA,SterileWater.蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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高效、低毒性siRNA转染试剂，成功转染的细胞系包括：HeLa S3, HT-1080, HT-29, CHO K1, J774, A549, BxPC3, DU145, HeLa, H1299, MCF7, MDA-MB453, hMSC, SKBR3, H9C2, NIH/3T3, COS7, 786-0, DLD-1, GM5756T, H2122, HCC193, HCT116, Huh7, IMR-32, Jurkat, MS53, PANC-1, PANC-10, SK-OV-3, SKW6. 查看更多
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2016-04-14
活动时间：2016年4月1日-5月31日点击查看该活动全部商品列表：http://www.holdbio.com/article.php?id=291一、细胞培养类 培养基 目录号 产品名称 规格 目录价 促销价 品牌 L110 高糖DMEM培养基，含L-谷氨酰胺和丙酮酸钠 ... 查看更多
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2021-07-15
同仁化学研究所向中国市场新推出HilyMax基因转染试剂，同仁化学研究所的新型阳离子脂质体基因转染试剂HIlyMax最近在实验方面有了新的进展，即H1299细胞的实验条件已经成熟。 查看更多
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METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂是由深圳市库源生物科技有限公司代理或销售的biontex品牌的试剂，产品来源于德国。深圳市库源生物科技有限公司是中国最权威的METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂试剂销售服务商之一，在深圳等地方销售METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的METAFECTENE EASY+易操作低毒性转染试剂 查看更多
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2018-12-26
一、提取抗原蛋白将提取RNA途中留存的样品，加入150μl 100%酒精充分混匀，静置5min(RT), 2000×g , 4℃离心5min, 吸取上清至新管中, 加入750μl异丙醇, 混匀, 静置10min(RT), 12000×g, 4℃离心10min, 弃上清, 加入1ml 0.3mol/L盐酸胍/95%酒精 查看更多
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2016-12-08
济南思科生物科技有限公司在发布的PolyJet™体外DNA转染试剂（免费试用）供应信息，浏览与PolyJet™体外DNA转染试剂（免费试用）相关的产品或在搜索更多与PolyJet™体外DNA转染试剂（免费试用）相关的内容。 查看更多
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2017-03-03
货号：SL100566 查看更多
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2021-09-14
原代细胞核酸转染仪所采用的技术是德国amaxa公司的Nucleofector™ 专利创新技术，其原理是采用独特的电场参数与细胞类型特异的转染溶液相结合的方法，直接将DNA转到细胞核内，即使是原代细胞（包括不分裂的血细胞或神经元），转染后2-4小时就能检测到转染基因的表达。转染效率高，操作简单方便。... 查看更多
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针对广泛的细胞类型被引用最多的通用试剂 针对质粒传递的最有效的试剂 强效和低细胞毒性 针对siRNA/miRNA传送最有效的试剂 高效的gene knock-down 针对所有细胞株的高效电穿孔 Lipofectamine® 2000Learn more > Lipofectamine® LTXLearn more > Lipofectamine® RNAiMAXLearn more > Neon® Trans... 查看更多
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2021-08-08
为siNRA和质粒共转染所优化的高效、超低毒性转染试剂DharmaFECT Duo是一种全新的可高效共转染siRNA和质粒的转染试剂。而上述DharmaFECT 1,2,3和4则仅是针对siRNA单独转染的优化产品。虽然共转染siRNA和质粒进行报告基因系统研究越来越普遍，但对应的能够高效共转染siRNA和质粒的转染试剂则很匮乏；大部分的研究者依然运用传统的质粒转染试剂进行siRNA转染或者siRNA和质粒的共同转染，但是这些试剂没有经过转染条件的优化，往往对细胞活力产生很大的毒副作用。基于此，Dharm 查看更多
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2016-11-17
EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒是由仁源生物技术（上海）有限公司代理或销售的仁源生物技术（上海）有限公司品牌的试剂，产品来源于上海。仁源生物技术（上海）有限公司是中国最权威的EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒试剂销售服务商之一，在上海等地方销售EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的EZ-TransTM哺乳动物细胞转染试剂盒产品 查看更多
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2021-09-18
北京强欣博瑞生物技术有限公司在发布的转染试剂PolyFect Transfection Reagent (1ml)供应信息，浏览与转染试剂PolyFect Transfection Reagent (1ml)相关的产品或在搜索更多与转染试剂PolyFect Transfection Reagent (1ml)相关的内容。 查看更多
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商品咨询
质粒转染细胞 实验方法123
eosrtihlear2017-10-03
如果提质粒的试剂盒没有去内毒素功能提出的质粒一般就有内毒素
细胞转染试剂的比较和选择123
偷星11572021-07-28
试剂方面，大致下面三个组分。DNA转染试剂制备复合物需要的基础培养基或者150mM氯化钠溶液。
亲们,你们用了有啥效果没?求真实用过的人回答。谢谢! 123
文店08212017-10-03
有 效果确实不错。
荧光互作转染细胞质粒和转染试剂需要孵育吗大众点评网123
纯洁潇潇7邿82021-07-27
荧光互作转染细胞质粒和转染试剂需要孵育
质粒转染一般是说DNA转染，用常用的sinofection等转染试剂就可以；
小干扰RNA（Small interfering RNA；siRNA）有时称为短干扰RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，这种RNA的转染需要用专门的RNA转染试剂。
质粒转染一般是说DNA转染，用常用的sinofection等转染试剂就可以；
小干扰RNA（Small interfering RNA；siRNA）有时称为短干扰RNA（short interfering RNA）或沉默RNA（silencing RNA），是一个长20到25个核苷酸的双股RNA，这种RNA的转染需要用专门的RNA转染试剂。
【求助】转染试剂用什么好呢 细胞技术讨论版论坛123
Cloud灬2462021-07-31
FuGENE® 6，FuGENE® HD，Lipofectamine 2000这几个是用得很广泛的，其他的也有很多，根据用途来选。厚百holdbio:向左转|向右转
体内转染试剂的重大突破_问答详情_转染试剂_基因编辑_分子类_蚂...123
beijingqingnian2021-07-26
相关疾病：肿瘤癌症支气管哮喘EntransterTM-invivo是英格恩生物公司（EngreenBiosystemCo,...
siRNA的转染方法及注意事项 实验方法123
qiantaai32021-07-24
想用RNAiMAX或者lipo2000转染siRNA，但是看了下转染试剂的说明书和锐博的siRNA说明书，觉得分别对siRNA的用量描述差别挺大的呀，不知道到底该参考哪个呢。
以24孔板为例在siRNA说明书中写到，siRNA终浓度是50nM的话，加入浓度为20μM的siRNA1.25ul，每孔体积是500ul，那这样的话，每孔最终siRNA的量是25pmol。
但是在RNAiMAX或者是lipo2000说明书中，一个写的每孔siRNA用量是5pmol，一个是500ng，这与siRNA厂家所提供的量相差也太多了吧。
到底该看哪一个呢。
ps.一旦siRNA的量和体积确定下来之后，转染试剂的量和siRNA1:1的加就可以了吗？
请各位大神解答。
1.siRNA说明书中的用量，红线圈出
2.RNAIMAX说明书中siRNA的用量。
3.lipo2000说明书中siRNA用量
【精品推荐】转染新宠PEI 40000更高效的转染试剂 产品资讯...123
luozi992021-07-25
如何选择siRNA转染试剂 123
天宇熞攀62017-10-03
Dharmacon
Polyplus Transfection 阳离子聚合物转染试剂北京诺博莱德科技有限...123
cczltdy2021-07-29
如题，PolyplusTransfection转染试剂在中国区的代理商有哪些？求推荐1-2个靠谱的，谢谢！
人肾癌786o细胞株侵袭力和迁移力的实验与研究123
孤傲gurx2017-10-03
786-o cell用什么转染试剂
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分，主要是脂多糖中的类脂A，在细菌被裂解时被释放出来，由于其化学结构和特性，在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率，此外会激活造血细胞（如B细胞、巨噬细胞等）的非特异免疫反应，造成实验的假阳性，所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁(cellwall)上的特有成分，主要是脂多糖中的类脂A，在细菌被裂解时被释放出来，由于其化学结构和特性，在质粒的纯化过程中很容易混入质粒DNA一同提取出来。内毒素的存在会严重的影响质粒转染细胞的效率，此外会激活造血细胞（如B细胞、巨噬细胞等）的非特异免疫反应，造成实验的假阳性，所以转染级质粒的提取纯化必须去除内毒素。
罗氏转染试剂转染后显微镜下出现许多小亮点,需要换培养基么？可以...123
lordwish2021-07-30
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