General information
Champion™ Competent Cells are chemically competent cells, which were prepared by SMOBIO to make E. coli perform excellent transformation efficiency. Standard transformation protocol is recommended for large plasmids or non-ampicillin selection. Time-saving transformation protocol is recommended for simple and rapid transformation. Champion™ Competent Cells are one of the fastest and simplest ready-to-use competent cell products in the world.
Kit contents
Champion™ Competent Cells
pUC19 Control Plasmid (5 μl, 10-4 μg/μl)
Champion™ Transformation Protocol Card
Shipping condition
Throughout the shipping process, the temperature is maintained under -70°C.
Storage and expiration
Champion™ Competent Cells must be stored between -70°C to -80°C. Subsequent freeze-thaw cycles will reduce transformation efficiency. If high efficiency is required for the experiment, do not use aliquots that have gone through several freeze-thaw cycles. The efficiency of Champion™ Competent Cells lasts for 1 year with proper storage.
Genotypes and applications
Product Name | Genotype | Application |
Champion™ 109 High | e14(McrA-)recA1 endA1 gyrA96 hsdR17(rk-, mK+) phoA supE44 thi-1 relA1 ∆(lac-proAB) (F’traD36 proAB lacIqZ∆M15 | Appropriate for blue-white color and robotic screening. It is a fast growing strain forming visible colonies within 8~10 hours. |
Champion™ 21 | F’ ompT hsdSβ(rβ-mβ-) dcm gal λ (DE3) | Appropriate host for recombinant protein expression using T7-based expression vectors. |
Champion™ DH5α High | recA1 endA1 gyrA96 hsdR17(rk-, mK+) phoA supE44 relA1 thi-1 ∆(lacZYA-argF)U 169 φ80 ∆(lacZ)M15 F’ | Suitable for cloning with large plasmid and cDNA library construction, and also for blue-white colony selection. |
Items and ordering information
Product Name | Compatible to E. coli strain | Efficiency (cfu/μg) | Quantity | Cat. No. |
Champion™ 109 High | E. coli JM109 | >1 x 108 | 100 μl x 80 vials | CC0202 |
100 μl x 24 vials | CC0204 | |||
Champion™ 21 | E. coli BL21 (DE3) | >1 x 107 | 100 μl x 80 vials | CC2102 |
100 μl x 24 vials | CC2104 | |||
Champion™ DH5α High | E. coli DH5α | >3 x 108 | 100 μl x 80 vials | CC5202 |
100 μl x 24 vials | CC5204 |
Manual
Manual_Champion™ Competent Cell
SDS
SDS_Champion™ Competent Cell
Flyer
Champion™ Competent Cell
Protocol card
Will transformation efficiency be reduced when Champion™ competent cells are thawed, dispensed and refrozen repeatedly?
When Champion™ competent cells are thawed dispensed in aliquots and refrozen within 1 min, the transformation efficiency will be 10~20% reduced compared to the first time use.
What is the advantage of thawing competent cells with circulating water instead of still water?
Using circulating water can reduce the thawing time. Less thawing time shows higher efficiency than long thawing time.
Is there any difference of transformation efficiency between using plating beads, bending glass rod and plating loop?
The bending glass rod shows best efficiency and the plating loop show less efficiency than other method. For handle a lot samples at the same time the plating beads are recommended.
Is 1 second vortex critical for mixture the DNA?
One second vortex provides more reliable transformation efficiency (1.1 times compare with mixed by finger tapping)
Will heat shock affect the transformation efficiency?
Heat shock treatment will enhance the efficiency about 1~2X versus non-heat shock method.
Factors Affecting Transformation Efficiency
Thawing methods
Shorter thawing time is more efficient than a longer thawing time. Slow thawing caused by power shortages and unstable freezers will result in decreased efficiency.
Size of plasmid
Plasmid size affect the efficiency greatly. The efficiency of transforming a supercoiled 2.7 kb is approximately 100 times higher than that of a 10 Kb plasmid (using time-saving transformation protocol). For large plasmids (> 6 kb), standard transformation protocol is recommended.
Heat shock treatment
Heat shock treatment will enhance the efficiency about 1~2 folds versus non-heat shock method.
Plating methods
Bent glass rods show the greatest efficiency, while plating loop shows less efficiency than plating beads. When handling a large quantity of samples at the same time, plating beads are recommended.
Concentration of antibiotic
Antibiotic concentration is critical to use of the time-saving transformation protocol.
Antibiotic | Concentration |
Ampicillin (Ap) | 20 μg/ml |
Kanamycin (Km) | 25 μg/ml |
Tetracycline (Tc) | 7.5 μg/ml |
Chloramphenicol (Cm) | 20 μg/ml |
For plasmid size <6 Kb, the efficiency of kanamycin selection is usually 3~10 times less than the ampicillin selection. For plasmid size > 6 Kb, the efficiency of kanamycin selection is much lower than ampicillin. We suggest using the standard transformation protocol (with heat shock and recovery steps) to enhance the efficiency.
Product Name | Compatible to E. coli strain | Efficiency (cfu/μg) | Quantity | Cat. No. |
Champion™ 109 High | E. coli JM109 | >1 x 108 | 100 μl x 80 vials | CC0202 |
100 μl x 24 vials | CC0204 | |||
Champion™ 21 | E. coli BL21 (DE3) | >1 x 107 | 100 μl x 80 vials | CC2102 |
100 μl x 24 vials | CC2104 | |||
Champion™ DH5α High | E. coli DH5α | >3 x 108 | 100 μl x 80 vials | CC5202 |
100 μl x 24 vials | CC5204 |
High Fidelity PCR amplification
Amplification of target gene with HiFi™ DNA polymerase to minimize error rate.
[TF1000] SMO-HiFi™ DNA Polymerase, (1 U/μl, 100 U)
[TF3000] G-HiFi™ DNA Polymerase, (1 U/μl, 100 U)
Gel electrophoresis
Staining amplicons with safe fluorescent dyes, following by observation under blue-light illuminator to minimize damage of DNA amplicons and maximize successful cloning efficiency.
Safe fluorescent dyes
[NS1000] FluoroVue™ Nucleic Acid Gel Stain (10,000X), 500 μl
[DS1000] FluoroStain™ DNA Fluorescent Staining Dye (Green, 10,000X), 500 μl
[DL5000] FluoroDye™ DNA Fluorescent Loading Dye (Green, 6X), 1 ml
Blue-light illuminator
[VE0100] B-BOX™ Blue Light LED Epi-illuminator
Ligation
Blund-end PCR amplicons can directly ligate with PCR cloning vector.
[CV1000] GetClone™ PCR Cloning Vector, 20 Rxn
[CV1100] GetClone™ PCR Cloning Vector II, 20 Rxn
Colony PCR
Analyze colonies with PCR master mix to save preparation time.
[TP1100] ExcelTaq™ 5X PCR Master Mix, 200 Rxn
[TP1200] ExcelTaq™ 5X PCR Master Dye Mix, 200 Rxn
ebiomall.com
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2、【仪器型号】:SX-500
3、【生产厂家】:日本TOMY
4、【检测适用范围】:高压蒸汽灭菌
5、【仪器使用优点、缺点】:必填项。其中缺点若觉得不便评论的大家可以不写,但若评价较为客观科学,我们还是鼓励的!我想仪器公司见到此帖也会根据我们的建议和评价来改进他们的工作!
6、【仪器外观描述或者图片】:见附件。
7、【说明书或者操作规范】:
对于传统的水平装入的高压蒸汽灭菌器,方形的提篮放入圆形的内腔,浪费了接近36%的内腔体积。Tomy产品的上部装入式设计充分地优化利用了内腔的空间,将要灭菌的物品直接放入内腔中,或将要灭菌的物品放入圆形提篮(标准附件)中再放入内腔中。顶部装入设计使样品的处理更加容易和样品处理量增大。顶部装入设计使高压蒸汽灭菌器可以安装在地面上,不需要支架和台面或节约了有限的台面。SX系列高压灭菌器顶部的操作仅需单手或单脚即可操作;打开顶盖只需用脚踩下位于底部的开关踏板,顶盖锁即打开,顶子即向上自动打开;关闭顶盖也非常轻松容易,只需将盖子压下即可。集成式设计,节约安装和使用空间。标准配备一个快速空冷系统,使高温高压后的温度能快速的降低到常温,极大地缩短了操作时间;同时该功能可用于较低温度的循环灭菌操作。可以采用定时钟设定定时启动,节约实验预备时间。操作面板上设置大型的指示灯通过颜色变化来指示设备状态。灭菌操作的选择和容易观察的实时状态显示。图形显示对灭菌过程的选择,有五种常用的操作模式供选择,并可通过召回方式设定。同时操作面板上的LCD闪烁显示整个灭菌过程的进行状态,图形和温度及时间显示,在灭菌操作完成后排气阀自动打开,速度可设置在6个级别内设定(对液体灭菌设为速度可变)
顶盖锁定功能,在灭菌操作过程中顶盖配备高水平的锁定装置,以避免可能事故发生。可变的温度设定,使设置100℃如同设置121℃一样容易,设置温度范围从45℃到135℃,分辨为1℃(加热模式可达104℃)。水位高度传感器安全装置的作用有效地防止了干加热的发生。灭菌过程中在温度和压力平衡时,排气的自动微调功能使腔内的条件达到最佳。
8、【仪器维护及保养知识】:无特殊。
9、【参考价格】:选填项。
10【使用后的评价】:容易操作,空间利用效率高。自动化程度高,安全高效。
1921 在瑞士Heerbrugg创立Wild公司
1970 在新加坡成立第一家国际性工厂
1986 与德国Leitz合并,成为Wild Leitz集团
1988 Wild Leitz收购瑞士Kern公司
1990 与英国Cambridge仪器公司合组Leica集团
1994 收购美国Magnavox公司GPS部
1997 徕卡集团分为相机、显微镜系统和测量系统三个独立公司
与美国Helava合组LH系统公司
与ESRI战略联盟
2000 徕卡测量系统在瑞士上市
购买美国Cyra公司少量股份
增购加拿大NovaLIS股份达到(31%)
2001 收购美国Laser Alignment公司
收购美国Cyra公司
购买德国AED公司部分股份(25%)
收购LH系统公司
美国ERDAS公司并入Leica
徕卡业务系统划分为六大业务部门:
工程测量系统、地学空间影像测量系统、大众测量系统、
工业测量系统、HDS高清晰测量系统和特种仪器系统
2003 收购澳洲Tritronics公司
2004 成立徕卡测量系统(上海)有限公司
成立徕卡测量系统(武汉)有限公司 徕卡测量系统在测量解决方案的创新设计方面拥有近200年的历史,其
产品和服务深受全球专业人士信赖,能够帮助用户采集、分析和显示空
间信息。徕卡测量系统以广泛的产品系列而享有盛誉,这些产品能准确地采集信息、快速建模、轻松进行分析,还能通过3D方式显示空间信息。每天使用徕卡产品的用户都充分信赖产品的独立性,以及它们提供的高价值和出色的客户支持。徕卡测量系统是一家全球性公司,总部位于瑞士Heerbrugg。徕卡测量系统在全球28个国家拥有3,500多名员工,在全球120多个国家拥有数百家合作伙伴,并通过他们为全部数万名用户提供支持。徕卡测量系统在瑞士证券交易市场挂牌上市。 徕卡显微系统(Leica Microsystems)是具有160余年悠久历史的德国著名的光学制造企业,也是目前同行业中唯一能够同时提供显微镜、图像采集产品、图像分析软件的厂商。徕卡显微系统是全球创新显微镜学,显微摄像,及软件解决方案的领导者,提供宏观,微观及纳米结构的影像及分析服务。
徕卡显微系统包括: 徕卡病理系统 (LeicaBiosystems)是徕卡显微系统中的,解剖病理学解决方案和自动化领域的全球领导者,努力推动癌症诊断以改善患者的生活。徕卡病理系统(LeicaBiosystems)为病理学家、组织学家以及研究人员提供一套完整的产品,能够满足他们在病例流程中每一步的需求。从试片制作和染色到成像和报告,帮助提高工作流程的效率,让患者更快地收到结果。即便载片再多,Leica易于使用并且始终可靠的产品能够始终提供诊断清晰度,从而为患者提供值得信赖的结果。
产品分类:
消耗品:确保实验室操作安全高效地进行,包括包埋盒,染色等
组织处理:内置的安全性能以及试剂质量控制功能,能够更好的保护样品,确保准确的脱水结果。
包埋:出色的切片源自谨慎地包埋。正确的组织定位、避免出现热损坏并创造出理想的组织块形状。
切片:准确的诊断有赖于精确的切片。精确的切片依靠正确类型的切片机。主要包括转轮式切片机、平推式切片机、振动式切片机、冰冻式切片机。
常规染色盖片机:清晰的染色、强大的试剂、精密的染色机和良好的操作。
1二甲苯中脱蜡5-10分钟。
2换用新鲜的二甲苯,再脱蜡5-10分钟。
3无水乙醇5分钟。
490%乙醇2分钟。
570%乙醇2分钟
6蒸馏水2分钟。
从烤箱出来需要冷却吗?
纺织品的组成和组织结构也日新月异,特别是多种纤维的混纺、交织和复合纺织品愈来愈多。在这方面,目前我国和世界先进水平还存在较大差距,例如从最近统计的国内出口面料平均纤维组分仅为1.3种,而同时进口的国外面料平均纤维组分则为5.6种,个别面料多达7~8种纤维。
正在开发的新纤维还有许多,包括各种转基因纤维。
纤维和纺织品的“新”和“多”对纺织品染色提出了新的要求,要求有新的染色技术相适应[3]。它们染色特点之一是为适应“新”特性,需要选用新的染料和采用新的工艺,例如涤纶超细纤维染色的分散染料,要求显色性、匀染性和色牢度特别好,配套的助剂和升温工艺也与常规纤维不同,其它新纤维染色适用的染料也都有新的要求,为此近年来国内外染料生产公司通过筛选和研发,有各种系列专用染料供应。特点之二是为了适应“多”组成,使多种组分都能染上颜色,而且不同组分间的同色性要好。因此,近年来开发了多种染料分浴或同浴染色的染料和工艺,例如分散/活性染料染色、分散/酸性染料染色、活性/酸性染料染色,以及分散/阳离子染料染色等,以适用于涤纶与纤维素纤维、锦纶和腈纶;纤维素纤维与锦纶、羊毛和蚕丝,以及它们与氨纶的多组分纤维纺织品染色,染色工艺有两浴法、一浴两步法和一浴法等。
为了简化工艺节水节能,各大公司和一些研究单位还在研究用单种染料染多种组分的染料和染色工艺,这包括用单种分散染料染涤纶和羊毛,锦纶及蚕丝;用单种活性染料染纤维素纤维和羊毛、蚕丝和锦纶,也包括含多种组分的蚕蛹蛋白纤维、大豆白纤维等。近年来还在开发分散-活性、分散-阳离子-活性染料,以便适用于染多种组分。我们研究证明,在专用助剂存在时,分散染料可以充分上染羊毛、蚕丝、锦纶和氨纶[4,5],因而可以一浴染多种纤维的纺织品。
无论是用两种染料同浴染色,或是一种染料染多种组分,为了使染料对多种组分均衡上染,提高同色性和包牢度,需要制定新的染色工艺,特别是控制升温程序和调节染浴中的PH值,目前已有许多控制PH值的助剂供应,大多数是利用升温过程使PH值从碱性滑向中性和酸性,也有反向滑动的,这对PH值敏感的纤维和染料染色非常有效,不仅减少纤维和染料的损伤,还可以提高上染率、同色性、匀染性和色牢度。我们利用此原理,使活性染料与酸性染料可以同浴染棉/锦织物,并利用其水解染料具有酸性染料的性能,在酸性介质可上染锦纶,充分利用染料,并减少了污水中的水解染料〔6〕。
1.2新染料、助剂和设备
为了适应染色需要,近年来新染料和助剂不断涌现[7],新染料和助剂的开发主要为了适应以下一些要求:
(1)替代禁用染料和助剂,开发环境友好的染料和助剂;
(2)适应新纤维和多组分纺织品染色的需要;
(3)适应新工艺、新设备加工的需要;
(4)适应高效、节水、节能加工的需要。
虽然各类染料和助剂都有了明显的发展,但发展最快和最重要的仍是活性和分散染料及相关助剂[7-8]。
活性染料的开发包括新的发色体、活性基及其在分子中的组合、连接基和不同染料的拼混,此外,商品染料的后加工也有了很大提高,新的活性染料性能主要表现在:
(1)高发色强度、高直接性和固色性;
(2)高牢度,包括耐晒、摩擦、汗光、耐氯和皂洗牢度等;
(3)低盐、低碱或中性染色和固色;
(4)环境友好,不含有害的芳胺,重金属和甲醛等物质;
(5)匀染性、重现性和配伍性好。
除此之外,为了适应染色或印花新工艺的推广,还开发了许多专用活性染料,例如喷墨印花,小浴比,一浴法染色用的活性染料。
必须强调的是,在这些改进中,开发多活性基,包括相同和相异的多活性基染料最为突出,不仅已有一大批双活性基染料问世,还开发了三或四活性基染料,这样可以大大提高活性染料的固色率和湿牢度。通常活性染料的母体结构是酸性染料,直接性不高,为了提高直接性,使活性染料分子线形结构特牲增强,少数芳环共平面性也很强,这些染料有较高的直接性。
除了纤维素纤维用活性染料外,还开发了不少毛用活性染料。
前面已经指出,一些新纤维和多组分纤维,例如蚕蛹蛋白纤维和竹纤维非常适合用活性染料染色,我国技术人员对此作了筛选,使活性染料对这些纤维有很好的效果。
分散染料也是近年来发展的重点之一,也出现了不少新品种,它们有的具有新的特别是一些新杂环结构发色体,有的在剂型上有了改进,使分散染料具有高上染率,深染性或提升性和高牢度,包括水洗、摩擦、耐热迁移和沾色牢度。
同理,新开发的分散染料是环保型的,不含有害芳胺、重金属等物质。为了适应碱性染色或与活性染料一浴染色,开发了一批耐碱性强的分散染料。
为了适应超细涤伦、PLA、PTT和PDT新纤维染色开发了一系列新的分散染料。适合超细涤纶染色的分散染料显色性和提升性要好,匀染性、色牢度和重现性也好,各公司都有系列染料供应,适合PLA纤维染色的分散染料应具有染色温度低、上染率和提升性好,此外,还特别要求耐光和湿牢度好。适合PTT和PDT纤维染色的染料。为了适应超临界CO2流体染色,含氨纶纺织品染色和喷墨印花,也开发了或正在开发专用分散染料。
除了开发新的活性和分散染料外,为适应多组分纤维纺织品或新工艺染色,正在开发可染多种纤维的复合性染料,例如,分散-活性染料,分散-阳离子-活性染料等,不过它们目前还未能大量工业化生产和应用。
新的染色设备主要表现在缩短染色时间,减小浴比,例如降到3:1,甚至更低,降低化学品、水、能量消耗,提高自动化程度以求减少劳动力,甚至达到全自动控制,应用最多的喷射染色机采用气流喷射后,不仅减少了水耗,还可以大大提高能量转换、降低织物在湍流液体中的摩擦力,新设备还可在加料、升温、控时和在线监测等方面高度自动控制,使从小样到大样生产的误并得到控制,做到“一次正确”染色和“受控”染色[9]。向左转|向右转
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