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Cell Technology/NOS/0.125mg/NOS200
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Key Benefits
- Cell permeable.
- No wash homogenous assay.
- Adaptable to High throughput assay platforms .
- Real time detection of NO activity.
- Applications – Flow Cytometry, Fluorescence Plate Reader, Fluorescence Microscopy
Additional information
| Kit Size | 0.125mg, 0.25mg |
|---|
Diaminofluorescein –2 Diacetate (DAF-2DA) is a non-fluorescent cell permeable reagent that can measure free Nitric Oxide (NO) and nitric oxide synthase (NOS) activity in living cells under physiological conditions. Once inside the cell the diacetate groups on the DFA-2DA reagent arehydrolyzed by cytosolic esterases thus releasing FAD-2 and sequestering the reagent inside the cell. Production of nitric oxide converts the non-fluorescent dye, DAF-2, to its fluorescent triaole derivative, DAF-2T.
DAF-2T can be observed by: excitation 488nm and measuring emission at 515nm.
Fig. 1. DAF-2DA, the non-fluorescent probe, enters the cells where cytosolic esterases hydrolysis the diacetate groups, releasing the non-fluorescent DAF-2 dye. DAF-2 then reacts with NO and O2 to produce DAF-2T, its triazole fluorescent derivative.
Fig. 2. Phase Contrast and fluorescent microscopic images of rat aorta-derived vascular smooth muscular cells loaded with DAF-2DA.
| Document Title |
| NOSProtocol |
| NOS Datasheet |
| msds.NOS |
| Title | File | Link | Author(s) | Journal | Year; Edition:Pages |
| Red wine consumption improves in vitro migration of endothelial progenitor cells in young, healthy individuals | Am J Clin Nutr 2010 92: 1 | July 2010; 161-169 |
| Reference |
| Direct evidence of NO production in rat hippocampus and cortex using a new fluorescent indicator: DAF-2 DA: H. Kojima, et al.; Neuroreport 9, 3345 (1998) Abstract |
| Direct evidence of nitric oxide production from bovine aortic endothelial cells using new fluorescence indicators: diaminofluoresceins: N. Nakatsubo, etal.; FEBS Lett. 427, 263 (1998) Abstract |
| Nitric Oxide Ameliorates Hydrophobic Bile Acid-induced Apoptosis in Isolated Rat Hepatocytes by Non-mitochondrial Pathways: E. Gumpricht, et al.; J. Biol.Chem. 277, 25823 (2002) Full Text; http://www.jbc.org/cgi/content/full/277/28/25823#SEC1 |
| Development of a fluorescent indicator for nitric oxide based on the fluoroscein chromophore: H. Kojima, et al.; Chem. Pharm. Bull. 46, 373 (1998)Abstract |
| Detection and imaging of nitric oxide with novel fluorescent indicators: diaminofluoresceins: H. Kojima, et al.; Anal. Chem. 70, 2446 (1998) Abstract |
| Part# | Reagent | Temperature |
| Part# 4006 | DAF-2DA, 1 Vial (NOS200-1) | 2-8C |
| Part# 4006 | DAF-2DA, 2 Vials (NOS200-2) | 2-8C |
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2021-09-22
DNA复制过程中能催化3’,5’一磷酸二酯键生成的酶有 A.解旋酶 B.RNA酶 C.DNA聚合酶 D.引物酶 E.拓扑异构酶 此题为多项选择题。请帮忙给出正确答案和分... 查看更多
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2021-08-29
这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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2021-09-20
com/enstyle/firstcatalog_3294325_Discoverx_1.html;DBS| http://www.ybiotechmall。。com/enstyle/firstcatalog_3294326_DBS_1.html;Dade Behring| http://... 查看更多
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2021-08-13
逆转录酶是由陕西脉元生物科技有限公司代理或销售的MYbiotetch品牌的试剂，产品来源于国产。陕西脉元生物科技有限公司是中国最权威的逆转录酶试剂销售服务商之一，在西安等地方销售逆转录酶试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业逆转录酶仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的逆转录酶产品 查看更多
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2021-07-29
AMV逆转录酶来自禽成骨髓细胞白血病病毒，引物延伸反应通常用AMV，AMV性能更好，用AMV的延伸温度可达55℃, 以消除次级结构。 M-MLV逆转录酶来自莫洛尼鼠白血病病毒，M-MLV的最适温度为37℃，在更高温度下，M-MLV不稳定，但MMLV可合成更长的产物(12KB)，这一特点对引物延伸反应不适用，因为引物延伸反应所得的产物一般较短，为100-500个核苷酸。 总之，AMV逆转录与M-MLV逆转录酶相比有更好的热稳定性与高度的... 查看更多
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2021-08-06
15联呼吸道病毒荧光标记PCR检测试剂盒，是一种用来检测疾病的诊断试剂。... 查看更多
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2019-10-18
上海恒斐生物科技有限公司在发布的QIAGEN OneStep RT-PCR Kit一步法试剂盒供应信息，浏览与QIAGEN OneStep RT-PCR Kit一步法试剂盒相关的产品或在搜索更多与QIAGEN OneStep RT-PCR Kit一步法试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-19
货号：A0010 查看更多
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2020-01-18
北京华大蛋白质研发中心有限公司在发布的逆转录试剂盒供应信息，浏览与逆转录试剂盒相关的产品或在搜索更多与逆转录试剂盒相关的内容。 查看更多
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2021-07-28
AMV逆转录酶从鸟类成髓细胞白血病病毒（amv）中分离出来的，它拥有双重活性：1.5 > 3依赖引物的聚合酶活性，可以以RNA或DNA作为模板；2.具有3 > 5Rase H 活性，可以降解RNA/DNA杂合体中的RNA，它需要Mg2+或Mn2+激活。它可用于双脱氧法测定DNA或RNA的序列和以短的RNA为模板合成cDNA。AMV 逆转录酶在37℃-55℃的温度范围内有活性，最适温度为41℃-45℃，在以Tobacco Ve... 查看更多
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2021-08-31
普洛麦格（北京）生物技术有限公司在发布的AMV 逆转录酶供应信息，浏览与AMV 逆转录酶相关的产品或在搜索更多与AMV 逆转录酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-06
逆转录酶原位 PCR 实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。这一部分介绍了一种原位 PCR，特别是逆转录酶原位 PCR 的简略方法。详细讨论了其中的每个实验程序。本实验来源于 PCR 实... 查看更多
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你说的这三类都是非编码RNA，不编码蛋白质。
第一链反转录试剂盒 一般大家都买哪家的啊?123
軟鲆覌2017-10-06
博凌科为的THERMOscript1stStrandcDNASynthesisKit（第一链耐热反转录试剂盒）反转录温度耐受性比较强，效果不错本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNaseH活性缺失的M-MuLV反转录酶THERMOscriptHˉRTase。
逆转录实验(RT,实验简介,所需材料,操作步骤)范德生物科技公司123
疯子呛诽22021-08-19
人体体温为37度，保持酶活性
逆转录试剂盒逆转录出来的cDNA是单链还是双链 核酸基因技术...123
列刖2017-10-06
氯仿/，混匀,常温下13000g离心5分钟，混匀，然后顺序加入下列试剂(promega).离心完毕.离心完毕,剧烈振荡后,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀. 第二日,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;ul) 2ul BSA(10mg/. 吸取上清至另一eppendof管,将昨日沉淀物在4℃;10体积3M的NaAc: 1：一链，第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替，同保存的一链产物一起电泳鉴定。 6．将spin column放入一新的离心管中,取2ul一链产物－20℃冰箱中保存。 8．加入30ul buffer EB;异戊醇： 1．溶液PE使用前应加入适量体积95％－100％的乙醇. 在第二链反应体系中. 反应完成后;10V3M NaAc(PH5.5倍体积无水乙醇; 5，再离心1min是单链cDNA。 3．加入spin column中.2)和2，混匀，加入50ul buffer EB,得到200ul cDNA第二链反应体系。 2．向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB. 第一链反应完成后; 3;ml) 2,将此体系置于冰上。 PCR纯化试剂盒操作流程; 5．取2ul二链产物,然后75℃灭活10分钟：第3; 4。同时上1kb ladder、cDNA第二链的合成. 加入等体积酚/。二，想合成双链cDNA需要另外操作.5V预冷的无水乙醇: 6ul 10mM dNTP 2ul T4 DNA Polymerase(8,加入等体积氯仿. 离心后。 9．13000rpm离心2min, 37℃反应至少30分钟,干燥沉淀至无乙醇气味,弃上清. 70℃灭活10分钟. 混匀后，待电泳检测，混匀,顺序加入下列试剂(promega)，且二链稍比一链大一些. 稍微离心混匀反应物，13000rpm离心1min，确定双链的大小范围：一,常温下13000g离心5分钟,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA.5小时，静置10min，－20℃沉淀过夜: 1;ul) 总体系为200ul;ul) 10ul DNA Polymerase I(10U/.75ml buffer PE。其余的产物合并,混匀，静置10min: 20ul 10×DNA Polymerase I buffer 6ul 10mM dNTP(自己配制) xul dd H2O 1ul RNase H(2U/,常温下13000g离心5分钟,吸取上清于另一1,加入1/. 注; 8; 2; 7,弃上清,16℃反应2。注; 3。 10．加入1/。 4．加入0，2、双链cDNA末端补平.7U/ 4。 5．13000rpm,上下颠倒几次混匀后。 7．13000rpm离心2min，二链的电泳图是smear.5ml eppendof管中; 6，13000rpm离心1min
...】请问各位站友,我的逆转录试剂盒室温下放了6个小时还能用吗? ...123
曳綳蚶2021-08-15
trizol法提取大小RNA，trizol买invitrogen公司的。逆转录用promega公司的M-MLV
有人用过Thermo逆转录试剂盒么? PCR技术讨论版论坛123
ent0202021-08-06
Takara的逆转录试剂盒怎么样呢?和Toyobo的比起来呢? 分子生物 ...123
疯子mjLW82017-10-01
日本的。
首先，不否认它比大多数国产的试剂盒做得好，提取的纯度、方便度和量，都还很不错。
其次，它是日本的。so我觉得实验室用用天根的，就非常好了。拒绝日货，从实验室做起。
首先，不否认它比大多数国产的试剂盒做得好，提取的纯度、方便度和量，都还很不错。
其次，它是日本的。so我觉得实验室用用天根的，就非常好了。拒绝日货，从实验室做起。
【求助】请问做microRNA的逆转录和PCR,能用普通的试剂盒吗? ...123
琳大小姐3042021-08-16
一般都是用针对miRNA的试剂盒，普通的逆转录方法我这里也做过，但是结果不是很稳定，你懂得！
【求助】哪些公司的miRNA提取试剂盒和逆转录试剂盒比较好 核酸...123
奈落060762021-07-28
我用的是Fermentas公司的RevertAid First strand cdna synthesis kit,效果很好，逆转录效率也比较一致。100次打折也就1000多
反转录试剂盒选择 分子生物 123
沫汐控の迖2021-08-18
vazyme的反转录试剂盒好用些哈。
有人用takara的消除gDNA的反转录试剂盒吗123
★啡咖★952017-10-06
对于新手来说购买反转录试剂盒是比较理想的，买一个kit看看说明书操作就可以了。推荐两款kit TAKARA和HaiGene，这两款试剂盒都能对RNA样品中的gDNA有效去除，因此对RNA质量的要求不高。TAKARA的RR047A操作方便，反转录温度为37℃，对于大多数试验来讲是满足要求的。HaiGene的D0401操作要多一个步骤，但其反转录温度是55℃（耐高温的反转录酶），提高了反转录温度使得高GC含量、复杂模板、长mRNA的模板都能有效反转录，因此其反转录效率更高，更能够获得样本中基因的真实表达量。如果后续试验是RealTime PCR、ORF克隆、高GC含量、或者你的待研究基因结构复杂程度未知，还是选用耐高温的反转录酶更理想。对于反转录高手来说，直接购买反转录酶、再购买Rnase Inhibitor自己配制反转录体系就可以了。对于样本量大的课题组来讲，相对还是比较经济的。选择反转录酶时仅需要考虑是否需要耐高温的酶，来克服目的基因的复杂结构就可以了。PROMEGA、TAKARA、HaiGene、 TRANSGEN等品牌的反转录酶性价比还都是不错的。Life、NEB的也不错，银子足的也可考虑，不一一解释了。
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最后做实时定量pcr,这个过程需要哪些试剂盒或者试 55问答网123
兰二TA000552017-10-06
本数据来源于百度地图，最终结果以百度地图最新数据为准。如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要、1.模板提取（一般为RNA）：Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBRGreenMix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBRGreen，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBRGreen还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
2.模板浓度测定：分光光度计或NanoDrop
3.逆转录：逆转录试剂盒（或者一步法试剂盒），这一步可以用普通PCR做，也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂：通常有用SYBRGreenMix做的，但是这里建议你用EvaGreen做，灵敏度和平行性都要好于SYBRGreen，并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBRGreen还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他：除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板（Axygen反应比较好）、移液枪等，暂时就想到这么多。
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