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NEB/Bst 3.0 DNA Polymerase/M0374S/8,000 units
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Description:
Bst3.0DNAPolymeraseisaninsilicodesignedhomologueofBacillusstearoThermophilusDNAPolymeraseI,LargeFragmentengineeredforimprovedisothermalamplificationperformanceandincreasedreversetranscriptionactivity.Bst3.0DNAPolymerasecontains5´→3´DNApolymeraseactivitywitheitherDNAorRNAtemplatesandstrongstranddisplacementactivity,butlacks5´→3´and3´→5´exonucleaseactivity.Bst3.0DNAPolymerasedemonstratesrobustperformanceeveninhighconcentrationsofamplificationinhibitorsandfeaturessignificantlyincreasedreversetranscriptaseactivitycomparedtoBstDNAPolymerase.
RT-LAMPwasperformedusingindicatedDNApolymeraseandJurkattotalRNAandprimersfortwogenes(ACTB,left;HMBS2,right).Fastestresultswereobservedwitha2-enzymesystem,Bst2.0andWarmStartRTx,butrobustamplificationwasalsoobservedusingBst3.0withoutadditionalRT.BstLF,Bst2.0andcompetitorenzymesshowedhighlyvariableperformance,withslowthresholdtimesorreactionfailureononeofthetwotargets.
ProductSource
AnE.colistrainthatcarriestheengineeredBst3.0gene.ReagentsSupplied
Thefollowingreagentsaresuppliedwiththisproduct:
| Storeat(°C) | Concentration | |
| MagnesiumSulfate(MgSO4)Solution | -20 | 100mM |
| IsothermalAmplificationBufferIIPack | -20 | 10X |
Notes:
Bst3.0DNAPolymerasedoesnotexhibit3´→5´exonucleaseactivity.Reactiontemperaturesabove72°Carenotrecommended.Bst3.0DNAPolymerasecannotbeusedforPCRorreactionsrequiringthermaldenaturation.蚂蚁淘电商平台
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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正品保证： 全球直采 在线追溯
蚂蚁淘所有产品都是自运营的，我们已经跟国外多家厂方建立品牌推广合作关系, 获得对方的支持和授权； 同时客户可以通过订单详情查看到货物从厂方至客户的所有流程， 确保货物的来源； 正规报关，提供13%增值税发票。
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售后申请： 耐心讲解 优质服务
蚂蚁淘提供的产品在使用过程中如因产品质量问题有售后需求时， 您可通过我的订单提交您的“申请售后”， 蚂蚁淘产品顾问会第一时间为您处理， 在售后服务过程中如遇到问题也可致电蚂蚁淘客服热线：4000-520-616。
2018-12-26
The binding of ?-arrestins to agonist-occupied GPCRs triggers the assembly of a MAP kinase activation complex using ?-arrestin as a scaffold, with subsequent a 查看更多
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2021-09-01
Applied Biosystems ProFlex™ PCR仪 流式细胞仪Attune® Acoustic Focusing Cytometer 便携式分析仪 MagMAX™ Express 磁珠处理仪-Life Tech(Invitrogen) ... 查看更多
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2017-12-05
品牌:TwistDx | 技术资料:1 篇 TwistDX T16 便携式常温等温扩增荧光检测仪 应用领域:广泛应用于医疗诊断、食品检测、动物健康、农业、环境测试、生物防御、科学研... 查看更多
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2021-07-25
2018-06-03
北京惠博远致科技有限公司在发布的cDNA末端的快速扩增 (RACE)供应信息，浏览与cDNA末端的快速扩增 (RACE)相关的产品或在搜索更多与cDNA末端的快速扩增 (RACE)相关的内容。 查看更多
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2021-07-16
医流商城提供ABI 2720基因扩增仪 参数、价格、图片、功能特色、咨询等有效信息，全网价最低，100%正品保证，是您网上购买ABI 2720基因扩增仪 的首选平台。 查看更多
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默瑞生物创立以来,已经陆续导入TwistDx,enzymatics,KAPA BIOSYSTEMS,BioDynami,Jackson,Echelon,ChromoTek,Nanocs,Biotechrabbit,Lee Biosolutions, magtivio等优质国际品... 查看更多
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2021-07-22
KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T是由北京索莱宝科技有限公司代理或销售的天根品牌的试剂，产品来源于china。北京索莱宝科技有限公司是中国最权威的KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T试剂销售服务商之一，在北京等地方销售KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的KG201 快速DNA提取扩增试剂盒200T产品 查看更多
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2021-07-15
医流商城提供ABI 9700基因扩增仪 报价、参数、图片、特点、咨询等有效信息,100%正品保证,是您网上购买ABI 9700基因扩增仪 的放心平台 查看更多
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2021-08-20
PCR仪的分类： PCR仪的种类总体来说可以分为两大类：PCR扩增仪和实时荧光定量PCR仪。 PCR仪的用途： PCR仪是医学，农业，食品，医药，检验检疫等领域的实验室常规仪器设备。 PCR仪原理 查看更多
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2021-08-03
Paragon Genomics是一家位于美国硅谷的生命科技初创公司。我们致力于开发具有突破性且易于使用的超高多重PCR技术, 用于基因组分析和临床诊断市场。我们的核心技术将首先应用于下一代基因测序文库制备市场，从而实现更准确, 更快, 并且更便宜的DNA测序样品制备和个体化医疗。基因检测是整个精准医学的基础，来自美国硅谷的Paragon Genomics正是一家致力于突破目前基因检测领 查看更多
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2021-07-26
医疗器械市场需求扩增：或迎来黄金时代 查看更多
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常见问题
蚂蚁淘所售产品均为正品吗？
蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生，具有十年的从业经验，在业界享有良好的口碑；
Ebiomall是跨境直采平台，我们直接从厂家采购，自己的团队负责国际物流和清关，中间没有第三方，蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品，假一罚十。
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分子生物学实验报告123
louise36532021-07-23
病毒基因组DNA/RNA快速提取试剂盒(离心柱型 )_上海超研生物科技...123
2018-01-24
恒温PCR一种新式恒温核酸扩增方法，其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶，反应全过程恒定63℃，不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增，其扩增效率可达到109个～ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构，保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒温荧光检测设备可实时监测扩增情况。该扩增法具有简单、快速、准确、易检测、适用面广等优点。迪澳转基因快速检测箱，配置了高通量恒温荧光检测仪DEAOU-308C、转基因快速检测试剂、植物基因组核酸提取试剂及必备的实验耗材。为客户提供了精确高效、功能全面、经济实用的转基因检测手段。
环介导等温扩增_LAMP_技术的应用研究123
serain332021-07-27
大家好，现在做LAMP结果颠倒了，阴性对照会出现LAMPladder条带，而加了基因组DNA的反而扩增不出来，有没有人遇见这种情况？最后如何解决了呢？
交叉引物恒温扩增技术（CPA）研究进展_爱学术123
qiqishichaoren2021-07-25
【求助】关于最近滚环扩增遇到的障碍 PCR技术讨论版论坛123
sd200502922021-07-29
各位大侠好！我最近在做滚环扩增的时候遇到问题了，来和大家讨论一下，希望各路高手不吝赐教！
我做的是用锁式探针来检测dna模板的ram，探针80base，其中杂交区40base，引物分别为16、18base，连接酶选取的T4 ligase和Taq DNA ligase两种，分别对应恒温和变温情况下的扩增。水解体系为EXO I和Exo Ⅲ的混合体系，参考的外文文献，应该没什么问题。聚合酶用的是Bst DNA大片段聚合酶。
一开始选择的探针浓度为200pmol/L，扩增效果挺好，当时用的DNA模板是质粒阳性标准品，但是后来在做敏感性的时候发现条带梯度差异几乎没有，而且阴性也出带，后来就没法做敏感性和特异性验证了，实验停滞了2个月一直也没进展。
按理说RAM借助锁式探针扩增的独特方式以及水解体系的存在可以有效防止污染才对，希望大家给点建议该如何解决。
万分感谢！！！！！！！！！！
附一张以前做敏感性的图（marker为2000的DNA ladder）以做参考
我做的是用锁式探针来检测dna模板的ram，探针80base，其中杂交区40base，引物分别为16、18base，连接酶选取的T4 ligase和Taq DNA ligase两种，分别对应恒温和变温情况下的扩增。水解体系为EXO I和Exo Ⅲ的混合体系，参考的外文文献，应该没什么问题。聚合酶用的是Bst DNA大片段聚合酶。
一开始选择的探针浓度为200pmol/L，扩增效果挺好，当时用的DNA模板是质粒阳性标准品，但是后来在做敏感性的时候发现条带梯度差异几乎没有，而且阴性也出带，后来就没法做敏感性和特异性验证了，实验停滞了2个月一直也没进展。
按理说RAM借助锁式探针扩增的独特方式以及水解体系的存在可以有效防止污染才对，希望大家给点建议该如何解决。
万分感谢！！！！！！！！！！
附一张以前做敏感性的图（marker为2000的DNA ladder）以做参考
实验三PCR扩增制备目的基因123
南昌中洪博元小梅2016-05-09
1．目的
学会PCR操作的基本技术。
2．原理
是将待扩增的DNA模板加热变性，与其两侧互补的寡聚核苷酸引物复性，然后经过耐热的DNA聚合酶延伸。再进入下一轮变性—复性—延伸的循环，n次循环后DNA可被扩增（1+X）n倍。其中<25nt的引物退火温度Tm=2（A+T）+4（G+C）。
3．器材
旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，0.2mlPCR微量管，双面微量离心管架，PCR仪，台式离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，水漂，恒温水浴。
4．试剂
5U/μlTaqDNA聚合酶，PCR缓冲液（10×，MgCl2free），25mMMgCl2，dNTP，引物，模板质粒pBS-CHI，无菌ddH2O。
5．实验准备
dNTP混合液（每种25mM），TAE电泳缓冲液，荧光染料，10´加样缓冲液，1.5ml离心管装入铝制饭盒（灭菌）、移液器吸头装入相应的吸头盒（灭菌）。合成的引物：Senseprimer5＇-GGATCCACAATGATGAGAGCC-３＇
Antisenseprimer５＇-GATATCATGGTGAGGTAGCTAGCTT-３＇
目的基因模板质粒：已经克隆在pBS载体上的1128bp几丁质酶（chitinase，CHI）基因。
待扩增的CHI片段长度：996bp。
6．操作步骤
（1）在0.2mlPCR微量离心管中配制50μl反应体系。（以下加样量供参考，括号内是最终需要量，实验时需参照Taq酶说明书计算）
ddH2O32μl
10×PCRbuffer（不含MgCl2）5μl
25mMMgCl23μl
2.5mmol/LdNTP4μl（每种dNTP终浓度0.2mM）
10μmol/LPrimer12μl（12.5~25pmoles）
10μmol/Lprimer22μl（12.5~25pmoles）
模板质粒1μl（1×10-3pmoles）
5U/μlTaq酶1μl（5U）
总体积50μl
（2）根据厂商的操作手册设置PCR仪的循环程序：
①94℃5min
②94℃1min
③54℃1min
④72℃1min50s
⑤goto②29times
⑥72℃10min
（3）PCR结束后，取10μl产物进行琼脂糖凝胶电泳。观察胶上是否有预计的主要产物带。
（4）清理桌面，撰写实验报告。
（5）PCR产物可以直接与T载体连接（见实验五），然后转化感受态细胞（见实验八）。
7．思考
（1）复性温度如何确定？
（2）为什么要在最后延伸10min？
（3）是否有非特异性扩增产物（或引物二聚体），如何才能消除？
更多资讯请关注于http://www.chinazglab.com/
LAMP(环介导等温扩增)技术 实验方法 123
cxbyunong2021-07-24
欢迎讨论环介导的恒温扩增法（LAMP）
恒温扩增RPA实验中如何避免污染123
xiaohe199004252018-01-24
(1)严格分区操作，样品提取区、配液区、扩增区、检测区应相互独立，各区耗材及移液器应专用，实验前先用紫外线消毒以破坏残留的核酸。
(2)操作多份样品时，应先配制反应混合液并分装，减少操作，避免污染，同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染，移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的，吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染，使用一次性手套，EP管与吸头应一次性使用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心，吸样要缓慢，防止样品进入移液器内；吸样时尽量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻，以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存，防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验，既可验证LAMP反应的准确性，又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理，尽量避免开盖检测，开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测，有效防止污染发生。展开
(2)操作多份样品时，应先配制反应混合液并分装，减少操作，避免污染，同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染，移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的，吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染，使用一次性手套，EP管与吸头应一次性使用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心，吸样要缓慢，防止样品进入移液器内；吸样时尽量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻，以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存，防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验，既可验证LAMP反应的准确性，又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理，尽量避免开盖检测，开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测，有效防止污染发生。展开
实时荧光核酸恒温扩增检测技术在肺结核临床诊断中价值研究123
脆乳2018-01-24
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析
恒温荧光PCR是什么技术 食品微生物检测 食品论坛123
神马3lI2018-01-24
基因扩增技术（PCR）聚合酶链反应（polymerase chain reaction简称PCR）又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，
【分享】欢迎加入环介导的恒温扩增法(LAMP)讨论群70918628 ...123
cxbyunong2021-07-22
欢迎加入环介导的恒温扩增法（LAMP）讨论群70918628
恒温扩增 LAMP的特异性问题 00问答网123
jinzxcvbn2018-01-24
话说LAMP特异性强，LAMP使用4对引物与靶序列上的6个特定区域结合，即使一个碱基的差异，LAMP也能够区分相应的靶序列进行扩增，因此，比普通PCR具有更好的特异性。
这里所说的一个碱基的差异该怎么检测？如何理解？
这里所说的一个碱基的差异该怎么检测？如何理解？
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