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TwistDx/TwistAmp® Liquid exo RT/TALQEXORT01/
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TwistDx/TwistAmp® Liquid exo RT/TALQEXORT01/
品牌 / 
TwistDx
货号 / 
TALQEXORT01
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Description:

Onestepreal-timefluorescentRNAamplificationinaflexIBLeliquidformat.RecommendedforuserswhowanttocombineTwistDx’sRPAtechnologytodetectRNAtargetswiththeuseofTwistDx"sproprietaryfluorescentTwistAmp®exoprobe.ItcontainsthereagentcomponentsofaTwistAmp®Liquidexokitaswellasacompatiblereversetranscriptase,whichconvertstheinitiallypresentRNAtemplateintoDNAandthusintoamplificationsubstrates.Theuserneedonlysupplyprimers,probe,dNTPs,templateandRNaseInhibitor.Seemanualformoreinformation.Clicktoorderoligonucleotides.

Perfectfor:Real-timefluorescentRNAdetection,facilitatinguseofdifferentRPAreactionvolumes,orvariationofcomponentratios.

Productcode: TALQEXORT01

Features

  • combinedreversetranscriptionandrapidCDNAamplificationinonestep
  • real-timeprobedetection
  • flexiblereactionvolumeuse
  • flexiblereagentcomponentratiouse
  • singlemoleculedetection
  • reagentsforatleast100reactions(dependentonvolumeused)
  • multiplexable
NB:Duetocurrentproductionmethods,RPAreactionsarenotsuitableforamplificationofstandardlaboratorystrainsof E.coli. Ifyouareinterestedinamplifying E.coli DNA,pleasecontact techsupport@twistdx.co.uk

英国TwistDx公司成立于1999年,是基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增专利技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。核心产品:产品名称货号描述检测方法TwistAmp®BasicTABAS03KIT用于DNA快速扩增终点凝胶电泳DNA检测,下游应用(如:亚克隆)TwistAmp®exoTAEXO02KIT实时荧光DNA扩增实时荧光DNA检测TwistAmp®LiquidBasicTALQBAS01液体形式DNA快速扩增终点凝胶电泳DNA检测,下游应用(如:亚克隆)TwistAmp®LiquidexoTALQEXO01液体形式实时荧光DNA扩增实时荧光DNA检测TwistAmp®nfoTANFO02KIT测流层析检测DNA扩增侧流层析试纸条检测应用:TwistDx公司开发的重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。以此为基础的TwistAmp 核酸扩增产品,能够在15分钟内进行常温下的单分子核酸检测。该技术对硬件设备的要求很低,特别适合用于体外诊断、兽医、工业应用,食品检测,农业,公共卫生,生物安全和环境感知等相关领域。RPA反应的最适温度在37℃~42℃之间,无需变性,常温下即可反应,大大加快了PCR的速度。并且由于不需要温控设备,RPA可以真正实现便携式的快速核酸检测。RPA检测的灵敏度很高,能够将痕量的核酸(尤其是DNA)模板扩增到可检出水平,从单个模板分子得到大约1012扩增产物。无需复杂样品处理,即可实地检测;既可扩增DNA也可扩增RNA,省去额外的CDNA合成步骤;检测方式多样:终点检测、对扩增过程进行实时监控或通过侧流层析试纸条(LFD)读取结果。


英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增专利技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。TwistDx以此技术为基础生产的核酸扩增类产品,能在恒定且较低的温度下,仅用10~20分钟,进行单分子核酸检测。这一技术对环境、硬件设施的要求很低,对于生物防护、水体检验、食品检验、医疗诊断、微流体、兽医等方面都有良好的应用。RPA扩增的各种体系试剂盒中,含有DNA、RNA扩增所需的所有试剂,研究者只要准备好引物和模板就行了。扩增结果可以分别通过凝胶电泳检测、荧光定量检测或试纸条检测,产物纯化后可用于下游研究。苏州蚂蚁淘生物科技有限公司是最早将英国TwistDx公司PRA技术和产品引入中国的经销商,与TwistDx公司建立了长期的战略合作关系,请将长期致力于PRA技术在中国的推广!接TwistDx厂家通知:工厂搬迁完成,自10月15日起可正常下单订货,感谢各位新老客户多多支持!最新产 品列表:TABAS03KIT-TwistAmp?BasicKitTAEXO02KIT-TwistAmp?exoKitTANFO02KIT-TwistAmp?nfoKitTALQBAS01-TwistAmp?LiquidBasicKitTALQEXO01-TwistAmp?LiquidexoKitUSTAR01-U-Starcassette(packof20)MILENIA01-MileniaHybritech1(packof100) 


 TwistDx全新的液态重组酶聚合酶扩增(RPA)试剂盒,这些试剂盒非常适合需要不使用热循环仪就能在15分钟内完成DNA/RNA扩增的实验室以及想要灵活构建试验体系的研究人员使用。TwistAmp® Liquid试剂盒提供经甘油稳定化处理的液态RPA试剂,该形态对于在实验室执行PCR和其他基于酶的反应的任何人来说都非常熟悉。这些试剂各自装于单独的试管中,用户可随意从中移取任何量的酶混合液来构建自己所选的RPA反应体积,配制用于多次反应的预混液,或者以各种RPA组分比例进行实验以优化试验。除了具有室温稳定性的冻干态TwistAmp®RPA试剂盒这一旗舰产品,本次新推出的 TwistAmp®Liquid试剂盒是现场或定点试验开发的理想之选。液体形态让实验室更容易地在日常工作中使用快速简单的RPA法(该方法有时甚至采用与PCR相同的引物)取代PCR法,以及更容易地开发出定制的试验。

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The binding of ?-arrestins to agonist-occupied GPCRs triggers the assembly of a MAP kinase activation complex using ?-arrestin as a scaffold, with subsequent a 查看更多>
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品牌:TwistDx | 技术资料:1 篇 TwistDX T16 便携式常温等温扩增荧光检测仪 应用领域:广泛应用于医疗诊断、食品检测、动物健康、农业、环境测试、生物防御、科学研... 查看更多>
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PCR仪的分类: PCR仪的种类总体来说可以分为两大类:PCR扩增仪和实时荧光定量PCR仪。 PCR仪的用途: PCR仪是医学,农业,食品,医药,检验检疫等领域的实验室常规仪器设备。 PCR仪原理 查看更多>
Paragon Genomics是一家位于美国硅谷的生命科技初创公司。我们致力于开发具有突破性且易于使用的超高多重PCR技术, 用于基因组分析和临床诊断市场。我们的核心技术将首先应用于下一代基因测序文库制备市场,从而实现更准确, 更快, 并且更便宜的DNA测序样品制备和个体化医疗。基因检测是整个精准医学的基础,来自美国硅谷的Paragon Genomics正是一家致力于突破目前基因检测领 查看更多>
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分子生物学实验报告123
louise36532021-07-23
前天我做pXJ41-p21质粒扩增,所用的新霉素终浓度是60μg/ml。但经过培养过夜后,昨天下午都未出现菌落,不知是不是新霉素浓度过高?还是感受态细菌的问题?刚开始摸索,未设空白对照。请教各位高手,是何原因?
以下是质粒质粒扩增步骤:
1.取400μlLB液先置于37℃水浴30分钟
2.100μlJM109(存于-80℃)于冰上解冻
3.解冻后加入50ngDNA质粒(对照只加感受态细胞)冰浴30分钟(计时)
4.42℃水浴90秒
5.冰浴2分钟
6.加入400μlLB液
7.37℃恒温摇床200rpm摇匀1小时
8.取200μl平均分布(旋转平皿)于培养基上,倒扣培养皿37℃过夜
恒温PCR一种新式恒温核酸扩增方法,其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,反应全过程恒定63℃,不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增,其扩增效率可达到109个~ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构,保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒温荧光检测设备可实时监测扩增情况。该扩增法具有简单、快速、准确、易检测、适用面广等优点。迪澳转基因快速检测箱,配置了高通量恒温荧光检测仪DEAOU-308C、转基因快速检测试剂、植物基因组核酸提取试剂及必备的实验耗材。为客户提供了精确高效、功能全面、经济实用的转基因检测手段。
大家好,现在做LAMP结果颠倒了,阴性对照会出现LAMPladder条带,而加了基因组DNA的反而扩增不出来,有没有人遇见这种情况?最后如何解决了呢?
有人知道交叉引物核酸恒温扩增(CPA)的扩增原理吗?希望高手不吝赐教,最好是图文并茂的那种,谢谢了先!
各位大侠好!我最近在做滚环扩增的时候遇到问题了,来和大家讨论一下,希望各路高手不吝赐教!
我做的是用锁式探针来检测dna模板的ram,探针80base,其中杂交区40base,引物分别为16、18base,连接酶选取的T4 ligase和Taq DNA ligase两种,分别对应恒温和变温情况下的扩增。水解体系为EXO I和Exo Ⅲ的混合体系,参考的外文文献,应该没什么问题。聚合酶用的是Bst DNA大片段聚合酶。
一开始选择的探针浓度为200pmol/L,扩增效果挺好,当时用的DNA模板是质粒阳性标准品,但是后来在做敏感性的时候发现条带梯度差异几乎没有,而且阴性也出带,后来就没法做敏感性和特异性验证了,实验停滞了2个月一直也没进展。
按理说RAM借助锁式探针扩增的独特方式以及水解体系的存在可以有效防止污染才对,希望大家给点建议该如何解决。
万分感谢!!!!!!!!!!
附一张以前做敏感性的图(marker为2000的DNA ladder)以做参考

实验三PCR扩增制备目的基因123
南昌中洪博元小梅2016-05-09

1.目的
学会PCR操作的基本技术。

2.原理
是将待扩增的DNA模板加热变性,与其两侧互补的寡聚核苷酸引物复性,然后经过耐热的DNA聚合酶延伸。再进入下一轮变性—复性—延伸的循环,n次循环后DNA可被扩增(1+X)n倍。其中<25nt的引物退火温度Tm=2(A+T)+4(G+C)。

3.器材
旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,0.2mlPCR微量管,双面微量离心管架,PCR仪,台式离心机琼脂糖凝胶电泳系统,水漂,恒温水浴。

4.试剂
5U/μlTaqDNA聚合酶,PCR缓冲液(10×,MgCl2free),25mMMgCl2,dNTP,引物,模板质粒pBS-CHI,无菌ddH2O。

5.实验准备
dNTP混合液(每种25mM),TAE电泳缓冲液荧光染料,10´加样缓冲液,1.5ml离心管装入铝制饭盒(灭菌)、移液器吸头装入相应的吸头盒(灭菌)。合成的引物:Senseprimer5'-GGATCCACAATGATGAGAGCC-3'
Antisenseprimer5'-GATATCATGGTGAGGTAGCTAGCTT-3'

目的基因模板质粒:已经克隆在pBS载体上的1128bp几丁质酶(chitinase,CHI)基因。
待扩增的CHI片段长度:996bp。

6.操作步骤
(1)在0.2mlPCR微量离心管中配制50μl反应体系。(以下加样量供参考,括号内是最终需要量,实验时需参照Taq酶说明书计算)
ddH2O32μl
10×PCRbuffer(不含MgCl2)5μl
25mMMgCl23μl
2.5mmol/LdNTP4μl(每种dNTP终浓度0.2mM)
10μmol/LPrimer12μl(12.5~25pmoles)
10μmol/Lprimer22μl(12.5~25pmoles)
模板质粒1μl(1×10-3pmoles)
5U/μlTaq酶1μl(5U)
总体积50μl

(2)根据厂商的操作手册设置PCR仪的循环程序:
①94℃5min
②94℃1min
③54℃1min
④72℃1min50s
⑤goto②29times
⑥72℃10min
(3)PCR结束后,取10μl产物进行琼脂糖凝胶电泳。观察胶上是否有预计的主要产物带。
(4)清理桌面,撰写实验报告。
(5)PCR产物可以直接与T载体连接(见实验五),然后转化感受态细胞(见实验八)。

7.思考
(1)复性温度如何确定?
(2)为什么要在最后延伸10min?
(3)是否有非特异性扩增产物(或引物二聚体),如何才能消除?

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欢迎讨论环介导的恒温扩增法(LAMP)
(1)严格分区操作,样品提取区、配液区、扩增区、检测区应相互独立,各区耗材及移液器应专用,实验前先用紫外线消毒以破坏残留的核酸。
(2)操作多份样品时,应先配制反应混合液并分装,减少操作,避免污染,同时增加反应的精确度。试剂的配置和分装应在装有紫外灯的超净工作台或负压工作台操作。
(3)移液器和吸头需专用。由于移液器极易受气溶胶或模板核酸的污染,移液器应尽可能使用可替换或可高压处理的,吸头尽可能使用带滤芯的吸头。
(4)防止操作人员污染,使用一次性手套,EP管与吸头应一次性使用,吸头不要长时间暴露于空气中,避免气溶胶的污染。
(5)加样或吸取模板核酸时要十分小心,吸样要缓慢,防止样品进入移液器内;吸样时尽量一次性完成,忌多次抽吸,以免交叉污染或产生气溶胶污染。
(6)EP管打开应先离心,将管壁及管盖上的液体甩至管底部。开管动作要轻,以防管内液体溅出。若不小心溅到手套或桌面上,应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面。
(7)模板核酸应密封保存,防止外溢及外来核酸的进入。
(8)设立适当的阴阳性对照及重复实验,既可验证LAMP反应的准确性,又可以协助判断扩增系统的可信性。
(9)扩增产物应妥善处理,尽量避免开盖检测,开盖极易产生气溶胶污染。本公司的试剂均采用闭管检测,有效防止污染发生。展开
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,从而大大提高对DNA分子的分析
基因扩增技术(PCR)聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)又称无细胞分子克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法,是基因扩增技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍,
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话说LAMP特异性强,LAMP使用4对引物与靶序列上的6个特定区域结合,即使一个碱基的差异,LAMP也能够区分相应的靶序列进行扩增,因此,比普通PCR具有更好的特异性。
这里所说的一个碱基的差异该怎么检测?如何理解?