请使用支持JavaScript的浏览器! +,PEL-ACK1-Y-1, PEL-ACK1-Y-2, PEL-ACK1-Y-5, Q07912, TNK2, ACK1, Activated CDC42 kinase 1 (ACK-1) (EC 2.7.10.2) (EC 2.7.11.1) (Tyrosine kinase non-receptor protein 2), PELACK1Y蚂蚁淘商城
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RayBiotech/Human Phosphotyrosine ACK ELISA/1 Plate Kit/PEL-ACK1-Y-1
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RayBiotech/Human Phosphotyrosine ACK ELISA/1 Plate Kit/PEL-ACK1-Y-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
PEL-ACK1-Y-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616
Note:
This ELISA uses an antibody pair and standard that have been validated for multiplex array products, but not for the 96-well plate ELISA format. Thus, this ELISA requires a 4 - 7 week development phase, which RayBiotech begins after receiving an order for the kit. After development, the kit will have passed RayBiotech"s ELISA quality control tests, and will thereafter have a typical 1 - 2 day lead time for orders placed.

Antigen Information

Accession Number:
  • Q07912
Gene ID:
  • 10188
Gene Symbols:
  • ACK1
  • TNK2
Protein Name & Synonyms:
Activated CDC42 kinase 1 (ACK-1) (EC 2.7.10.2) (EC 2.7.11.1) (Tyrosine kinase non-receptor protein 2)

Assay Format

Pathway:
  • Tyrosine Kinase Family
Specificity:
The antibody pair provided in this kit recognizes Human Tyrosine-Phosphorylated-ACK.
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Lysates
  • Tissue Lysates
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Colorimetric
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Semi-Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit

Product Features

  • Rapidly measure phosphorylated protein in lysates
  • Screen numerous different cell lysates without performing a Western Blot analysis
  • Minimal hands-on time, convenient, and non-radioactive material

Application Notes

Kit Components
  • Pre-Coated 96-well Strip Microplate
  • Wash Buffer
  • Biotinylated Anti-Phosphotyrosine Antibody
  • Stop Solution
  • Assay Diluent(s)
  • Positive Control Sample
  • Lysis Buffer
  • Streptavidin-Conjugated HRP
  • TMB One-Step Substrate
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Tubes to prepare sample dilutions
  • Protease and Phosphatase inhibitors
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • Benchtop rocker or shaker
  • Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
  2. Add 100 µl of sample or positive control to each well.
  3. Incubate 2.5 h at RT or O/N at 4 °C.
  4. Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
  5. Incubate 1 h at RT.
  6. Add 100 µl of prepared 1X HRP-Streptavidin to each well.
  7. Incubate 1 h at RT.
  8. Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
  9. Incubate 30 min at RT.
  10. Add 50 µl of Stop Solution to each well.
  11. Read at 450 nm immediately.

Storage/Stability

Upon receipt, the kit should be stored at -20 °C. Please use within 6 months from the date of shipment. After initial use, Wash Buffer Concentrate (Item B), Assay Diluent (Item E), TMB One-Step Substrate Reagent (Item H), HRP-Streptavidin (Item G), Stop Solution (Item I) and Cell Lysate Buffer (Item J) should be stored at 4 °C to avoid repeated freeze-thaw cycles. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge and store at -20 °C. Reconstituted Positive Control (Item K) should be stored at -70 °C.

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2021-08-20
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原文:ClinicalExperiencewithPolymethylmethacrylateMicrosphereFillerComplications---见3楼附件Aesthetic......
我需要那篇文献,和你的详细实验步骤。 我也是做无皂乳液聚合的,说不定能帮上你。 但我不明白你所说的失败指的是什么,关于产物的颜色,取决于粒径和浓度,近透明的产物到底算不算失败,这个还说不好。所以我需要更多的信息。我的qq是28283799。酰胺基。。。莫非你做的是NIPAM。。。
相关疾病:目前微球栓塞剂的研究为肿瘤治疗的热点之一,其疗效和适应症有待探讨.请有这方面经验的战友发表高见.理论上用作肝动脉栓塞微球的粒径应在40-200um之间,小于40um则有可能通过动静脉吻合进入静脉,大于......
流式细胞术中荧光补偿该如何调节?
以FITC和PE为例来看光谱重叠。FITC单染管的荧光会部分漏到PE通道中,而这部分需要从PE通道中减掉溢漏过来的FITC荧光。那么荧光补偿该如何调节呢?l 调节电压l 检测荧光通道的自发荧光l 每个荧光通道做单染管对照检测何为单染管对照?l 细胞l 补偿微球细胞通常是流式抗体单染管对照的样本首选,但是当细胞数量有限,无多余细胞用于抗体单染或感兴趣的表面抗原表达较低,阳性分群不明显不足以用来调节补偿时,建议选择补偿微球。补偿调节时要注意:l 使用未染色的细胞做PMT的电压设置l 不要使用未染色的补偿微球设置电压eBioscience提供两种补偿微球:OneComp eBeads与UltraComp eBeads。微球大小和淋巴细胞相当,可连接各种荧光标记的抗体来调节补偿。每滴微球中都含有两群:一群是可以结合抗体的阳性群,一群是不会与抗体反应的阴性群。优点:l 使用方便,一滴即可l 使用实验抗体与微球有效结合调节补偿,无需再用CD4分群来调节l 细胞替代物,适应各种孵育时间,结果稳定流式细胞术中荧光补偿该如何调节?l 能与各种种属和亚型的抗体反应ProductSpecies CompatibilityChain RecognitionFeaturesMouse IgRat IgHamster IgRabbit IgKappa Light ChainLambda Light ChainOne DropOne VialAll cell sizesViolet LaserUltraComp eBeads 01-2222√√√√※√√√√√√OneComp eBeads 01-1111√√√√※√√√√√Competitor X Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Anti-Rat Ig, k√√Competitor X Anti-Rat/Hamster Ig, k√√√Competitor X Plus Anti-Mouse Ig, k√√Competitor X Plus Anti-Rat Ig, k√√Competitor Z Anti-Mouse Bead Kit√√√
竞争品牌的微球是分种属的,使用不同抗体要购买多个产品以使用注:兔来源的抗体与微球结合力较弱,但某些还是可以使用l 适用于各种激发光---适用于488 nm 蓝光,532 nm 绿光,561 nm 黄光,633-635 nm 红光,UltraComp eBeads尤其适用紫外 (355 nm) 或者 紫色 (405 nm) 激光器l 微球本身信号经过优化适合补偿调节l 价格相当,有小包装操作步骤:1. 准备好流式管,每种荧光抗体一个;2. 将微球翻转或者涡旋混匀;3. 在每管中加入一滴微球;4. 在管中分别加入相应的 1 test 抗体(不同抗体 1 test 的用量不同,具体参见说明书);5. 敲击或者涡旋混匀;6. 2-8℃暗处孵育 15-30 分钟;7. 每管加 2ml 流式染色缓冲液,400-600 x g 离心 3-5 分钟;8. 弃上清,每管加入 0.2-0.4 mL 流式染色缓冲液;9. 混匀后上机分析
相关疾病:原发性肝癌肿瘤先天性卵巢发育不全综合征新研究表明,对不宜手术切除的肝细胞癌(HCC)和门静脉血栓形成病人,动脉内注射放射性90钇玻璃微球(加拿大渥太华MDSNordion公司的ThereSphere)似乎安全,而且耐受性好。  这种新治......
可以,这个和western定量的原理类似,需要有标准品来作比对。不过很难。因为流式主要是用来最相对量的比较的。
细胞内的蛋白,用荧光标记的单克隆抗体识别后,用流式可以测出每个细胞的相对荧光强度。有一种特异性的微球,可以吸附一系列不同定量分子数的抗体。这种微球吸附同样的荧光抗体,可以做出荧光强度和所吸附抗体分子数量的标准曲线。然后拿细胞检测的荧光强度和这个标准曲线对比,得到细胞内所结合的抗体数。因为单克隆抗体只结合相同的抗原表位,所以可以推算出细胞内蛋白的分子数量了。
解释结果的时候要考虑到抗体的特异性和染色的效果等影响因素。
静脉注射乳剂粒径都要0.5微米吧
最近有两位战友发信询问我的荧光微球吞噬实验的Protocol。

现分享于此:

LatexBeadsPhagocytosisassay

---Materials

*Fluorescencelabeledlatexbeads(1umdiameter),2.5%aqueoussUSPension
*3%BSAcontaining25mMNa2HPO4,pH6.0
*0,3%(w/v)azide
*Culturemediumcontaining5%FBS
*Distilledwater,PBS
*Bathsonication,6(12)-wellplates

---Cellcultureandtreatment

1,Inoculateplateswith7,0104cells/cm2perwell.Incubateat37℃,5%CO2for24hr,bestuntil50-70%confluenceisreached

2,Removeculturemediumandexposethecellstotestmaterial.Incubateat37℃,5%CO2for24hr.

---Preparationofcoatedlatexbeads

1,Washlatexbeadswithdistilledwaterandpelletat10,000gfor8minatRT.

2,Resuspendlatexbeadsin3%BSAcontaining25mMNa3PO4(pH6.0)andincubateatRTfor15minwithbathsonication.
*CoatingbeadsinBSAinsuresbeadsremaininamonodispersestate.

3,Washthebeadsoncewithculturemediumcontaining5%FBS.

4,Resuspendthebeadsinculturemediumatconcentration2.0%.Thisisbeadsstock.Storedindarknessat4℃.

---Assay

1,Controlsandsamples:Intactcontrol(Nostaining)1well
-Negativecontrol(azidetreated)1well
-Normalcontrol1well
-sample5wells

*Inordertodifferentiatebetweenphagocytosedbeadsandbeadsnonspecificallyadheretothecellsurface,controlcellsareexposedto0,3%(w/v)azidefor10minpriortotheadditionofcoatedbeads.Thistreatmentcompromisesmicroglialenergeticprocessesandfewbeadswereinternalizedasobservedbyfluorescentmicroscopy.Meanfluorescenceofazide-treatedmicrogliawasusedasthenegativecontrolandwassubtractedfromvaluesobtainedinexperimentalsamples.

2,Forexperimentsusing6well-plates,15μlbeadsstockin1mlculturemediumisappliedtoeachwell.Votexthebeadsstockwellandtakeout105μlandaddinto7mlculturemedium.Bathsonificatefor10minatRTindarkness.Thisisbeadsworkingsolution.

Forexperimentsusing12well-plates,6μlbeadsstockin0.4mlculturemediumisappliedtoeachwell.

3,WasheachwelltwicewithPBSandreplacewithbeadsworkingsolution,1ml/wellfor6-wellplate,0.4ml/wellfor12well-plate.Incubateinthedarkat37℃for80-120min.

4,Removebeadsworkingsolutionandwash3timeswithPBStoremoveexcessbeads.

5,LiftthecellsbyscrappingortrypsinizationandwashthecellswishPBS.

6,StainwithPI(4ug/mlfinalconcentration)andrunforFACS.
高输出聚苯乙烯胶乳粒子发生器可以每分钟产生高达7.2x1010 PSL微球,粒径为0.12μm。当这种气溶胶与720cfm的空气混合,用于以每分钟90英尺测试24“×48”过滤器时,系统输出将产生每立方英尺1×108挑战性上游气溶胶量。
对于六分之一效率(99.9999%)ULPA过滤器,该系统挑战将产生100个粒子/ 立方英尺的下游气溶胶浓度或将在标称1.0cfm激光粒子计数器(LPC)中产生100个粒子/分钟的计数速率。
过滤器效率以及过滤器中任何相关联的泄漏可以通过LPC简单地检测。标准集团的高输出PSL气溶胶发生器取代了传统过滤器测试和无尘室认证中使用的DOP(邻苯二甲酸二辛酯)和其他油基气溶胶发生器。
注射用缓释微球制剂,这个国外上世纪80年代中期就有产品问世的剂型,在国内仍然举步为艰,和其它很多新剂型一样停留于低水平重复的阶段。然而,随着化学药品开发难度的增大,国内新药开发的目光越来越向中药和生物技术药品转变,多肽蛋白药物作为生物技术药品中最重要的一个分支,其药物本身的特点与微球制剂特点的切合度很高,因此我相信相信微球制剂在未来不长时间内,前景光明。从园子里关于微球请教帖的数量也可见一斑,07年微球的请教帖明显多于之前的年份。
目前国内的制药企业对微粒释放系统的立项开发越来越多,园子里已经就脂质体展开了很多火热的讨论,我个人也参与其中,大家交流经验,取长补短,渐渐的找到了方向,系统而固定的讨论交流是非常有好处的。
因此在此倡议建立一个微球的交流区,让大家相互交流比如:微球产业化、技术难点、实验中遇到的问题、相关理论的探讨、最新进展交流等等
目前最常用的方法就是使用微球阵的multiplex。早以商品化了。

以BD出品的为例,你可以购买现成的或者可以根据你要检测的不同细胞因子和厂家定制bead array。基本原理就是试剂盒含有多种微球,每一种都是两种不同荧光强度组合,所以在流式检测的时候会形成一个矩阵。每种微球上附着有可以识别一种细胞因子的抗体。和样本孵育后,再加入荧光标记的抗不同细胞因子的抗体(同样颜色)。这样,只要微球上结合有细胞因子,这个微球就会有三种荧光了。
前两种荧光来判断是哪种微球(哪种细胞因子),第三种荧光是识别抗体上的,来定量。试剂盒还会提供标准品,用来做标准曲线。

1.取10mg荧光微球液体置于合适大小的离心管中,加入4mlMES缓冲液,混匀,离心(12000r/min),倾倒上清。

2.加入1mlMES缓冲液,超声重悬。

3.在装有1.5mgEDC和3mgNHS的离心管中分别加入300μl和600μlMES缓冲液,都配制成浓度5mg/ml,混匀。

4.加入配置好的NHS溶液0.2ml,EDC溶液0.1ml,混匀。

5.离心(12000r/min),得不到稳定沉淀。

想请教各位高手,为什么我加EDC和NHS活化之后离心得不到沉淀,所用荧光微球粒径196nm



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