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第一计：审时度势
为了帮助丁香园的兄弟姐妹申请到2007年国家自然科学基金，本人联合老婆继成功申请到2005年的国基之后，再次在10月份飞来捷报，又中了2006年的国基。不是本人牛气，首先要感谢从丁香园学到的“独家秘笈”的成功应用。为了感谢丁香园，本人和老婆呕血力创，推出我们申请国基的几大秘诀，提供给2007年奋斗的人们。
今天介绍第一计，审时度势。
所谓审时度势，关键在于要搞清楚基金究竟要赞助那些人，一般来说，国家设立基金，目的就是赞助那些能够在科研上有突破的人
。判断那些人能够在科研上有突破，这个就依靠评委来判断了，要知道国基从来不会雪中送炭，只会锦上添花。
你要申请，首先要想，假如你是评委，你写的这封标书送到你手上了，让你来判断是不是会有突破性成果，你怎样来判断？
你肯定说看工作基础，对了，这几乎是肯定的。就是一个申请青年基金的人，尽管不是很强调工作基础，但你想，现在评委的手里绝对不是就你一个基金标书，现在哪个角落、那个地方，可以说只要是人都在想办法申请基金，标书多的吓死人。评委不可能看到是青年基金，就不看工作基础了。所以不要认为申请青年基金，就可以不在工作基础上下功夫了。
那么，问题来了，如何在工作基础的书写上下功夫？或者说如何让评委一看就知道你是有工作基础的人？
当然是你发表的文章了，如果你在nature上发表一篇文章，兄弟，你不光今年可以中，明年也有你的份，而且，你申请20万，人家会说20万怎么会够？给40万吧。
一般来说，只要你能够在你从事的领域10％最高影响力上发表过一两篇文章，在工作基础方面你就不用愁了。现在的国内学者非常看重SCI的影响因子，因此呢，是人就知道这说明你在科研方面能够有突破。
因此工作基础最重要的是你有牛B文章，而不在于你发表文章的多少。从这个意义上来说，很多中文文章都是～～，呵呵，那个词太难听，不说了。
因此呀，奔2007国基的兄弟们，第一件要做的事情就是埋头工作，搞上几年，来一篇牛文。这是最重要的。
如果没有牛文，就拉那些有牛文的人入股，呵呵，这也应该算工作基础。有人说了，我真的没有，但还想申请，哪怎么办？兄弟不要急，请看第二计，瞒天过海。

RF100便携式荧光计。可以存放在抽屉里或架子上。使用简单：不需要专业的培训，只需要注意你的数据，而不是注意软件的应用。数据：可以通过U盘将数据输出到 Microsoft Text 中。仪器有大于 1,000个数据记录点。

据文献，现想做变性剂浓度与蛋白荧光值的曲线，变性剂浓度拟用折光仪来测，一般的工业用糖度计可行吗？

通常用来对核酸和蛋白进行定量。

荧光分析及其应用和发展

　　荧光是在某些物质受到光照射时，除吸收某种波长的光之外还会发射出的一种比原来吸收波长更长的光，当激发光停止照射后，它也会随之消失。由于物质分子结构不同，所吸收光的波长和发射的荧光波长也有所不同。利用这个特性可以定性鉴别物质。同一种分子结构的物质，用同一波长的激发光照射，可发射相同波长的荧光。若该物质的浓度不同，则浓度大时所发射的荧光强度亦强，利用这个性质可以进行定量测定。这个方法即为荧光分析法。
根据玻尔兹曼分布，分子在室温时基本上处于电子跃迁的基态。吸收了可见－紫外光后，基态分子只能跃迁到激发单线态的的各个不同振动－转动能阶，而不能直接跃迁到激发三线态的各个振－转能阶。激发态分子在很短的时间里，由于分子间的碰撞或者分子与晶格间的相互作用，以热的形态损失掉部分能量，从振动能级的较高能级向下降，这一过程即为振动弛豫。振动弛豫只能在同一电子能阶内进行。分子经过振动弛豫掉到第一电子激发态的最低振动能阶，发射光量子，分子跃迁到基态的各个不同振动能级。这里分子发射的光即为荧光。由于振动弛豫损失了部分能量，荧光的能量小于原来吸收的紫外光的能量，所以发射荧光的波长总比原来照射的紫外光波长更长。而有些物质的激发分子通过振动弛豫下降到第一电子激发态的最低振动能阶后，有可能经过另一个无辐射跃迁转移至激发三线态的高振动能阶上，即体系间跨越。对于大多数物质，激发单线态与三线态的跨越是禁阻的，通常只有极少数分子能到达三线态。但如果分子中有重原子存在，由于自旋－轨道的强偶合作用，电子自旋可以逆转方向，体系间跨越就变得容易了。经过体系间跨越的分子再通过振动弛豫降至三线态的振动基态，分子在三线态的振动基态可以存活一段时间（故磷光要延迟相当时间才发生），然后发出光辐射跃迁至基态的各个振动能阶，这种光辐射即为磷光。由于激发三线态的最低振动能阶比激发单线态的最低振动能阶能量低，故磷光辐射的能量比荧光更小，亦即磷光的波长比荧光更长。物质分子从激发单线态向三线态跨越的几率较小，而且处于激发三线态的某些分子还可以通过又一次体系间跨越回到激发单线态，再通过发射荧光回到基态。这个过程需要时间较长，故这种荧光也叫迟滞荧光。在这种情况下不发射磷光。再加上分子间相互碰撞、与溶剂间相互作用、各种猝灭效应等因素，在室温下溶液很少呈现磷光。必须采用液氦在冷冻条件下激发才能测到磷光，使磷光法应用不如荧光法普及。
　　荧光和磷光都具有两个特征光谱，即激发光谱与发射光谱。它们都可通过实验测得。以荧光物质测定为例，由淘汰发出的可见－紫外光通过单色光器Ⅰ和狭缝分光后照射到样品溶液，在某一波长的紫外光激发下，样品发出荧光。为了防止发射光的干扰，在与发射光垂直的位置上将样品发出的荧光通过单色光器Ⅱ和狭缝，检测器测得相应于各种荧光波长时的荧光强度F。如果固定荧光波长不变，仅改变单色光器Ⅰ，测定各种波长的激发光所得到的荧光。然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标作图，就得到荧光物质的激发光谱图。如固定激发光波长，改变单色光器Ⅱ，测定不同荧光波长时的荧光强度。以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图，得到荧光发射光谱，即荧光光谱。
　　能够发射荧光的物质都应同时具备两个条件，即必须有强紫外吸收和高的荧光效率。物质的长共轭结构可增大荧光强度，刚体平面结构分子具有较高的荧光效率。在共轭体系上的取代基对荧光光谱和荧光强度也有很大影响。而且分子所处的外界环境，如温度、溶剂、pH、荧光熄灭剂等都会影响荧光效率，甚至影响分子结构及立体构象，从而影响荧光光谱和荧光强度。
测定荧光的仪器有荧光计和荧光分光光度计。它们的部件不外包括下列四个基本部分：激发光源，样品池，检测器，滤光片和单色器。测量荧光强度所用的激发光源一般要比测量吸收芳中所用的光源强度强，通常用汞灯、氢灯、氙灯及卤钨灯。汞灯所发射的光谱线是不连续的，大都作为滤光片荧光光度计的光源。而荧光分光光度计都用氙灯作光源。测定荧光用样品池须用低荧光的玻璃或石英材料制成。样品池的形状以散射光较少的方形为宜。测低温荧光或磷光时，在石英样品池之外套上一个装盛液氮的透明石英真空瓶，以便降低温度。用可见紫外光作激发光源时，产生的荧光多数属可见光，一般都可用肉眼观察。荧光强度较低，在滤光片荧光光度计及荧光分光光度计中则用光电倍增管检测，其输出可用高灵敏度的微电计测定，或再经放大后输入记录器中，自动描绘光谱图。滤光片荧光光度计通常采用两个滤光片。放在光源和样品池之间的滤光片为激发滤光片或第一滤光片，它可以把不需要的光线滤去，让所选择的激发光透过而照射在测定物质上。在样品池和检测器之间的滤光片为荧光滤光片或第二滤光片，它可以把由激发光所发生的反射光、溶剂的散射光心脏溶液中杂质所发生的荧光滤去，只让样品溶液所发生的荧光通过而照射于检测器上。而在荧光分光光度计中，都用光栅作单色器因为光栅的色散是由紫外线到红外线间不随波长而有疏密变化，也就是谱线的波长读数是线性的，而且从光栅色散后得到的谱线的强度比石英棱镜得到的要强，测定灵敏度比较高。色散后的光线有数级，可用前置滤光片加以消除。
　　荧光分析以其选择性好，灵敏度高的优点已被广泛应用于各种元素分析。铜作为动物体内许多酶的组成成分之一，是一种非常重要的微量元素。近年来，对铜定量检测已有不少文章发表，最近报道测定铜(Ⅱ)的水杨醛苯腙荧光法，检出限为1.2×10-8　g/mL〔10〕；吖啶黄催化荧光光度法，检出限为5.0×10-10g/mL〔11〕。而茚三酮和过氧化氢反应能产生微弱的荧光，微量铜(Ⅱ)的存在能大大增敏其荧光强度。苏美红等基于此现象，建立了测定痕量铜(Ⅱ)的催化动力学新方法。该方法具有极高的灵敏度，检出限达7.4×10-12　g/mL,线性范围为10-11～10-6　g/mL，且选择性好，已成功地应用于人发和中药中痕量铜(Ⅱ)的测定。将同步荧光分析法用于中草药中痕量锗的测定极为灵敏方便。凌晓等首次利用三维荧光分析法与PARAFAC算法相结合，在激发波长为220～300nm（2nm为间隔），发射波长为325～600nm（5nm为间隔）对萘、1－萘酚和2－萘酚体系进行了分辨研究，分辨结果与真实结果一致。该方法分辨速度快，易于编程实现，且分辨效率高，解决了三者同时分辨难的问题，充分地说明了化学计量学在环境化学中具有广阔的应用前景。有人采用CNBr活化的琼脂糖凝胶小珠作为固相载体，应用藻胆蛋白荧光标记物对血清可溶性抗原检测作了初步的探索。结果表明,藻胆蛋白免疫荧光法用于可溶性抗原检测不但可行，而且具有荧光强度高、可长期保存且无明显衰减等特点。近年来，一些重要的有机染料探针在生物大分子光度分析、荧光分析和共振光散射分析方面得到了日益广泛地应用，深入研究这些有机染料的结构和光谱特性，探讨这些有机染料与生物大分子之间的作用，对于筛选性能优良的分子光谱探针，设计更加灵敏简便的分子光谱检测器件，是现代分析化学十分重要的课题。测定偶氮胂Ⅱ(Arsenazo)、铬黑T(EriochromeblackT)、铬蓝黑(EriochromeblueblackR)等3种化合物的荧光光谱，并用量子化学半经验方法AM1和PM3对3种化合物分子进行包括构型优化、振动分析和荧光激发光谱的理论计算，计算结果与实验值基本符合，为3种化合物在蛋白质荧光光散射分析中的应用提供了有意义的结果。对叶酸的光化学行为进行研究后表明光化学荧光分析方法适用于片剂中叶酸的测定。
　　由此可见，荧光分析法的灵敏度高，取样少，方法快速，已成为医药学、生物学、农业科学和工业三废等科研工作的重要手段之一。
参考文献
１．苏美红，封满良，章竹君．一种测定痕量铜(Ⅱ)的荧光新体系．分析化学，2000，28（4）：446-448
２．赵慧春，张田蕾，张铁莉．叶酸的光化学行为及其应用．药学学报，1999，34（2）：226
３．凌晓，曹玉珍，莫翠云．应用平行因子分析和三维荧光分析法分辨萘、1-萘酚和2-萘酚．分析化学，2001，29（12）：1412-1415
４．蒋淑艳，张伟玲．几种中草药中痕量锗的同步荧光法测定．药物分析杂志，1999，2（2）：
５．吴萍，顾铭，戚艺华．藻胆蛋白免疫荧光法的初步探索．化工冶金，2000，21（4）：372-378
６．苏宇，廖显威，李树伟．三种偶氮化合物的荧光光谱研究．化学研究与应用，2002，14（1）：69-70
７．孙毓庆．分析化学（第三版），58-77

洗衣液中的荧光剂主要是为了还原衣服的颜色，让衣服不那么快变旧...虽说荧光剂对人体有致癌的可能性，但是也不能断定洗衣液中的荧光剂含量是否达到了致癌的分量。它也有可能是安全的。
　　荧光增白剂其实是一种荧光染料，或者说是种白色染料，它的特性是能激发入射光线产生荧光，使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应，使肉眼看到的物质很白，达到增白的效果。

　　从国家质监局网站了解到，纺织、造纸、洗涤剂等产品中，国家是允许使用荧光增白剂，但荧光剂的使用并非没有禁忌，我国食品卫生法第六条明确规定，食品、食品包装、餐巾纸禁止使用荧光增白剂。

　　荧光剂对人体的危害目前国内还没有定论，也没有具体证据证明荧光剂吸收多少才会对人体造成伤害，但是在国外，荧光增白剂确实被列为潜在致癌物质之一。

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(f)我为实验室管理献一计(f)
为充分发挥实验室和仪器设备的使用效益，同时，又保证试验的正常进行和仪器设备的完好率，如果你对实验室管理有任何好的建议，欢迎参与讨论，请不要吝啬你的语言，大家可以从以下话题发表一下自己的看法，谈谈你们实验室是如何进行管理的：

1，试验仪器如何使用和维护；

2，试验卫生如何进行清洁与维护；

3，实验室安全问题；

........

格式不限，有一计说一计，请不要在网上搜一堆相关的资料发帖参与讨论，更希望能看到你在实际管理中的经验交谈；

有疑问就有解答，同时也欢迎你提出你的疑问，期待你的参与！

请问有知道PCR实验室没计的同仁吗？一区，二区，三区的空气流向和压力大小有熟悉的吗？

放在紫外灯下面看一下有没有明显的荧光反应。一般情况下是要有标准物质做比较的。当然，不同型号的荧光增白剂所呈现的颜色是不一样的，有的蓝一点有的紫一点。

紫外-可见分光光度法　　紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。
　　描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。这个定律表示：当一束具有I0强度的单色辐射照射到吸收层厚度为b，浓度为c的吸光物质时，辐射能的吸收依赖于该物质的浓度与吸收层的厚度。其数学表达式为： 式中的A叫做吸光度；I0为入射辐射强度；I为透过吸收层的辐射强度；（I／I0）称紫藤为透射率T；ε是一个常数，叫做摩尔吸光系数，ε值愈大，分光光度法测定的灵敏度愈高。
　　紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。②单色器[1]。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。③试样容器，又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5～10厘米。④检测器，又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
　　仪器类型则有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。
　　应用范围包括：①定量分析，广泛用于各种物料中微量、超微量和常量的无机和有机物质的测定。②定性和结构分析，紫外吸收光谱还可用于推断空间阻碍效应、氢键的强度、互变异构、几何异构现象等。③反应动力学研究，即研究反应物浓度随时间而变化的函数关系，测定反应速度和反应级数，探讨反应机理。④研究溶液平衡，如测定络合物的组成，稳定常数、酸碱离解常数等。

荧光分析法　　利用某些物质被紫外光照射后所发生的能反映出该物质特性的荧光，
　　可以进行定性或定量分析的方法。
　　特点：灵敏度更高 10-10-10-12g/ml，应用不如UV广泛。
　　应用：①直接荧光光度法
　　②作为HPLC的检测器（用的多）展开

根据Manual可以用荧光发光计和液闪检测计检测，
1.两种方法哪一种更加准确？
2.那一种方法更方便？
3.需要的仪器上海哪家单位有？