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Biomol/Drop-out Mix Synthetic Minus Arginine w/o Yeast Nitrogen Base (Powder) (Synthetic complete amino aci/500 g/D9518.500
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Biomol/Drop-out Mix Synthetic Minus Arginine w/o Yeast Nitrogen Base (Powder) (Synthetic complete amino aci/500 g/D9518.500
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Biomol
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Product information "Drop-out Mix Synthetic Minus Arginine w/o Yeast Nitrogen Base (Powder) (Synthetic complete amino aci"
Drop-out Mixes are used as a supplement to Drop-out Base for making synthetic, complete media formulations in accordance with Methods in Yeast Genetics. All lots are quality control tested using the appropriate yeast strains and transformants.  Convenient Powders  Useful for One-Hybrid and Two-Hybrid Systems,  Competitively Priced, Dust-Free: Specially milled powder blends are designed to eliminate or greatly reduce airborne particulates, Homogeneous: Proprietary blending technology ensures complete mixing of components, Appearance: White, homogeneous, free flowing powder, Solubility: Colorless, clear, complete, Companion Products: D9500: Drop-out Base With Glucose (Powder), D9501: Drop-out Base With Raffinose (Powder), D9502: Drop-out Base With Galactose (Powder), D9510: Drop-out Base With Glucose and Agar (Powder), D9511: Drop-out Base With Raffinose and Agar (Powder), D9512: Drop-out Base With Galactose and Agar (Powder), Y2020: Yeast Nitrogen Base w/ AA & w/ AS, w/o Carbohydrate (YNB) (Powder), Y2025: Yeast Nitrogen Base w/o AA, Carbohydrate & w/AS (YNB) (Powder), Y2030: Yeast Nitrogen Base w/o AA, Carbohydrate & w/o AS (YNB) (Powder), Y2035: Yeast Nitrogen Base w/AA & w/AS, Vitamin Free (YNB) (Powder), Y2035-05: Yeast Nitrogen Base (YNB) w/AA & w/AS, Vitamin Free, w/o Dextrose (Powder), Y2036: Yeast Nitrogen Base w/o AA, AS, Thiamine HCl (Powder), Y2037: Yeast Nitrogen Base w/o AA & w/AS (YNB) and w/o Fe, Zn, Mn, Cu (Powder)
Supplier: United States Biological
Supplier-Nr: D9518

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VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina®本品为针对Illumina®高通量测序平台定向开发的small RNA文库构建专用试剂盒,适用于模板起始量为0.1-1 μg的动、植物总RNA,以及分离纯化的small RNA。small RNA的3’和5’端分别连上通用接头,再经过逆转录、PCR扩增以及PAGE胶或磁珠纯化等步骤,最终得到适用于Illumina®平台的测序文库。试剂盒包含文... 查看更多>
默瑞生物代理--Paragon Genomics/816006/ CleanPlex™ 测序文库制备试剂盒/现货,Paragon Genomics是一家位于美国硅谷的生命科技初创公司。我们致力于开发具有突破性且易于使用的超高多重PCR技术, 用于基因组分析和临床诊断市场。我们的核心技术将首先应用于下一代基因测序文库制备市场,从而实现更准确, 更快, 并且更便宜的DNA测序样品制备和个体化医疗。 查看更多>
上海研谨生物科技有限公司在发布的AxyPrep 质粒大量制备试剂盒供应信息,浏览与AxyPrep 质粒大量制备试剂盒相关的产品或在搜索更多与AxyPrep 质粒大量制备试剂盒相关的内容。 查看更多>
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2018-08-27
北京益奥柏科贸有限公司在发布的SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(15%)供应信息,浏览与SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(15%)相关的产品或在搜索更多与SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(15%)相关的内容。 查看更多>
质粒中量制备试剂盒是由北京碧橙蓝生物科技有限责任公司代理或销售的axygen爱思进品牌的试剂,产品来源于。北京碧橙蓝生物科技有限责任公司是中国最权威的质粒中量制备试剂盒试剂销售服务商之一,在北京等地方销售质粒中量制备试剂盒试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业质粒中量制备试剂盒仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的质粒中量制备试剂盒产品 查看更多>
Paragon Genomics/816007/CleanPlex™ 测序文库制备试剂盒/现货,基于CleanPlex, Paragon Genomics已经开发出一整套二代测序靶向基因文库制备解决方案及产品。CleanPlex文库制备试剂盒与其独特设计的引物面板(定制或者目录面板)共同使用时,具有快速简便、高均一性、高覆盖率等特点。因为CleanPlex使用的引物无需做任何化学修饰,其合成成本也可以比其他方法低4-6倍。下面是CleanPlex的主要特点。 查看更多>
碧云天生产的超级感受态细菌制备试剂盒(Supercompetent Cell Preparation Kit)是一种用于快速制备高转化效率大肠杆菌感受态细菌的试剂盒。超级感受态细菌制备试剂盒是在传统超级感受态细菌制备方法的基础上进行适当改良而成,操作便捷,转化效率高。 使用本试剂盒可以使感受态效率达到108-109cfu/μg质粒。对于小的质粒效率略高,而对于大的质粒则效率略低一些。用本试剂盒制备的超级感受态细菌不仅可以转化质粒,而且非常适合于转化普通的连接产物,特别适合于转化平端连接等需要高转 查看更多>
天津品心诺生物科技有限公司在发布的NEBNext® Ultra™II DNA 文库制备试剂盒 供应信息,浏览与NEBNext® Ultra™II DNA 文库制备试剂盒 相关的产品或在搜索更多与NEBNext® Ultra™II DNA 文库制备试剂盒 相关的内容。 查看更多>
上海吉盛医学科技有限公司在发布的单细胞NGS线性文库制备试剂盒PicoPlex DNA-Seq kit供应信息,浏览与单细胞NGS线性文库制备试剂盒PicoPlex DNA-Seq kit相关的产品或在搜索更多与单细胞NGS线性文库制备试剂盒PicoPlex DNA-Seq kit相关的内容。 查看更多>
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如果你是用反转录后的cDNA跑电泳,出现好多条带或弥散状是正常的,因为你提取的RNA不可能是完整的一条链,而随机引物和特异引物扩增的时候是有肯能把大小不同的RNA同时进行扩增的.
你可以用你的目的引物,用反转录第一链进行扩增,看看能不能得到目的片段.
细菌RNA试剂盒提完后有DNA污染,去除DNA的方法:做普通pcr,看看条带对不对。DNase I 处理,酚氯仿抽,然后isopropanol沉淀,DEPC水溶。 不需专门灭火,因为在反转录前有一个步骤是加热变性。一般是75度5min 后面取不超过40%反转录体积的RNA用于反转录,但反转录前最好检测一下RNA质量,免得浪费反转录酶。
但是,这样做的前提的,RNA提得要好,浓度要高,这样免得RNA降解到不能用了。因为在有二价阳离子的(DNAseI buffer含有)情况下,RNA在60度以上时必然发生非酶促降解。
tRNA的种类和功能123
Qzhaotingting2017-10-12
tRNA(又叫转运RNA)约含70~100个核苷酸残基,是分子量最小的RNA,占RNA总量的16%,现已发现有100多种。tRNA的主要生物学功能是转运活化了的氨基酸,参与蛋白质的生物合成。
各种tRNA的一级结构互不相同,但它们的二级结构都呈三叶草形。这种三叶草形结构的主要特征是,含有四个螺旋区、三个环和一个附加叉。四个螺旋区构成四个臂,其中含有3′末端的螺旋区称为氨基酸臂,因为此臂的3′-末端都是C-C-A-OH序列,可与氨基酸连接。三个环分别用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示。环Ⅰ含有5,6二氢尿嘧啶,称为二氢尿嘧啶环(DHU环)。环Ⅱ顶端含有由三个碱基组成的反密码子,称为反密码环;反密码子可识别mRNA分子上的密码子,在蛋白质生物合成中起重要的翻译作用。环Ⅲ含有胸苷(T)、假尿苷(ψ)、胞苷(C),称为TψC环;此环可能与结合核糖体有关。tRNA在二级结构的基础上进一步折叠成为倒“L”字母形的三级结构(图3-2-6)。
tRNA分子中稀有碱基的数量是所有核酸分子中比例最高的,这些稀有碱基的来源是转录之后经过加工修饰形成的。
tRNA共有61种,对应61种氨基酸的密码子(64种密码子中,2个是起始密码子,且对应一定氨基酸;3个是终止密码子,不对应氨基酸)
天跟试剂盒提取多糖多酚植物总rna浓度一直很低是什么原因
用醌指纹法描述微生物群落的参数[7]有:(1)醌的类型和不同类型的醌的数目;(2)占优势的醌及其摩尔分数含量;(3)总的泛醌和总的甲基萘醌的摩尔分数之比;(4)醌的多样性和均匀性;(5)醌的总量等。对两个不同的群落,由上述分析所得数据可以计算出另一个参数____非相似性指数(D),用于定量比较两个群落结构的差异。
醌指纹法具有简单快速的特点,近几年来广泛用于各种环境微生物样品(如土壤,活性污泥和其它水生环境群落)的分析。
拜求各位高手,我在构建CDNA文库的时候总是有rRNA,请问怎样去除?
谢谢了!
对于多个分子生物学和基因组学应用,从克隆和PCR到基因组测序和芯片分析,DNA纯化都是必经之路。然而,选择最佳的纯化试剂盒却并非易事。例如,在您纯化基因组DNA时,您需要一个试剂盒,能温和地处理核酸,同时又不分离质粒DNA。而且,新一代测序技术对样品的要求颇高,我们也需要一些专门的产品来纯化DNA。在此,我们介绍一些新选择。盐沉淀方法Epicentre(Illumina旗下公司)的MasterPure™CompleteDNAPurificationKit采用一种专利的盐沉淀方法。这一系列试剂盒覆盖各种样品类型,包括血液、固定组织、植物、酵母、昆虫等,在短短30分钟内可带来高产量的核酸,而损失极少。据Epicentre的资深产品经理CristineKinross介绍,有了这些试剂盒,用户在测序或其他分子生物学应用的样品制备之前无需再进行额外的纯化。它们可去除蛋白及其他细胞碎片,而不引入那些必须去除的毒性化合物,从而避免了多次洗涤,并改善核酸产量。Kinross谈道:“利用MasterPure回收核酸的出色纯度让样品可直接进入测序文库的制备。”当然,对于其他应用,包括芯片、qPCR和克隆,它也是适合的。此外,这个试剂盒也能用于RNA的纯化。在获得总的核酸后,经过DNase处理,就能得到总RNA。多种试剂盒Promega提供广泛的核酸纯化试剂盒,采用几种不同的策略。例如,Wizard®GenomicDNAPurificationKit是基于经典的沉淀法,可从全血、组织培养细胞、动物及植物组织、酵母和细菌中提取基因组DNA,灵活高效;而ReliaPrep™系列试剂盒采用柱提法,简单快速。此外,Promega还提供基于磁珠纯化的试剂盒。Promega公司基因组学的全球产品经理EricVincent表示:“尽管溶液的确切组分会有不同,但裂解、结合、洗涤和洗脱的基本过程适用于不同的结合方法(如硅胶或纤维素),不同的纯化形式(纯化柱或磁珠),以及手动和自动纯化操作。”对于一些非常重要的样品类型(如FFPE样品),还需要一些专门的操作或处理。“我们开发了独特的结合/洗涤缓冲液,它们能有效去除抑制下游反应的物质,而优化的系统让研究人员能够捕获少量的核酸并以小体积(不到30μl)洗脱,我们还开发出自动化的解决方案,适合各种试剂和通量,”Vincent说。这些试剂盒提供了完整的解决方案,能够以极小的体积洗脱核酸,同时又避免抑制剂残留在洗脱液中。经过这些试剂盒纯化后,核酸可用于PCR、Sanger测序、新一代测序、芯片等下游分析。经典的硅胶膜QIAGEN的核酸纯化试剂盒依赖DNA与纯化柱上的硅胶膜结合。抑制剂被洗掉,而完整的DNA随后从柱上洗脱,产量高,纯度高,带来更高质量的新一代测序文库。MarcoPolidori-QIAGEN样本制备的全球产品经理-认为,在处理极少量的样品或困难的样品如FFPE时,高产量就变得格外关键。FFPE样品所产生的DNA可能会出现“随机胞嘧啶脱氨”事件,这会导致人为的单核苷酸多态性(SNP)。不过,QIAGEN的GeneReadDNAFFPEKit能够去除脱氨的胞嘧啶,避免在NGS实验中产生错误的结果。此产品尚未正式推出,若有兴趣试用,可填写资料。“我们的大部分试剂盒都已在NGS应用中得以证明,从循环肿瘤DNA的全基因组测序到微生物组,”Polidori谈道。这些试剂盒能让用户从各种样品中获得高质量的DNA,避免FFPE样品出现C-T的假象,并在很短的时间内带来高分子量的DNA。MagAttractHMWDNAkit就能够利用简单的磁珠操作,实现100-200kbDNA的纯化。整个纯化过程温和去除污染物及抑制剂,并具有极高的产量和纯度。离液盐Sigma-Aldrich公司提供GenElute™MammalianGenomicDNAPurificationKit,这是基于离液盐试剂的产品。在含有离液盐的溶液中,样品被裂解,以确保大分子的彻底变性。添加乙醇,让DNA与硅胶膜结合。污染物被洗掉,而DNA被洗脱在Tris缓冲液中。通过专为分离基因组DNA而选择的硅胶膜,此试剂盒让用户能够从各种样品中纯化高质量的DNA,包括培养的细胞、组织(包括鼠尾)、新鲜的全血或白细胞。据介绍,此试剂盒综合了硅胶膜结合和微量离心形式的好处,避免了昂贵的树脂、乙醇沉淀以及有害的有机物,如苯酚、氯仿。更重要的是,它纯化所得的DNA可应用于限制性内切酶消化、PCR、Southernblot、测序等。(作者:JamesNetterwald/生物通编译)
众所周知,RNA是一种相当不稳定的分子,它在这一方面可比DNA差远了。我们大家在实验室里基本上都耳闻目睹过,处理这种核酸时发生的悲惨故事。幸运的是,随着RNA研究逐渐成为主流,可供选择的商业化工具也越来越丰富越来越成熟。
RNA制备过程中究竟有哪些问题需要注意,又有哪些工具可以助我们一臂之力呢,且听下文分解。
RNA制备的四大祸害碱性条件、金属离子和高温都会促使RNA分子水解。因此,RNA操作一般在0°C-4°C的中性或微酸性缓冲液中进行,人们也常常在其中添加螯合剂,比如0.1mMEDTA。有些应用不允许EDTA的存在,这时可以通过离子交换树脂来去除阳离子。
在制备RNA时,RNase一直是个令人头疼的大问题,因为这种酶基本上无处不在。生物样品本来就含有RNase,它们存在于细胞的小隔间里,当细胞被裂解时这些RNase就释放出来。另外,实验室操作也很容易引入RNase。“这种酶到处都是,我们皮肤细胞上就有。如果你戴着手套接触了脸或者手臂,也会沾到一些RNase,”Promega公司的产品经理EricVincent提醒道。
在收获组织或细胞时,“提取RNA要越快越好,或者就想办法令RNase失活,”NEB公司的RNA研究带头人BretRobb指出。
如果不能立刻提取RNA,就应当通过速冻来稳定样本,或者将样本储存在特殊的RNA保存液中,比如AllProtectTissueReagent、RNAlater。此外,PreAnalytiX公司的PAXgeneBloodRNATube也很适合保存这样的样本,“不仅能确保RNA的安全,而且让细胞不会因为温度或缓冲液条件的改变表达任何转录本,”Qiagen公司的MartinSchlumpberger介绍道。PreAnalytiX是BD和QIAGEN的一个合资公司。
绝大多数RNA分离试剂盒中的裂解缓冲液(例如Qiagen公司的RNAEasy),“可以失活任何样本所带的RNAse,”Schlumpberger解释道。“这些产品对于RNA来说是相当安全的。”如果你更喜欢自己DIY,那么异硫氰酸胍、酚/氯仿和SDS都能帮你保护样本中的RNA。
据介绍,RNA纯化之后对环境中的RNAse最为敏感,这个时候需要特别注意预防RNAse的污染。
可不可以做到万无一失如何才能保证RNA实验的成功,这已经是一个老生常谈的问题了。RNA操作时应该戴上一次性手套,并且在专门的空间里进行,尤其要与质粒制备和细菌操作分开。操作者尽量不要接触洁净度不能令人百分百放心的物品。
我们来看看NEB公司是如何做到万无一失的。NEB公司的RNA实验室统一使用RNA专用的一次性耗材。他们认为高压灭菌会使溶液中的微生物释放出RNase,而这些RNase会在灭菌之后复性。因此NEB公司只信任经过认证的无RNAse器皿,抛弃了高压灭菌过程。Robb介绍道,目前市面上有许多经过认证的RNA专用产品(试剂盒、试剂和耗材),进行RNA实验已经比十几年前容易得多了。
“过去人们在配制溶液的时候总是胆战心惊,恨不得屏住呼吸进行称量和搅拌,以免把RNase带到样本中去,”他解释道。而现在,你可以很方面的买到各种无RNAse的试剂,从水、1MTris到5MNaCl。“使用这些试剂可以为RNA实验提供额外的保障。”
许多无核酶的塑料产品都经过了第三方的检测和认证,MoBioLaboratories就提供这样的服务。“我们可以帮助制造商建立始终如一的无污染生产线,”培训操作者如何识别和消除污染源,MoBio公司的CarlTsang介绍道。
我国大多数实验室还是使用玻璃器皿,这些器皿至少需要在180°C的条件下烘烤几个小时,才能确保将RNAse永久性地摧毁。之后,研究者们可以通过商业化的试剂盒进行RNAse检测,比如NEB公司的RNAse污染分析试剂盒。
添加剂的使用DEPC(Diethylpyrocarbonate)一直被用于处理水和溶液,失活其中的RNAse。“多余的DEPC可以在高压锅中去除,因为DEPC在高温下很不稳定,会释放出CO2然后消失,”Schlumpberger说。不过许多人并不爱和这种可能致癌的化合物打交道,Schlumpberger强调,如果没有正确处理,残余的DEPC也会使RNA失活。
对于那些不能高压灭菌的器物,我们可以用RNaseAway试剂处理,然而将其浸泡在无RNAse的水里。
Vincent指出,RNAse抑制剂的使用应当成为常规。以Promega公司的RNAsin为例,RNAse抑制剂能够特异性结合并抑制实验室中常见的RNAse,包括RNAseA、B、C和人胎盘RNAse。“等你发现引入了RNAse时往往已经太迟了,多加一层保险是很有必要的,”他说。
只要我们了解威胁RNA的主要因素(高pH、高温、金属离子和内切酶),就能够想办法一一化解。这时你会发现,RNA制备其实并没有那么难。
http://seq.cn/article-10584-1.html
是否需要纯化,还需进一步检测才能确定
1、测浓度和纯度,是否达标
2、跑电泳看条带是否与测的数据相互印证
如果上述两点满足,就不需要纯化,否则需要进一步纯化。
不过根据经验,一般都不需要,我们实验室用的是GNT系列的试剂盒,提取结果就直接进入下游实验了,效果挺稳定
质粒是真核细胞细胞核外或原核生物拟核区外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器(主要指线粒体和叶绿体)中和细菌细胞拟核区以外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子.现在习惯上用来专指细菌(大肠杆菌)、酵母菌和放线菌等生物中细胞核或拟核中的DNA以外的DNA分子.
小鼠没有叶绿体,你可以直接参照小鼠线粒体的提取方法进行提取.
DNA转录先变成tRNA还是mRNA_123
xinxianyongqi2021-08-07
如题,有人提DNA时加入tRNA吗
我在一些文献上看到说,要加入tRNA as carrier,但是这句话不好理解
有没有人用过,跟我讲讲tRNA到底有什么用
多谢指教
不行。因为你搞研究就要严谨,就算你提取出来了,结果也不可靠。
【求助】rna提取疑问123
woodyqlee2021-08-05
各位大侠好,我想做有关CDNA文库构建的东西,但是不知道改用何种方法提取mRNA,现在好像流行用trazol提RNA,但是不知道提取出来的RNA质量如何,能不能保证其中的没有剪切之前的mRNA的内含子不被降解?如果不行,那用什么办法好?多谢了。
另外还有,提完RNA后用RNase-freeDNase处理RNA会不会影响RNA的质量?
众所周知,氨基酸和那个密码子,只是通过那个密码子表的对应关系,对应起来的。但是呢,氨基酸和tRNA反密码子,对应又是通过那个氨基酰-tRNA合成酶催化作用产生的,为什么那个酶有那么大的功能呢,有没有那个文献解释?
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