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| Product Name | Hexa HisHHHHHH |
| Size | 5 mg |
| Catalog # | AS-24421 |
| US$ | $249 |
| Purity | % Peak Area By HPLC ≥ 95% |
This is a hexapeptide with 6 histidines primarily used in tagging proteins. His tags have been used in affinity purification of recombinant proteins and have also been used in studying protein transduction in cells with the use of cell-penetrating proteins/peptides. | |
| Detailed Information |  Datasheet Material Safety Data Sheets (MSDS) |
| Storage | -20°C |
| References | 1, Wieneke, R. et al. JACS. 136, 13975-78 (2014) 2, Liou J-S. et al. Peptides. 37, 273-284 (2012). |
| Molecular Weight | 840.9 |
| HHHHHH | |
| Sequence(Three-Letter Code) | H - His - His - His - His - His - His - OH |
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该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
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2018-02-28
第一章 招标公告河南省肿瘤医院样本库1、包埋工作站2、超微量光分光光度计3、低温高速离心机、4、石蜡切片机5、组织脱水机设备采购招标公告一、招标条件本招标项目河河南省肿瘤医院包埋工作站、超微量光分光光度计、低温高速离心机、石蜡切片机、组织脱水机设备采购，招标人为河南省肿瘤医院，招标项目资金来自自筹，出资比例为100%。本项目已具备招标条件，现进行公开招标采购，欢迎具有相应资格的潜在投标人参加投标。二、项目概况与招标范围：2.1项目名称： 查看更多
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湖北孝感阔海医疗科技有限公司在发布的湖北孝感阔海医疗供应产品KH-BL生物组织自动包埋机（带冷台）供应信息，浏览与湖北孝感阔海医疗供应产品KH-BL生物组织自动包埋机（带冷台）相关的产品或在搜索更多与湖北孝感阔海医疗供应产品KH-BL生物组织自动包埋机（带冷台）相关的内容。 查看更多
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2020-05-24
上海桑戈生物科技有限公司在发布的EMbed 812包埋试剂盒供应信息，浏览与EMbed 812包埋试剂盒相关的产品或在搜索更多与EMbed 812包埋试剂盒相关的内容。 查看更多
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上海沪震实业有限公司在发布的迷你活检带盖塑料包埋盒供应信息，浏览与迷你活检带盖塑料包埋盒相关的产品或在搜索更多与迷你活检带盖塑料包埋盒相关的内容。 查看更多
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2021-08-24
医流商城提供医脉赛磁珠法石蜡包埋样本 RNA 提取试剂盒20份报价、参数、图片、特点、咨询等有效信息,100%正品保证,是您网上购买医脉赛磁珠法石蜡包埋样本 RNA 提取试剂盒20份的放心平台 查看更多
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2019-08-18
实验准备：1. 石蜡切片或石蜡块2. 无水乙醇3. 移液器及配套无菌枪头（10 μl， 200 μl ，1ml），1.5 ml 离心管4. 涡旋振荡器，金属浴/水浴，台式离心机实验准备-试剂盒准备：使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。 查看更多
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2021-09-06
北京索宝生物科技有限公司在发布的组织包埋盒供应信息，浏览与组织包埋盒相关的产品或在搜索更多与组织包埋盒相关的内容。 查看更多
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2021-09-22
价格：￥￥1 类型：耗材广州市凯秀贸易有限公司长期现货批发供应日本羽毛Feather、德国莱卡Leica、英国珊顿shandon、德国美康Microm和美国伯舒纳Personn... 查看更多
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2021-08-12
上海冰晴生物科技有限公司在发布的 SAKURA美国樱花 OCT 冰冻切片包埋剂 4583 供应信息，浏览与 SAKURA美国樱花 OCT 冰冻切片包埋剂 4583 相关的产品或在搜索更多与 SAKURA美国樱花 OCT 冰冻切片包埋剂 4583 相关的内容。 查看更多
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2018-12-26
近10年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于人类疾病研究的诸领域，为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为，人类基因组并非人们想像的那样稳定，诸如基因重排、扩增、缺失，突瘘和DNA甲基化类型改变等时有发生，这些改变对于基因表过和 查看更多
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Personna病理切片一次性刀片和美国樱花SAKURA、德国徕卡Leica、英国珊顿Shandon、美国...包埋剂O.C.T及德国莱卡Leica切片石蜡、日本松浪Matsunami玻片... 查看更多
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2021-09-16
美国原装进口樱花OCT冷冻切片包埋剂SAKURA Tissue-Tek O.C.T. Compound 4583SAKURA Tissue-Tek® O.C.T. Compound（美国原装进口樱花O.C.T.冷冻切片包埋剂，货号：4583），每瓶118ml，12瓶/箱；促销：1-5瓶130.000 6-12瓶 125.00 12瓶以上120.00OCT冰冻切片包埋剂-O.C.T. Compou... 查看更多
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石蜡包埋机是否有医疗器械注册证_问答详情_包埋机_组织处理_仪器类...123
杰伦4iX2017-09-30
石蜡包埋机当前只需要办理一类医疗器械产品备案和生产备案，取得备案证后即可生产经营。
河南新乡吉林生物组织包埋机报价新乡市维克科教仪器供应价格 ...123
robust_le2014-09-30
国产组织包埋机大概多少钱一台？带冷台
石蜡包埋机哪个牌子的质量好?123
待人很和气2017-09-30
湖北慧达仪器有限公司的：HD-310B的质量最好！容量大，还是触摸屏的，国产的只有慧达公司的包埋机有触摸的，用着很方便，也够档次！
小鼠结肠包埋时怎么保证竖着放不会倒？_问答详情_包埋机_组织处理_...123
dxy_jvoqu1zq2017-08-03
最近在做小鼠结肠组织的石蜡包埋，试验过一次，包了四块石蜡，就一块是竖着的，其他都倒了，我需要肠的横切面，各位大侠给个注意。
...组织染色机,生物组织切片机,孝感病理脱水机,生物组织自动包埋机,...123
沙扬娜拉882014-12-25
全自动切片机LeicaRM2265
全自动且可编程的轮转式切片机LeicaRM2265是徕卡病理系统的顶级产品。还可以将RM2265全自动轮转式切片机与LeicaLN22冷冻附件配合使用，进行超低温切片（-150°C）。
全自动包埋机LeicaEG1150
LeicaEG1150模块化组织包埋中心整合了两个独立组件，LeicaEG1150C冷台和LeicaEG1150H加热石蜡分配模块。
独立模块为安排包埋工作流程提供了灵活性，可从两个方向（从左往右或从右往左）任意选择，满足客户的个人需求。位置可调的卤素聚光灯能够提供亮光，甚至可以照亮整个工作区域。
一个可选择的可调放大镜能更容易地在活检组织和其他小标本中定位标本。
全自动染色机LeicaST5010AutostainerXL
成熟的LeicaAutostainerXL始终为您提供可重复的、稳定的高品质染色并提高工作生产量。
此外，与LeicaCV5030玻片盖片机配套使用可建立一个工作站点，不再需要手动操作染色和盖片。
开放式耗材和试剂所带来的灵活性以及可选择使用经验证的Surgipath试剂，使各种耗材和方案能够提供出众的染色和盖片质量。
更多病理设备登录leica官网了解http://www.leicABIosystems.com/cn/
咨询徕卡病理官方请登录http://china.leicabiosystems.com/lbs_specimenpreparation/
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全自动包埋机LeicaEG1150
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全自动染色机LeicaST5010AutostainerXL
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此外，与LeicaCV5030玻片盖片机配套使用可建立一个工作站点，不再需要手动操作染色和盖片。
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包埋机怎么用,注意事项123
maria30145927872021-07-22
包埋机，又称生物组织包埋机或者石蜡包埋机，是对人体或动植物标本经脱水浸蜡后进行组织蜡块包埋，以供切片后作组织学诊断或研究的设备，适用于医学院校、医院病理科、医学科研单位、动植物科研单位和食品检测等部门使用。
二.包埋机作用及原理
由于生物样品各种组织成分不同，因此性质也各异，如软硬程度，疏松、致密程度，面积大小等都不相同，自然状态下要将它们切成十几微米甚至几个微米的薄片，几乎是办不到的。包埋的原理就是将某些特殊的支持物质浸入到组织块内部，利用支持物质的物理特性，如由液态转变成固态，使整个组织具有均匀一致的固态结构和足够的硬度，以利于用切片机制取极薄的切片。组织学切片技术中最常用的一种包埋方法是利用石蜡作为包埋剂，将浸过蜡的组织块置于石蜡内制成蜡块。
由于组织是柔软的，或局部的软硬不均，使用常规技术制作切片或超薄切片时制作厚薄均匀的切片是困难的，所以有必要用一定物质浸透组织内部，整个组织一样硬化，先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具)，而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱水盒中取出，放入包埋托中央，放在小冷台上，用镊子轻按组织块，以达到组织块平整，盖上脱水盒底，再加好石蜡，移至冷冻台上，待冷冻好后，卸下组织蜡块待切。?
包埋机不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，在病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中;教学中，为达到光镜下观察切片标本。包埋解决方案帮助您确保正确的组织定位、避免出现热损坏并创造出理想的组织块形状。
三.包埋机清洁注意事项
每次清洁仪器之前，要注意关闭仪器，并拔下电源插头。
处理清洁材料时，请遵守制造商的安全规定以及所在国家的现行实验室规定。
清洁期间，不得有任何液体渗入仪器内部。
为防止刮伤仪器表面，在任何情况下均不得使用带有锋利边缘的金属工具。
工作表面的清洁:
适合去除石蜡的所有实验室常用清洁产品(例如，Paraguard或二甲苯替代品)均可用于清洁工作区。
仪器和外部表面的清洁：
必要时，请用温和的家用清洁剂或肥皂水清洁喷漆的外表面，并用湿布擦拭。
避免有机溶剂长时间接触仪器表面。不得在喷漆表面使用二甲苯或丙酮。
版主tk57ml留言:
就这么从别人的网站复制粘贴过来的？
【转贴】石蜡包埋的基本步骤[精华]_问答123
wanliheng2009-04-19
这两天一直在搜索论坛中有关石蜡包埋的帖子，发现没有非常系统的知识，找到了两个，觉得比较好，发出来供大家参考，和讨论。
1.来源：细胞生物学实验教程王金发何炎明主编科学出版社
特点：除了基本知识以外，给出了切片时出现的问题及解决方法
http://Lifesci.sysu.edu.cn/cms/images/10558_3_e_1.pdf
光学显微标本的制作技术
【实验目的】
了解光学显微镜切片制作技术的基本方法步骤。
【实验原理】
采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构，在自然状态下是无法观察清楚的，多数动、植物材料都必须经过某种处理，将组织分离成单个细胞或薄片，光线才能通过细胞。为了适应这个需要，就产生了光学显微镜制片技术。
光学显微镜的制片技术方法可分为两大类：一类是非切片法，另一类是切片法。
非切片法，是用物理或化学的方法，使细胞彼此分离，如有分离法、涂布法、压碎法等。非切片法的操作比较简单，能保侍细胞的完整，但是细胞之间的正常位置往往被更动，无法反映细胞之间的正常联系。它可以与切片法配合使用，各取其长处。
切片法，是利用锐利的刃具将组织切成极薄的片层，材料须经过一系列特殊的处理，如固定、脱水、包埋、切片、染色等，过程十分繁复。在制作过程中，还要经过一系列的物理和化学的处理，这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。切片法虽然工序繁琐，技术复杂，但是，它最能保持细胞间的正常的相互关系，能较好和较长时间地保留细胞的原貌，所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。
【实验仪器、材料和试剂】
（一）仪器：石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖玻片
（二）材料：洋葱根或小鼠肝
（三）试剂：乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、重铬酸钾、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘油、鸡蛋、纱布、加拿大树胶、麝香草酚
【方法与步骤】
光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒手切片，但是由于组织块往往十分柔软，
18
切削很困难，而且无法得到十分菲薄的切片，因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用，并将整个组织块包住，然后再用精密的切片机制作切片，才能获得良好的效果。这种方法称为包埋法，包埋的物质称为包埋剂。常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等，水和塑料也可作为包埋剂。根据包埋剂的不同，分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等，它们各有长处，可以根据需要选用，但是使用得最多的还是石蜡切片技术。
石蜡作为包埋剂，有其独特的优点，例如：石蜡能切出极薄的蜡片（2～10μm）；切片时能连成蜡带，便于制作连续切片；操作较容易，组织块可以包埋在石蜡中长期保存。然而石蜡切片的制作过程较长，步骤很多，一步不慎往往导致前功尽弃，而且这些处理引起组织块或多或少地收缩，切片时受湿度影响比较大，这些不足之处必须在制片过程中认真对待，尽量减小它的不良影响。
石蜡切片的制作过程主要包括：取材，固定，脱水，透明，透蜡，包埋，切片，贴片，染色，透明，封藏等步骤。
1．取材
材料的好坏直接影响到切片的质量，无论取哪一种动植物材料，以下几点是必须注意的。
（1）植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分；动物材料取用时常对动物施以麻醉，常用的麻醉剂有氯仿和乙醚，或将动物杀死后迅速取出所需要的组织。
（2）取材必须新鲜，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要，应该尽可能割取生活着的组织块，并随即投入固定液。
（3）切取材料时刀要锐利，避免因挤压细胞使其受到损伤。
（4）切取的材料应该小而薄，便于固定剂迅速渗入内部。一般厚度不超过2mm，大小不超过5×5mm2。
2．固定
组织和细胞离开机体后，在一定时间内仍然延续着生命活动，会引起病理变化直至归于死亡。为了使标本能反映它生前的正常状态，必须尽早地用某些化学药品迅速地杀死组织和细胞，阻抑上述变化，并将结构成分转化为不溶性物质，防止某些结构的溶化和消失。这种处理就是固定。除了上述作用外，固定剂会使组织适当硬化以便于随后的处理，还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。
固定剂的作用对象主要是蛋白质，至于其他成分如脂肪和糖，在一般制作时不加考虑，如要观察这些物质，可用特殊的方法将其固定下来。
固定剂的作用表现在对材料体积的改变、硬化的程度、穿透的速度以及对染色的影响等方面。这些作用的好坏、大小，都依所固定的材料性质而定，同样一种固定液对某一材料来说是良好的，但对另外一些组织可能就不很适用。良好的固定剂必须具备的特征是：穿透组织的速度快。，能将细胞中的内含物凝固成不溶解物质，不使组织膨胀或收缩以保持原形，硬化组织的程度适中，增加细胞内含物的折光度，增加媒染和染色能力，具有保存剂作用。固定剂有简单固定剂和混合固定剂的划分。
简单固定剂即单一的固定剂，常用的有乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞、苦味酸、铬酸、重铬酸钾和锇酸。其中，苦味酸、升汞、铬酸既能凝固细胞清蛋白，又能凝固核蛋白；乙醇只能凝固清蛋白，而醋酸只能凝固核蛋白；甲醛、饿酸和重铬酸钾对这两种蛋白质都不凝固。
简单固定剂的局限性较大，如将其适当混合，制成复合固定剂可以取得更好的效果。常用的混合固定剂有：
Bouin液（70份苦味酸饱和水溶液+25份4％甲醛+5份冰醋酸）、Zenker液（升汞5g＋重铬酸钾2.5g＋硫酸钠1.0g＋5ml冰醋酸＋100ml蒸镏水）、Carnoy改良液（3份无水乙醇+1份冰醋酸）等。固定剂的种类甚多，我们必须依据各种固定剂的性能及制片的不同要求来加以选择。19
固定时，须注意以下几点：
（1）固定剂应有足够的量，一般为组织块体积的10～15倍。
（2）如所固定的材料外表有不易穿透的物质，可将材料先在含乙醇的溶液中固定几分钟，再移入水溶性的固定液。
（3）材料固定后如不立即下沉，可将其中气泡抽出。
（4）固定时间依材料大小、固定剂种类而异，可从1小时到几十小时，有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强，作用时间应严加控制，不能过长。
（5）一般固定剂都以新配制的为好，用过的不能再用。有些混合固定剂由甲、乙两液合并者，一定要在使用前才混合。
（6）固定完毕，根据所用固定剂的不同，用水或乙醇冲掉残留的固定剂，以免固定剂形成沉淀，影响以后组织块的染色。
3．脱水
生物组织中含有大量的水分，它和石蜡是不能相溶的，致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部，因此须使用脱水剂将水分除尽，这就是脱水的作用。
脱水剂必须能与水以任何比例相混合。脱水剂有两类：一类是非石蜡溶剂，如乙醇、丙酮等，脱水后必须再经过透明，才能透蜡包埋；另一类是兼石蜡溶剂，如正丁醇，脱水后即可直接透蜡。
常用的脱水剂是乙醇，因为它价格便宜，易于得到。为了避免剧烈的扩散引起的组织的强烈收缩，脱水步骤应从低到高以一定的浓度梯度来进行，一般组织从30％乙醇开始，经过50％、70％、80％、95％、100％至完全脱水；对于一些柔软的组织应从15％开始。脱水时间依据组织的类型和大小而定，一般各级乙醇中放置45min到1h，如果中间须停顿，应使材料停留在70％乙醇中，因为低浓度乙醇易使组织变软、解体，高浓度乙醇有脆化组织作用，放置时间不能过长，另外，脱水必须在有盖瓶中进行，以防止高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不彻底。需要保存的材料可脱水至70%乙醇时停留其中，如需长期保存，可加入等量的甘油。
丙酮也是很好的脱水剂，其作用和用法与乙醇相同，不过其脱水力和收缩力都比乙醇强。
甘油常用于藻类、菌类及柔弱材料的脱水。
二氧六环为无色的石蜡溶剂，对组织没有收缩及硬化等不良后果，但其蒸气有毒，使用时须小心。
正丁醇可与水及乙醇混合，亦为石蜡溶剂，其优点是很少引起组织块的收缩与变脆。
叔丁醇的性质、作用和用法同于正丁醇，但因其价格昂贵而很少使用。
4．透明
组织块用非石蜡溶剂脱水后必须经过透明。透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合，它取代了脱水剂后，石蜡便能顺利地渗入组织。
透明剂的种类很多，较常用的是二甲苯、甲苯、苯、氯仿、香柏油和苯胺油等。
二甲苯作用较快，透明力强，但组织块在其中停留过久，容易收缩变脆变硬，同时若脱水不净，就会引起不良后果，在应用时必须特别小心。通常将组织块先经纯乙醇与二甲苯的等体积混合液，再进入纯二甲苯，这样可减少上述的缺点。透明时间应由组织大小而定，—般各级停留时间在30min至2h，在纯二甲苯中应更换2次，总时间则以不超过3h为宜。材料经过透明，会显示出前一步脱水的效果如何，若脱水彻底，组织则显现透明状态，如组织中有白色云雾状，说明脱水不净，须返工处理，但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明时，应避免其挥发和吸收空气中的水分，并保持其无水状态。20
甲苯的一般性质与二甲苯相似。用法亦同，唯沸点较低，透明较慢，但不会使组织变脆。
苯的用法同于二甲苯，对组织的收缩作用小，但须警惕其爆炸和吸入而引起中毒。氯仿适于大块组织的透明。
5．透蜡和包埋
包埋用的石蜡，熔点在50～60℃之间，应根据材料本身的硬度、切片的厚薄和当时的气温条件来选用。一般动物材料最常用的石蜡熔点为52～56℃，植物材料的用54～58℃的；切片薄的用58～60℃的，切片厚的则用52～54℃的；室温10～19℃时选用52～54℃的石蜡可顺利切片，冬季可用熔点46～48℃的石蜡，夏季可选56～58℃的。
石蜡的优劣与切片的成败密切相关。鉴别石蜡质量的方法是：将石蜡熔化后倒入纸盒使其凝结且无气泡和裂痕，30～35℃放置24h且无气泡和不透明的晶状小点出现，蜡块裂面不呈颗粒状，切成薄片不碎成细粒。这种石蜡即为品质优良。含有杂质的新蜡或用过的废蜡可清洁后再用，方法是将石蜡放入锅内，加热到开始冒白烟，然后用小火继续加热30min（注意别超过发火点），使其去除水分和挥发性杂质，并在温箱中过滤以去除灰尘等颗粒。
透蜡须在恒温箱中进行，恒温箱的温度调节至高于石蜡熔点3度，使经过透明的组织块依次用石蜡与二甲苯的等量混合液、纯石蜡处理。纯石蜡应处理2～3次，透蜡的时间依材料性质而定，一般每次需15～30min。
透明的关键是控制温度的恒定，切忌忽高忽低，温度过低石蜡凝固无法渗透，温度过高使组织收缩发脆。
包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。具体做法是；先准备好纸盒（具体折法见图1-3及说明），将熔蜡倒入盒内，迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部，切面朝下，再轻轻提起纸盒，平放在冷水中，待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中，使其迅速冷却凝固，30min后取出。
包埋用蜡的温度应略高于透蜡温度，保证组织块与周围石蜡完全融为一体。石蜡的迅速冷却也很重要，否则包埋块中将会产生结晶。以后切片时引起碎裂。
6．切片
（1）石蜡块的固着与整修
在包埋以后，就可进行切片。包埋好的石蜡块装上切片机进行切片前还须进行固着和整修。
固着：一般旋转式切片机上都附有可固着石蜡块的金属小盘，这也可用同样大小的台木替代。用加热的蜡铲将包埋块粘贴于固着物上，并使组织块朝外，便于以后迅速切出所需的片子。
整修：用加热的蜡铲或刀片将固着的包埋块四周修平，使上下两面修成平行面，常保留组织周围附着宽2～3mm的石蜡，而修好的蜡块呈长方形。还可削去一角以便于在蜡带上识别切片。
（2）切片机和切片刀
切片机是用来作各种组织切片的一种专门设计的精密机械，常用的是旋转式切片机，它的夹物部分是上下移动前后推进的，而夹刀部分则固定不动。主要部件是安装切片刀的刀台、安装包埋块的标本台和控制切片厚度的微动装置。切片时切片刀固定不动，转动转轮，标本台上下运动并按调好的切片厚度向前推进一定的距离，组织块上下运动一次，便在刀片上得到一张合乎厚度要求的切片。
切片刀与切片的质量直接相关。切片前必须磨刀，方法是：将切片刀装上刀柄、刀背夹、滴少许石蜡油在平滑的磨刀石上，将刀贴着磨刀石以背向刀口方向磨，使用完毕后应及时用二甲苯将石蜡油擦净。
（3）切片方法
切片前，将刀口置放大镜下观察，选择刀口平整无缺刻的部分来进行切削。将所要切的包埋块固定在标本台上，使包埋块外切面与标本夹截面平行，并让包埋块稍露出一截。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋，上好刀片，使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角，包埋块上下边与刀口平行。在微动装置上调节切片要求的厚度，调节时应注意指针不可在两个刻度之间，否则容易损伤切片机，将刀台移至近标本台处，让刀口与组织切面稍稍接触，这时就可以开始切片了。方法是：右手转动转轮，左手持毛笔在刀口稍下端接隹切好的片子，并托住切下的蜡带，待蜡带形成一定长度后，右手停止转动，持另一枝毛笔轻轻将蜡带挑起，平放于衬有黑纸的纸盒内，注意切片速度不宜太快，摇动转轮用力应均匀，防止切片机震动厉害引起切片厚薄不均匀，还应注意转动的方向，以防标本台后移而切不到片子。切片完毕，应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。
（4）切片中存在的问题及补救方法
石蜡切片是很不容易掌握的，有时很容易成功，有时则由于某种因素而造成切片的质量低劣，甚至完全失败。现将切片时经常遇到的一些缺点、可能的原因以及补救办法列于表1-3。
表1-3石蜡切片可能产生的问题和解决方法
缺点：石蜡带弯曲不直
原因：
1．石蜡块上下两边不平行
2．石蜡块的上下两边不和刀口平行
3．刀口锋利不一，局部产生差异
4．蜡块的一边较另一边为软，或两边的硬度不一致
5．材料未居蜡块正中央
6．材料大而形不正
补救办法：
1．取下台木，将两边修干
2．调节标本台，使两者平行
3．移动刀片，改用新的刀口
4．待蜡块冷却后再切，或重新包埋
5．用刀片切去部分石蜡，使材料居中
6．在大的一边切去少许石蜡
缺点：切片分离、不能连成带状
原因：
1．室温过低
2．石蜡过硬
3．材料边缘留蜡太少
4．刀的角度不适合
补救办法：
1．在切片机上方开一电灯或提高室温
2．在蜡块面加一层45℃的软蜡或用手指蜡摩擦块面
3．重新包埋
4．矫正刀的角度
缺点：切片卷起呈圆筒状
原因：
1．室温过低
2．石蜡过硬
3．刀口太钝
4．刀的倾角太大
补救办法：
1．提高室温
2．加软蜡
3用毛笔将蜡片摊开压住，切2—3片即成带
4．减小倾角
缺点：切片粘附于切片刀，皱摺在一起
原因：
1．室温过高
2．石蜡过软
3．刀口上留有一层石蜡
4．刀口钝
补救办法：
1．降低室温
2．将蜡块投入凉水中稍浸耒—增加
3．切片厚度，改用硬蜡包埋，用二甲苯拭去刀口的石蜡
4．磨刀或移动刀口
缺点：切片纵裂
原因：
1．刀有缺口
2．石蜡块中含有颗粒、杂质
3．刀口留有碎屑或细丝
4．组织太硬
补救办法：
1．可移动刀口
2．将颗粒拽去
3．清洁刀口
4．让包埋块在水中浸泡
缺点：切片有横纹
原因：
1．刀和台木的固定螺丝太松
2．刀口倾斜度太大
3．刀口有石蜡屑
补救办法：
1．旋紧螺旋
2．可放平1—2。后再切
3．用氯仿拭去
缺点：切片厚薄不匀
原因：
1．切片机有毛病
2．夹刀不当
3，未旋紧标本台螺旋
4。石蜡块过硬
补救办法：
1．矫正切片机装置
2．对症治疗
3．旋紧螺旋
4．将石蜡块在水中浸泡
缺点：每张切片厚薄不匀
原因：
1．刀口震动，是由于材料过硬
2．刀的倾角太大
补救办法：
1。在蜡块表面涂一层火棉胶
2．减小倾角
缺点：材料发生裂隙破碎或脱落
原因：
1．脱水不干净
2．有透明剂残留
3．石蜡透入时，温度过高或时间过长
4．由于脱水剂和透明剂的影响，使组织变硬发脆
5．材料太硬或太粗
补救办法：
1．无法弥补
2．增加浸蜡时间，重新包埋
3．无法补救
4．用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明
5．在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液
缺点：切片时发生沙沙声
原因：
1．组织块过硬
2．包埋温度过高
3，材料内留有结晶体
补救办法：
1．浸泡水中软化
2．无法补救
3．无法补救
缺点：石蜡块将蜡带抬起
原因：
1．由于摩擦而产生静电荷所致
2．石蜡块上面附有石蜡碎屑
3．刀口上附有石蜡碎屑
补救办法：
1．提高室温
2．用刀片将碎屑清除
3．用二甲苯或氧仿清除
7．贴片
切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理，但是切片常有细小的横纹，必须经展平后才能贴附，否则影响染色和观察。
贴片一般有捞片法和烫板法。
捞片法比较简单，首先将切片分割开，投入到48℃的温水浴中，这时切片都浮在水面上，由于表面张力的作用使切片自然展平，然后用涂有甘油蛋白溶液（将鸡蛋一个打破入杯中，去除蛋黄留下蛋白，用筷子充分调打成雪花状泡沫，然后用双层纱布过滤至容器中，加入等量的甘油，混合，最后加入百分之一体积的麝香草酚（thymol）作防腐用，可保存几个月到一年。）或5％明胶水溶液的载玻片倾斜着插入水面去捞取切片，使切片贴附在载玻片的合适位置，于室温下放置一昼夜后使其彻底干燥。
烫板法，是将涂有粘片剂的载玻片上涂上水，把已分割好的切片贴上去，再置载玻片于35℃恒定的烫板上让切片摊干，并倾斜或用吸水纸吸去水分，最后将载玻片再度放烫板上晾干。
要注意，不管是使用捞片法还是烫板法，所用的载玻片必须洁净，不能有油污（检验法：已涂有粘片剂的载玻片上滴加数滴蒸馏水，若发现水不均匀分散而聚成滴状，即表示载玻片不清洁，有残留油脂等物在上面）；切片的光面应朝下，否则染色过程中切片容易脱落。
8．染色
组织切片是无色透明的，必须进行染色后才能观察到各种微细结构。染色方法很多，但是染色剂往往是水溶液，因此切片必须经过脱蜡而再度复水。这方法即为脱水、透明的逆过程。由于切片十分菲薄，处理的时间大大减少，一般每级停留约2～5min。
染色是一个复杂的过程，兼有物理和化学作用，对其中的机制目前了解得不很清楚。研究细胞器和细胞内的重要组分都有很多现成的方法，例如显示DNA的Feulgen反应，显示RNA的Brachet反应，显示多糖的PAS反应，显示蛋白质的Millon反应和显示某些酶的钙—钴法等，可以根据不同的要求来选用。
9．透明
染色后的切片须再次经过脱水、透明。标本经二甲苯透明后，折射率改变，透明度提高，使得染上色的部位更清晰地显示出来。
10．封藏
封藏的目的是使制成的切片能够永久保存，封藏剂必须能与透明剂互溶，对染色无影响，折射率近似玻璃和具有粘性的物质，常用的封藏剂有加拿大树胶和中性树胶。
封片的方法是：将载玻片从二甲苯中吸出后，吸去多余的二甲苯，在标本上的二甲苯尚未干透之前加一滴树胶，仔细覆盖上盖玻片，避免产生气泡，也不得拖动盖玻片，以免将标本破坏。树胶量视盖玻片大小而定，勿使过多过少。
贴上标签，注明材料、染色法，待封藏剂凝固后便成为一张成功的石蜡切片。
1.来源：细胞生物学实验教程王金发何炎明主编科学出版社
特点：除了基本知识以外，给出了切片时出现的问题及解决方法
http://Lifesci.sysu.edu.cn/cms/images/10558_3_e_1.pdf
光学显微标本的制作技术
【实验目的】
了解光学显微镜切片制作技术的基本方法步骤。
【实验原理】
采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构，在自然状态下是无法观察清楚的，多数动、植物材料都必须经过某种处理，将组织分离成单个细胞或薄片，光线才能通过细胞。为了适应这个需要，就产生了光学显微镜制片技术。
光学显微镜的制片技术方法可分为两大类：一类是非切片法，另一类是切片法。
非切片法，是用物理或化学的方法，使细胞彼此分离，如有分离法、涂布法、压碎法等。非切片法的操作比较简单，能保侍细胞的完整，但是细胞之间的正常位置往往被更动，无法反映细胞之间的正常联系。它可以与切片法配合使用，各取其长处。
切片法，是利用锐利的刃具将组织切成极薄的片层，材料须经过一系列特殊的处理，如固定、脱水、包埋、切片、染色等，过程十分繁复。在制作过程中，还要经过一系列的物理和化学的处理，这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。切片法虽然工序繁琐，技术复杂，但是，它最能保持细胞间的正常的相互关系，能较好和较长时间地保留细胞的原貌，所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。
【实验仪器、材料和试剂】
（一）仪器：石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖玻片
（二）材料：洋葱根或小鼠肝
（三）试剂：乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、重铬酸钾、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘油、鸡蛋、纱布、加拿大树胶、麝香草酚
【方法与步骤】
光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒手切片，但是由于组织块往往十分柔软，
18
切削很困难，而且无法得到十分菲薄的切片，因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用，并将整个组织块包住，然后再用精密的切片机制作切片，才能获得良好的效果。这种方法称为包埋法，包埋的物质称为包埋剂。常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等，水和塑料也可作为包埋剂。根据包埋剂的不同，分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等，它们各有长处，可以根据需要选用，但是使用得最多的还是石蜡切片技术。
石蜡作为包埋剂，有其独特的优点，例如：石蜡能切出极薄的蜡片（2～10μm）；切片时能连成蜡带，便于制作连续切片；操作较容易，组织块可以包埋在石蜡中长期保存。然而石蜡切片的制作过程较长，步骤很多，一步不慎往往导致前功尽弃，而且这些处理引起组织块或多或少地收缩，切片时受湿度影响比较大，这些不足之处必须在制片过程中认真对待，尽量减小它的不良影响。
石蜡切片的制作过程主要包括：取材，固定，脱水，透明，透蜡，包埋，切片，贴片，染色，透明，封藏等步骤。
1．取材
材料的好坏直接影响到切片的质量，无论取哪一种动植物材料，以下几点是必须注意的。
（1）植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分；动物材料取用时常对动物施以麻醉，常用的麻醉剂有氯仿和乙醚，或将动物杀死后迅速取出所需要的组织。
（2）取材必须新鲜，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要，应该尽可能割取生活着的组织块，并随即投入固定液。
（3）切取材料时刀要锐利，避免因挤压细胞使其受到损伤。
（4）切取的材料应该小而薄，便于固定剂迅速渗入内部。一般厚度不超过2mm，大小不超过5×5mm2。
2．固定
组织和细胞离开机体后，在一定时间内仍然延续着生命活动，会引起病理变化直至归于死亡。为了使标本能反映它生前的正常状态，必须尽早地用某些化学药品迅速地杀死组织和细胞，阻抑上述变化，并将结构成分转化为不溶性物质，防止某些结构的溶化和消失。这种处理就是固定。除了上述作用外，固定剂会使组织适当硬化以便于随后的处理，还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。
固定剂的作用对象主要是蛋白质，至于其他成分如脂肪和糖，在一般制作时不加考虑，如要观察这些物质，可用特殊的方法将其固定下来。
固定剂的作用表现在对材料体积的改变、硬化的程度、穿透的速度以及对染色的影响等方面。这些作用的好坏、大小，都依所固定的材料性质而定，同样一种固定液对某一材料来说是良好的，但对另外一些组织可能就不很适用。良好的固定剂必须具备的特征是：穿透组织的速度快。，能将细胞中的内含物凝固成不溶解物质，不使组织膨胀或收缩以保持原形，硬化组织的程度适中，增加细胞内含物的折光度，增加媒染和染色能力，具有保存剂作用。固定剂有简单固定剂和混合固定剂的划分。
简单固定剂即单一的固定剂，常用的有乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞、苦味酸、铬酸、重铬酸钾和锇酸。其中，苦味酸、升汞、铬酸既能凝固细胞清蛋白，又能凝固核蛋白；乙醇只能凝固清蛋白，而醋酸只能凝固核蛋白；甲醛、饿酸和重铬酸钾对这两种蛋白质都不凝固。
简单固定剂的局限性较大，如将其适当混合，制成复合固定剂可以取得更好的效果。常用的混合固定剂有：
Bouin液（70份苦味酸饱和水溶液+25份4％甲醛+5份冰醋酸）、Zenker液（升汞5g＋重铬酸钾2.5g＋硫酸钠1.0g＋5ml冰醋酸＋100ml蒸镏水）、Carnoy改良液（3份无水乙醇+1份冰醋酸）等。固定剂的种类甚多，我们必须依据各种固定剂的性能及制片的不同要求来加以选择。19
固定时，须注意以下几点：
（1）固定剂应有足够的量，一般为组织块体积的10～15倍。
（2）如所固定的材料外表有不易穿透的物质，可将材料先在含乙醇的溶液中固定几分钟，再移入水溶性的固定液。
（3）材料固定后如不立即下沉，可将其中气泡抽出。
（4）固定时间依材料大小、固定剂种类而异，可从1小时到几十小时，有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强，作用时间应严加控制，不能过长。
（5）一般固定剂都以新配制的为好，用过的不能再用。有些混合固定剂由甲、乙两液合并者，一定要在使用前才混合。
（6）固定完毕，根据所用固定剂的不同，用水或乙醇冲掉残留的固定剂，以免固定剂形成沉淀，影响以后组织块的染色。
3．脱水
生物组织中含有大量的水分，它和石蜡是不能相溶的，致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部，因此须使用脱水剂将水分除尽，这就是脱水的作用。
脱水剂必须能与水以任何比例相混合。脱水剂有两类：一类是非石蜡溶剂，如乙醇、丙酮等，脱水后必须再经过透明，才能透蜡包埋；另一类是兼石蜡溶剂，如正丁醇，脱水后即可直接透蜡。
常用的脱水剂是乙醇，因为它价格便宜，易于得到。为了避免剧烈的扩散引起的组织的强烈收缩，脱水步骤应从低到高以一定的浓度梯度来进行，一般组织从30％乙醇开始，经过50％、70％、80％、95％、100％至完全脱水；对于一些柔软的组织应从15％开始。脱水时间依据组织的类型和大小而定，一般各级乙醇中放置45min到1h，如果中间须停顿，应使材料停留在70％乙醇中，因为低浓度乙醇易使组织变软、解体，高浓度乙醇有脆化组织作用，放置时间不能过长，另外，脱水必须在有盖瓶中进行，以防止高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不彻底。需要保存的材料可脱水至70%乙醇时停留其中，如需长期保存，可加入等量的甘油。
丙酮也是很好的脱水剂，其作用和用法与乙醇相同，不过其脱水力和收缩力都比乙醇强。
甘油常用于藻类、菌类及柔弱材料的脱水。
二氧六环为无色的石蜡溶剂，对组织没有收缩及硬化等不良后果，但其蒸气有毒，使用时须小心。
正丁醇可与水及乙醇混合，亦为石蜡溶剂，其优点是很少引起组织块的收缩与变脆。
叔丁醇的性质、作用和用法同于正丁醇，但因其价格昂贵而很少使用。
4．透明
组织块用非石蜡溶剂脱水后必须经过透明。透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合，它取代了脱水剂后，石蜡便能顺利地渗入组织。
透明剂的种类很多，较常用的是二甲苯、甲苯、苯、氯仿、香柏油和苯胺油等。
二甲苯作用较快，透明力强，但组织块在其中停留过久，容易收缩变脆变硬，同时若脱水不净，就会引起不良后果，在应用时必须特别小心。通常将组织块先经纯乙醇与二甲苯的等体积混合液，再进入纯二甲苯，这样可减少上述的缺点。透明时间应由组织大小而定，—般各级停留时间在30min至2h，在纯二甲苯中应更换2次，总时间则以不超过3h为宜。材料经过透明，会显示出前一步脱水的效果如何，若脱水彻底，组织则显现透明状态，如组织中有白色云雾状，说明脱水不净，须返工处理，但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明时，应避免其挥发和吸收空气中的水分，并保持其无水状态。20
甲苯的一般性质与二甲苯相似。用法亦同，唯沸点较低，透明较慢，但不会使组织变脆。
苯的用法同于二甲苯，对组织的收缩作用小，但须警惕其爆炸和吸入而引起中毒。氯仿适于大块组织的透明。
5．透蜡和包埋
包埋用的石蜡，熔点在50～60℃之间，应根据材料本身的硬度、切片的厚薄和当时的气温条件来选用。一般动物材料最常用的石蜡熔点为52～56℃，植物材料的用54～58℃的；切片薄的用58～60℃的，切片厚的则用52～54℃的；室温10～19℃时选用52～54℃的石蜡可顺利切片，冬季可用熔点46～48℃的石蜡，夏季可选56～58℃的。
石蜡的优劣与切片的成败密切相关。鉴别石蜡质量的方法是：将石蜡熔化后倒入纸盒使其凝结且无气泡和裂痕，30～35℃放置24h且无气泡和不透明的晶状小点出现，蜡块裂面不呈颗粒状，切成薄片不碎成细粒。这种石蜡即为品质优良。含有杂质的新蜡或用过的废蜡可清洁后再用，方法是将石蜡放入锅内，加热到开始冒白烟，然后用小火继续加热30min（注意别超过发火点），使其去除水分和挥发性杂质，并在温箱中过滤以去除灰尘等颗粒。
透蜡须在恒温箱中进行，恒温箱的温度调节至高于石蜡熔点3度，使经过透明的组织块依次用石蜡与二甲苯的等量混合液、纯石蜡处理。纯石蜡应处理2～3次，透蜡的时间依材料性质而定，一般每次需15～30min。
透明的关键是控制温度的恒定，切忌忽高忽低，温度过低石蜡凝固无法渗透，温度过高使组织收缩发脆。
包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。具体做法是；先准备好纸盒（具体折法见图1-3及说明），将熔蜡倒入盒内，迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部，切面朝下，再轻轻提起纸盒，平放在冷水中，待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中，使其迅速冷却凝固，30min后取出。
包埋用蜡的温度应略高于透蜡温度，保证组织块与周围石蜡完全融为一体。石蜡的迅速冷却也很重要，否则包埋块中将会产生结晶。以后切片时引起碎裂。
6．切片
（1）石蜡块的固着与整修
在包埋以后，就可进行切片。包埋好的石蜡块装上切片机进行切片前还须进行固着和整修。
固着：一般旋转式切片机上都附有可固着石蜡块的金属小盘，这也可用同样大小的台木替代。用加热的蜡铲将包埋块粘贴于固着物上，并使组织块朝外，便于以后迅速切出所需的片子。
整修：用加热的蜡铲或刀片将固着的包埋块四周修平，使上下两面修成平行面，常保留组织周围附着宽2～3mm的石蜡，而修好的蜡块呈长方形。还可削去一角以便于在蜡带上识别切片。
（2）切片机和切片刀
切片机是用来作各种组织切片的一种专门设计的精密机械，常用的是旋转式切片机，它的夹物部分是上下移动前后推进的，而夹刀部分则固定不动。主要部件是安装切片刀的刀台、安装包埋块的标本台和控制切片厚度的微动装置。切片时切片刀固定不动，转动转轮，标本台上下运动并按调好的切片厚度向前推进一定的距离，组织块上下运动一次，便在刀片上得到一张合乎厚度要求的切片。
切片刀与切片的质量直接相关。切片前必须磨刀，方法是：将切片刀装上刀柄、刀背夹、滴少许石蜡油在平滑的磨刀石上，将刀贴着磨刀石以背向刀口方向磨，使用完毕后应及时用二甲苯将石蜡油擦净。
（3）切片方法
切片前，将刀口置放大镜下观察，选择刀口平整无缺刻的部分来进行切削。将所要切的包埋块固定在标本台上，使包埋块外切面与标本夹截面平行，并让包埋块稍露出一截。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋，上好刀片，使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角，包埋块上下边与刀口平行。在微动装置上调节切片要求的厚度，调节时应注意指针不可在两个刻度之间，否则容易损伤切片机，将刀台移至近标本台处，让刀口与组织切面稍稍接触，这时就可以开始切片了。方法是：右手转动转轮，左手持毛笔在刀口稍下端接隹切好的片子，并托住切下的蜡带，待蜡带形成一定长度后，右手停止转动，持另一枝毛笔轻轻将蜡带挑起，平放于衬有黑纸的纸盒内，注意切片速度不宜太快，摇动转轮用力应均匀，防止切片机震动厉害引起切片厚薄不均匀，还应注意转动的方向，以防标本台后移而切不到片子。切片完毕，应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。
（4）切片中存在的问题及补救方法
石蜡切片是很不容易掌握的，有时很容易成功，有时则由于某种因素而造成切片的质量低劣，甚至完全失败。现将切片时经常遇到的一些缺点、可能的原因以及补救办法列于表1-3。
表1-3石蜡切片可能产生的问题和解决方法
缺点：石蜡带弯曲不直
原因：
1．石蜡块上下两边不平行
2．石蜡块的上下两边不和刀口平行
3．刀口锋利不一，局部产生差异
4．蜡块的一边较另一边为软，或两边的硬度不一致
5．材料未居蜡块正中央
6．材料大而形不正
补救办法：
1．取下台木，将两边修干
2．调节标本台，使两者平行
3．移动刀片，改用新的刀口
4．待蜡块冷却后再切，或重新包埋
5．用刀片切去部分石蜡，使材料居中
6．在大的一边切去少许石蜡
缺点：切片分离、不能连成带状
原因：
1．室温过低
2．石蜡过硬
3．材料边缘留蜡太少
4．刀的角度不适合
补救办法：
1．在切片机上方开一电灯或提高室温
2．在蜡块面加一层45℃的软蜡或用手指蜡摩擦块面
3．重新包埋
4．矫正刀的角度
缺点：切片卷起呈圆筒状
原因：
1．室温过低
2．石蜡过硬
3．刀口太钝
4．刀的倾角太大
补救办法：
1．提高室温
2．加软蜡
3用毛笔将蜡片摊开压住，切2—3片即成带
4．减小倾角
缺点：切片粘附于切片刀，皱摺在一起
原因：
1．室温过高
2．石蜡过软
3．刀口上留有一层石蜡
4．刀口钝
补救办法：
1．降低室温
2．将蜡块投入凉水中稍浸耒—增加
3．切片厚度，改用硬蜡包埋，用二甲苯拭去刀口的石蜡
4．磨刀或移动刀口
缺点：切片纵裂
原因：
1．刀有缺口
2．石蜡块中含有颗粒、杂质
3．刀口留有碎屑或细丝
4．组织太硬
补救办法：
1．可移动刀口
2．将颗粒拽去
3．清洁刀口
4．让包埋块在水中浸泡
缺点：切片有横纹
原因：
1．刀和台木的固定螺丝太松
2．刀口倾斜度太大
3．刀口有石蜡屑
补救办法：
1．旋紧螺旋
2．可放平1—2。后再切
3．用氯仿拭去
缺点：切片厚薄不匀
原因：
1．切片机有毛病
2．夹刀不当
3，未旋紧标本台螺旋
4。石蜡块过硬
补救办法：
1．矫正切片机装置
2．对症治疗
3．旋紧螺旋
4．将石蜡块在水中浸泡
缺点：每张切片厚薄不匀
原因：
1．刀口震动，是由于材料过硬
2．刀的倾角太大
补救办法：
1。在蜡块表面涂一层火棉胶
2．减小倾角
缺点：材料发生裂隙破碎或脱落
原因：
1．脱水不干净
2．有透明剂残留
3．石蜡透入时，温度过高或时间过长
4．由于脱水剂和透明剂的影响，使组织变硬发脆
5．材料太硬或太粗
补救办法：
1．无法弥补
2．增加浸蜡时间，重新包埋
3．无法补救
4．用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明
5．在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液
缺点：切片时发生沙沙声
原因：
1．组织块过硬
2．包埋温度过高
3，材料内留有结晶体
补救办法：
1．浸泡水中软化
2．无法补救
3．无法补救
缺点：石蜡块将蜡带抬起
原因：
1．由于摩擦而产生静电荷所致
2．石蜡块上面附有石蜡碎屑
3．刀口上附有石蜡碎屑
补救办法：
1．提高室温
2．用刀片将碎屑清除
3．用二甲苯或氧仿清除
7．贴片
切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理，但是切片常有细小的横纹，必须经展平后才能贴附，否则影响染色和观察。
贴片一般有捞片法和烫板法。
捞片法比较简单，首先将切片分割开，投入到48℃的温水浴中，这时切片都浮在水面上，由于表面张力的作用使切片自然展平，然后用涂有甘油蛋白溶液（将鸡蛋一个打破入杯中，去除蛋黄留下蛋白，用筷子充分调打成雪花状泡沫，然后用双层纱布过滤至容器中，加入等量的甘油，混合，最后加入百分之一体积的麝香草酚（thymol）作防腐用，可保存几个月到一年。）或5％明胶水溶液的载玻片倾斜着插入水面去捞取切片，使切片贴附在载玻片的合适位置，于室温下放置一昼夜后使其彻底干燥。
烫板法，是将涂有粘片剂的载玻片上涂上水，把已分割好的切片贴上去，再置载玻片于35℃恒定的烫板上让切片摊干，并倾斜或用吸水纸吸去水分，最后将载玻片再度放烫板上晾干。
要注意，不管是使用捞片法还是烫板法，所用的载玻片必须洁净，不能有油污（检验法：已涂有粘片剂的载玻片上滴加数滴蒸馏水，若发现水不均匀分散而聚成滴状，即表示载玻片不清洁，有残留油脂等物在上面）；切片的光面应朝下，否则染色过程中切片容易脱落。
8．染色
组织切片是无色透明的，必须进行染色后才能观察到各种微细结构。染色方法很多，但是染色剂往往是水溶液，因此切片必须经过脱蜡而再度复水。这方法即为脱水、透明的逆过程。由于切片十分菲薄，处理的时间大大减少，一般每级停留约2～5min。
染色是一个复杂的过程，兼有物理和化学作用，对其中的机制目前了解得不很清楚。研究细胞器和细胞内的重要组分都有很多现成的方法，例如显示DNA的Feulgen反应，显示RNA的Brachet反应，显示多糖的PAS反应，显示蛋白质的Millon反应和显示某些酶的钙—钴法等，可以根据不同的要求来选用。
9．透明
染色后的切片须再次经过脱水、透明。标本经二甲苯透明后，折射率改变，透明度提高，使得染上色的部位更清晰地显示出来。
10．封藏
封藏的目的是使制成的切片能够永久保存，封藏剂必须能与透明剂互溶，对染色无影响，折射率近似玻璃和具有粘性的物质，常用的封藏剂有加拿大树胶和中性树胶。
封片的方法是：将载玻片从二甲苯中吸出后，吸去多余的二甲苯，在标本上的二甲苯尚未干透之前加一滴树胶，仔细覆盖上盖玻片，避免产生气泡，也不得拖动盖玻片，以免将标本破坏。树胶量视盖玻片大小而定，勿使过多过少。
贴上标签，注明材料、染色法，待封藏剂凝固后便成为一张成功的石蜡切片。
石蜡切片与冰冻切片,傻傻分不清楚~123
Mani-F2016-10-18
如题。实验室只有冰冻切片机，但标本已制成石蜡包埋的标本，问能否用冰冻切片机来切？还是一定得用石蜡切片机切片？
组织包埋的蜡块出现很深的凹陷 动植物 学术 科研...123
xiri2021-07-23
昨天用新买的包埋机包埋的组织块，今天发现石蜡块在表面最凹处有个洞，有的还能看到下面的组织块，不知道这是为什么，请赐教，谢谢！！！
病理科的基本设施123
好友扑鲁182017-09-30
孝感是病理设备的发源地，早在九十年代，孝感就有一家国营单位生产病理设备。从那时候病理设备就已经投放市场了，技术已经很成熟，后来是国营单位改革， 不存在国营单位了，但是技术和相关的人才还在，他们就又各自筹备资金各方面，组建了现在的大大小小的医疗器械公司。
湖北孝感阔海医疗科技有限公司成立与2008年。是一家集科研、生产、经营于一体的高端病理仪器生产企业，公司座落于武汉城市圈、著名的“董永故里”孝感市，2011年，公司新增2万平方米的现代化生产加工基地——“赢海科技工业园”。
目前公司同全国一流的病理专家进行了广泛和卓有成效的合作，数十家国内知名医疗器械专业经销商合作单位在经营和服务我们的产品，有近三十个省市区的近几百家大中型医疗机构正在使用我们的产品，我们坚持以“优越的性能，先进的技术，周到的售后”为理念服务于用户。
阔海医疗科技有限公司拥有一支由博士、硕士、高级工程师及应用专业人才组成的核心技术班底、依托066基地航天企业加工工艺和武汉高校林立的雄厚科技实力，与国内外知名企业和科研院所开展广泛的合作，重点开发出一系列全面替代进口的产品：KH－T生物组织智自动脱水机，KH-B生物组织自动包埋机，KH-P恒温摊烤片机，KH-S生物组织自动染色机，KCT液基细胞超薄自动制片机，液基细胞保存液，KH-Q切片机，KPS-3000多功能真彩病理图像系统及相关病理耗材等。展开
湖北孝感阔海医疗科技有限公司成立与2008年。是一家集科研、生产、经营于一体的高端病理仪器生产企业，公司座落于武汉城市圈、著名的“董永故里”孝感市，2011年，公司新增2万平方米的现代化生产加工基地——“赢海科技工业园”。
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【求助】小鼠脑组织石蜡包埋的具体步骤 免疫学讨论版123
lily_petal_20052006-11-17
大鼠的脑灌注后，要做免疫组化，做石蜡包埋可以吗？石蜡包埋和冰冻切片哪一种更好一些？脑用TUNNEL法测凋亡率，用石蜡包埋可以吗？
石蜡切片法透明透蜡包埋123
pingerlee2021-07-21
我们科室主要做免疫组化的,可是最近我们用的切片石腊老是有问题,切的时候蜡有裂缝,经常断开,褶皱比较多,展片时蜡融的很快,还未等切片展开,蜡就融掉了.
所以在考虑换一种蜡试试,因为几乎每天都要做石蜡切片,所以比较急,可是已经很长时间了也没找到合适的.
做组化的同学及老师们有没有自己用过,而且觉得好用的蜡推荐一下啊?
不甚感激啊!
所以在考虑换一种蜡试试,因为几乎每天都要做石蜡切片,所以比较急,可是已经很长时间了也没找到合适的.
做组化的同学及老师们有没有自己用过,而且觉得好用的蜡推荐一下啊?
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