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Alpha Diagnostic International/Anti-Black Mocassin (Agistron piscovirus) venom antiserum/100 ul/APVS11-S
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在线客服 : :tongpaibio 菌种 菌液的制备:一:取上述培养好的菌种斜面移入接种室或净化工作台,放置室温后, 用接种环取菌苔少许接种置营养肉汤中(10ml/支,已灭菌), 将已接种毕的细菌管置35℃~37℃培养18~24小时,取出备用。一般于冰箱中保存可用两周。二:取上述培养好的营养肉汤菌悬液(浓菌液)1ml,加到9ml 0.9%无菌氯化钠溶液混匀,为10-1,再取另一只刻度吸管吸取10-1菌液1 ml加到9ml 0.9% 查看更多>
盘古基因生物工程(南京)股份有限公司在发布的MT冻干粉供应信息,浏览与MT冻干粉相关的产品或在搜索更多与MT冻干粉相关的内容。 查看更多>
其他 SouthernBiotech(SBA)公司建于1982年,致力于为全球免疫研究的科学家提供各种亲和纯化的多克隆和单克隆二抗和其它特异性抗体,其中包括:荧光素和酶标记物,低内毒... 查看更多>
上海朗顿生物科技有限公司在发布的乙醇脱氢酶,冻干粉供应信息,浏览与乙醇脱氢酶,冻干粉相关的产品或在搜索更多与乙醇脱氢酶,冻干粉相关的内容。 查看更多>
【背景资料】:猪血清白蛋白(Porcine Serum Albumin)是猪血清中的一种球蛋白,也是血清的主要成分。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、... 查看更多>
免疫组化中的血清封闭原理封闭血清没有也不应该和样品发生反应,应该是说,血清把没有包被 (coating)到的地方通通填满,以防止一抗乱吸附,所以封闭可以用二抗同物种血清,也可用 BSA 或 Gelatin,就是不能使用一抗同物种血清,因为里面含有同物种抗体,肯定会被二抗辨识。先加一抗后再封闭的话,一抗就会结合到固相表面上,这种结合力是非特异性的疏水作用力,这种作用力是比较强的,经过处理的固相表面如硝酸纤维膜,酶标板对蛋白的吸附力更强,你 查看更多>
上海瑞楚生物科技有限公司在发布的实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg供应信息,浏览与实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg相关的产品或在搜索更多与实验试剂 卡介苗免疫佐剂 结核杆菌冻干粉 卡介苗佐剂 50mg相关的内容。 查看更多>
上海微生物检测有限公司在发布的阳性尿液冻干粉供应信息,浏览与阳性尿液冻干粉相关的产品或在搜索更多与阳性尿液冻干粉相关的内容。 查看更多>
2021-08-20
北京华夏远洋科技有限公司在发布的PCR-TO-GEL MASTERMix 冻干粉供应信息,浏览与PCR-TO-GEL MASTERMix 冻干粉相关的产品或在搜索更多与PCR-TO-GEL MASTERMix 冻干粉相关的内容。 查看更多>
2021-09-15
2014-12-15 · 常见的封闭剂包括脱脂奶粉、牛血清白蛋白BSA、动物血清和Fab片段单链二抗。因为奶粉中可能存在天然的生物素、碱性磷酸酶,不适合用于磷酸化蛋白检测的封闭以及使用生物素和碱性磷酸酶系统的检测实验。另外,脱脂奶粉中可能含有牛IgG,能够与抗牛、山羊、绵羊、马等二抗有较强的交叉反应 ... 查看更多>
Separopore蛋白A交联琼脂糖凝胶4B-CL(冻干粉)ProteinA-Separopore(Agarose)4B-CL(Lyophilized)(20181028-1)是由苏州达麦迪生物医学科技有限公司代理或销售的Separopore品牌的试剂,产品来源于美国。苏州达麦迪生物医学科技有限公司是中国最权威的Separopore蛋白A交联琼脂糖凝胶4B-CL(冻干粉)ProteinA-Separopore(Agarose)4B-CL(Lyophilized)(20181028- 查看更多>
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我们做的是:5%猪血清(顺便说一下,有时是不可以用牛血清封闭的,比如用bsa免疫的动物血清的检测)in PBST,37度一个小时即可。实验室整个就是这样做的,没有出现什么问题。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。
1、一般来说二抗来源 goat 和donkey 较多,rb用的少。
2、对的,封闭血清一般建议与二抗来源一致。
可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042,
血清封闭:组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。
估计是膜没封闭好,或者是多抗稀释倍数太低
细胞免疫荧光的详细操作步骤1,取出细胞爬片放到35mm或60mm用过的细胞培养皿里,PBS洗三遍。注意有的时候作的细胞爬片可能比较小,因此夹取的时候要小心。2,4%多聚甲醛固定20分钟,PBS洗三遍。3,0.2%TritonX100通透10分钟,PBS洗三遍。4,与二抗相同宿主的血清封闭30分钟,PBS洗三遍。5.,一抗4度湿盒内过夜,也可37度2小时,感觉前者效果好,PBS洗三遍。6,二抗室温2小时,或者37度1半小时,PBS洗三遍。7,最好用DAPI染核,然后直接照荧光片。8,蒸馏水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周。
封闭是血清与非特异性位点结合,以消除非特异性染色,提高目的蛋白的准确性和降低背景。并非所有的免疫组化都由山羊血清封闭,因为一般二抗是羊抗X,所以采用山羊血清,其与使用二抗来源有关。
这个就看你的技术实力了.有些商品化的产品保质期9个月.实验最长可以放一年.那个应该是加了一些稳定剂的.
如果你自己用,所用的配方什么的都是书本上的,而且封闭后将孔封好,估计可以放上一个月左右.
并且不同的方法,包被的蛋白不一样,稳定性也不一样.抗体相对来说会更稳定些.如果是一些虽的蛋白,那就难说,一个月都不一定
一抗孵育时间 搜索123
椃棜L2018-02-10
1.漂洗血清蛋白H7.2-7.4 37度 PBS 2小时.

2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟

3.PBS洗净:3min*3

4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS

5.PBS洗净:2*5min

6.羊血清封闭:37度,20分钟

7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时

8.4度 PBS洗净,3min*5次

9.二抗 37度小于一小时
1、问:用免疫荧光方法做组织切片和培养细胞内的蛋白,两者操作过程有哪些不同?
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗(CHI抗体)同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可,还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的,为避免荧光分解,分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液,后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色,如果是用过氧化物酶做标记,就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用,目的是使DNA变性,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号,阴性对照组也没有荧光,但是拿到荧光显微镜下看,我的阴性对照组一片绿,像非特异性染色,到底哪个结果才是真实的呢?

参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多,出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题,如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因,荧光显微镜没有问题,那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
如果是单标兔抗羊跟驴抗羊无所谓,只是注意封闭血清跟二抗来源相同就行。但如果是双标,就要考虑到二抗种属问题了
做封闭的时候是不应该加AB型血清的。做封闭的目的就是用非特异性的抗体和蛋白质结合掉细胞上那些可以和抗体非特异性结合的位点。
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体,所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体,所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。
不可以。透膜也好,酶消化也好,抗原热修复也好,消除内源性过氧化物酶和内源性生物素也好,都要在血清封闭之前,如果你忘记了前面的步骤,可以洗去封闭液,补上必须的程序,再封闭,不洗,吸干封闭液直接加一抗。
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