Specifications
- IHC
- IHC-Paraffin(16µg/ml)
- Westernblot
- Applicationstestedforthebaseformofthisproductonly
PerformingIHC?SeeourcompletelineofImmunohistochemistryReagentsincludingantigenretrievalsolutions,blockingagentsABCDetectionKitsandpolymers,biotinylatedsecondaryantibodies,substratesandmore. |
LifespanBiosciences公司是分子病理学行业的领头军,销售抗体、免疫组化服务以及蛋白质定位数据库。1995年创立的LifeSpanBiosciences已开发了针对药物标靶主要种类的专有抗体,用以研究这些蛋白质在人正常和患病组织中的表达。LifeSpanBiosciences在高通量成像和癌症鉴别软件产品中也处于领先地位,正在开发用于在在临诊前期毒理学和癌症诊断方面进行病理学解读的仪器和软件。
关于LifeSpanBioSciences,Inc.(LSBIo)LifeSpanBioSciences为全球研究人员提供高质量的抗体,蛋白质,生化试剂,ELISA和化验试剂盒,免疫组化数据和服务。由Drs。于1995年创立。约瑟夫·布朗和格兰纳·伯默(LSG)成立于LSBio,是一家分子病理学公司,致力于IHC在人体疾病组织中的蛋白质定位。通过执行数千项IHC研究以及生成和测试成千上万种抗体获得的经验,LSBio已成为抗体行业的世界领导者,并以卓越的声誉而著称。 LSBio拥有针对20,000个靶标的550,000单克隆和多克隆抗体目录。抗体可用于大多数物种和所有主要研究应用,例如免疫印迹,IHC,免疫荧光和荧光激活的细胞分选。通过广泛的正在进行的内部测试,这些抗体中的14,000多种也被鉴定为特殊的IHC试剂,并获得了IHC-plus™品牌。 LSBio还提供30,000种高质量的免疫测定,包括夹心ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒,竞争性EIA(酶免疫测定)试剂盒以及基于细胞和DNA结合的试剂盒。 LSBio还提供45,000种天然蛋白提取物以及经过工程改造的重组蛋白,其形式为细胞裂解液或高度纯化的试剂。 最近,LSBio发布了他们不断增长的化验试剂盒和生化试剂系列,旨在补充研究社区的其他产品线。 十多年来,研究人员一直依靠LSBio的专业知识来满足其分子病理学外包需求。LSBio的服务包括:抗体生产和鉴定,定制的IHC研究(由庞大的档案人类组织库支持)以及组织交叉反应性筛选。 LSBio坚持其产品和服务的质量,并提供无与伦比的客户服务和支持。在未来的几年中,LSBio计划继续扩大其高质量蛋白质组学产品的目录,为客户提供出色的试剂,服务和支持,以加速他们的研究。
免疫组织化学服务与LifeSpan合作设计定制的免疫组织化学,以解决您的特定生物学问题。将整个定位过程外包,而不必担心寻找和表征靶标特异性抗体,寻找和鉴定难以发现的组织,并具有解释与复杂的人类病理学有关的免疫染色的能力。TCR筛选服务在免疫组织化学中针对大量正常的冷冻人类组织类型测试您的治疗性抗体,以确定潜在的意外结合。我们的非GLPTCR服务是根据FDA的建议设计的,该建议在其“用于人类的单克隆抗体产品的生产和测试要考虑的要点”中概述。免疫组织化学验证抗体的领导者新冠肺炎LSBio提供了许多与冠状病毒有关的产品,包括抗体,蛋白质,检测试剂盒和可表达的ORF克隆。SARS-CoV-2/COVID-19冠状病毒检测冠状病毒和COVID-19抑制剂冠状病毒蛋白质组学细胞因子释放综合征一般冠状病毒信息抗体我们收集了针对大多数靶蛋白的565,268单克隆和多克隆抗体。它们涵盖了所有主要的研究物种,应用,并且有多种共轭形式。我们的IHC-plus™抗体非常适合用于FFPE人体组织免疫组织化学。所有抗体Path- Plus ™癌症病理抗体Path- Plus ™神经抗体原发性抗体Path- Plus ™癌症抗体二抗IHC- Plus ™抗体同型对照ELISA和测定试剂盒我们的传统三明治,竞争性EIA和直接ELISA试剂盒提供了一种定量测量数千个目标靶标的方法,而我们的基于细胞和DNA结合的ELISA试剂盒是进行体外研究和转录因子分析的理想选择。化学发光CLIA试剂盒可对低拷贝靶标进行高灵敏度检测,我们的开发试剂盒使研究人员能够经济高效地进行大量测定。我们不断增加的化验试剂盒集合为研究人员提供了监测多种生物过程的方法,例如细胞凋亡,细胞增殖,新陈代谢等。所有套件检测试剂盒传统ELISA试剂盒基于细胞的ELISA试剂盒磷酸特异性ELISA试剂盒DNA结合ELISA试剂盒ELISA开发试剂盒化学发光CLIA试剂盒蛋白质类蛋白质可用于各种各样的应用中,例如用于功能测定的开发,小分子筛选,原位受体活化或仅用作WesternBlot的对照。我们提供提取的天然蛋白和重组蛋白,其形式为细胞裂解物,或者从细菌或哺乳动物表达系统中纯化。许多蛋白质具有生物活性并经过认证的低内毒素。所有蛋白质重组蛋白天然蛋白质过表达裂解物生物活性蛋白无动物蛋白合成肽细胞和组织产品LSBio提供广泛的细胞和组织产品,包括FFPE组织切片,面板和阵列,第一链CDNA,基因组DNA,总RNA,细胞和组织裂解物,以及各种相关的测定试剂盒。所有细胞和组织产品组织切片和阵列细胞和组织裂解液RNA和DNA提取物分子生物学LSBio提供了超过13,000个cDNA的广泛选择,每个cDNA均可在克隆载体或十四种不同的即用型表达载体之一中获得。cDNA/ORF克隆是研究蛋白质功能和基因表达的基础。经过验证的表达就绪ORF克隆为研究人员提供了直接启动蛋白质分析和表达研究的选择,而无需花费宝贵的时间进行RNA分离,cDNA合成,框内克隆和测序。所有分子生物学产品cDNA克隆表达就绪的ORF克隆免疫组化试剂LSBio提供设计和执行定制免疫组织化学实验所需的所有组件,从抗原回收到盖玻片。用于AP或HRP底物开发的高质量,值得信赖的品牌封闭剂,检测柱和Avidin-Biotin系统。使用我们的鼠标鼠标和多路检测系统,轻松完成具有挑战性的项目。所有IHC试剂抗原提取封闭剂检测聚合物ABC检测试剂盒基材特别/柜台污渍安装介质免疫组织化学数据和服务在过去的20年中,我们进行了1000项自定义IHC研究。我们的病理学家团队在设计有效的IHC研究和解释与正常和疾病过程相关的结果方面经验丰富。这些服务得到了我们庞大的组织库的支持,该组织库几乎包含每种组织类型和疾病。定制免疫组织化学研究组织交叉反应筛选免疫组织化学报告IHC-plus™抗体关于我们的组织银行生化产品特色产品类别包括激动剂,拮抗剂,抑制剂和调节剂,可满足您的生物医学研究需求。高质量的产品可用于癌症研究,心血管疾病,细胞生物学,脂质研究,免疫学,新陈代谢,神经科学,氧化损伤和毒理学。所有生化试剂
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2、对的,封闭血清一般建议与二抗来源一致。
血清封闭:组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。
如果你自己用,所用的配方什么的都是书本上的,而且封闭后将孔封好,估计可以放上一个月左右.
并且不同的方法,包被的蛋白不一样,稳定性也不一样.抗体相对来说会更稳定些.如果是一些虽的蛋白,那就难说,一个月都不一定
2.-20度甲醇固定20分钟后,自然、干燥 10分钟
3.PBS洗净:3min*3
4.1%Triton:25min-30min.配成50ultriton+5mlpBS
5.PBS洗净:2*5min
6.羊血清封闭:37度,20分钟
7.一抗,4度过夜,一般要大于18小时或者37度 1-2小时
8.4度 PBS洗净,3min*5次
9.二抗 37度小于一小时
参考见解:只是固定方法不同。细胞固定用甲醇,切片固定用多聚甲醛,而染色方法是一样的。
2、问:近期要做免疫荧光双标,不知哪位有免疫荧光双标技术的详细步骤及其注意事项?
参考见解:我正在做冰冻组织切片的免疫荧光双染。我的经验是:
(1)选取一抗时要来源于两种不同的动物,我用的是来源于rabbit和rat的抗体,二抗则是不同荧光信号标记的,我用的是donkey anti-rabbit-FITC(绿)和donkey anti-rat-Tex-Red(红)。
(2)我的做法是两种一抗(CHI抗体)同时孵育,然后两种二抗同时孵育。抗体浓度、孵育时间要仔细摸索,我感觉一抗4度孵育过夜比较好,背景比较清晰。
(3)我的阳性对照用的是阳性组织切片,阴性对照则分别是家兔和大鼠的IgG,荧光标记物对照是PBS+荧光标记物。
(4)封闭血清与二抗来源动物一致,我用的是10%的正常donkey血清。
(5)其余步骤同一般免疫荧光单标操作。
3、问:本人拟做Brdu标记神经干细胞免疫荧光,二抗为FITC标记,想请教各位大侠:
(1)抗体分装和荧光显微镜观察时是否一定要在暗室中进行?
(2)封片时是否用甘油缓冲液即可,还是用甘油和0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液等量混合封片?
(3)免疫酶染色中的3%过氧化氢及2N盐酸是否还需要用?
参考见解:
(1)你的二抗是用FITC标记的,为避免荧光分解,分装及荧光显微镜观察时均要避光;
(2)封片最好用甘油加0.5mmol/L pH9.0-9.5的碳酸氢盐缓冲液,后者能使玻片透明;
(3)关于免疫酶染色,如果是用过氧化物酶做标记,就必须用3%H2O2以去除内源性过氧化物酶;2N盐酸需要使用,目的是使DNA变性,让Brdu抗体能够充分地与已经掺入的Brdu结合。
4、问:做间接法免疫荧光染色,如何设置对照?
参考见解:最好是同一视野在未用荧光激发下进行对照,看是否非特异性染色。
(1)空白对照:如果你做的是石蜡切片免疫组化,这个对照必须有,目的是看自发荧光,脱蜡后直接在荧光显微镜下观察。
(2)阴性对照:标本直接滴加二抗,呈阴性反应。
(3)抗原对照:标本加同种动物的未免疫血清,以PBS冲洗后,在加抗免疫球蛋白荧光抗体。因未免疫动物的血清中无特异性抗体,应呈阴性反应。
5、问:我做乳腺组织的免疫荧光染色,结果用激光共聚焦显微镜看很好:有阳性信号,阴性对照组也没有荧光,但是拿到荧光显微镜下看,我的阴性对照组一片绿,像非特异性染色,到底哪个结果才是真实的呢?
参考见解:激光共聚焦显微镜的分辨率比普通荧光显微镜要高的多,出现上述现象首先要排除荧光显微镜的问题,如是不是紫外灯泡寿命到期了或者别的原因,荧光显微镜没有问题,那就以共聚焦显微镜的结果为主。展开
血清的目的就是因为含有白蛋白和抗体,所以一举两得。不过不应该用AB型。这是人的血清。流式检测一般都是使用小鼠单克隆抗体,所以封闭的血清也应该是用种的小鼠血清。
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