Human CD18 (beta integrin) forms a heterodimer with either alpha L, alpha M, or alpha X integrins (CD11a, b or c). CD11/CD18 heterodimeric molecules are involved with cell/cell and cell/extracellular adhesion in immune and inflammatory responses.
Isotype: Murine IgG2a
Immunogen: Human peripheral blood monocytes
Specificity: Antibody IB4 recognizes the beta 2 integrin subunit (CD18) adhesion molecule of about 95 kd (1, 6).
Functional Application: Antibody IB4 blocks binding of ICAM-1 and ICAM-3 to LFA-1 (2, 5).
References:
1. S.D. Wright, et al, (1983) Proc Natl Acad Sci USA 80: 5699-5703.
2. R.C. Landis, et al, (1994) J Cell Biol 126: 529-537.
3. M. Kaneko, et al, (1995) J Immunol 155: 2631-2641.
4. A. Mazzone & G. Ricevuti, (1995) Haematologica 80: 161-175.
5. M.E. Berman, et al, (1996) J Immunol 156: 1515-1524.
6. K Welzenbach, G Weitz-Scmidt, et al (2002) J Biol Chem 277(12): 10590 - 10598. PMID: 11781316
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一般可与大鼠、小鼠、人、兔均有交叉反应,即可作为上述任一来源蛋白的内参。
Actin分子量为42kD,为肌动蛋白
GAPDH分子量为36kD,为磷酸脱氢酶
虽然没有具体用过检测这个抗原的抗体,但是如果希望抗体特异性好点,能检测丰度低的蛋白,还是选Abcam吧,Santa有时候全凭人品了,内参抗体什么的还能凑活,其他的比较勉强。
当然跟物种有关。
内参抗体:
Beta-Actin mAb (1C7) 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01010 小鼠源单克隆
Beta-Actin mAb (1C7) , HRP 细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01015 小鼠源单克隆,HRP偶联
GAPDH mAb (2B5) 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01020 小鼠源单克隆
GAPDH mAb (2B5) , HRP 细胞总蛋白 36 kD Abbkine A01025 小鼠源单克隆,HRP偶联
Beta-Tubuline mAb (3G6) 细胞总蛋白 55 kD Abbkine A01030 小鼠源单克隆
Plant Actin mAb (3T3) 植物细胞总蛋白 42 kD Abbkine A01050 小鼠源单克隆
PCNA mAb (1D7) 细胞核蛋白 28 kD Abbkine A01040 小鼠源单克隆
COX IV mAb (14Y2) 细胞线粒体总蛋白 16 kD Abbkine A01060 小鼠源单克隆
Histone H3 mAb (2D10) 细胞核蛋白 18 kD Abbkine A01070 小鼠源单克隆
标签抗体(Tag Antibody)可用于检测各种商品化表达载体上的标签序列(如:Myc、Flag、His、GST、HA等),籍以分析目的蛋白的表达含量及其功能;
标签抗体:
Anti-Biotin Antibodies
Anti-Dye Antibodies
Anti-FITC Antibodies
Anti-Fluorescent Protein Antibodies
Anti-HRP Antibodies
Beta Galatosidase Antibodies
FLAG Tag Antibodies
GST Tag Antibodies
HA Tag Antibodies
His Tag Antibodies
Myc Tag Antibodies
TAP Tag Antibodies
V5 Tag Antibodies
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我觉得封闭这一步时间长短多少并不能减少背景…背景过深多半还是抗体浓度过大…不管一抗还是二抗过大都会使背景加深…一抗的浓度不一定是条带清晰就是最佳了…联系进一步优化一下
这个主要还是抗体的问题,WB最主要的还是要选择一个特异性较好的抗体,抗体是整个实验的重中之重
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