AboutInVivoPlushumanIgG2isotypecontrol
ThehumanIgG2isotypecontrolantibodyispurifiedfromhumanmyelomaserumandisofunknownspecificity.Thisantibodyissuitableforuseasanon-targetingisotypecontrolinvariousinvitroandinvivostudies.ItcanalsobeusedasanegativecontrolinvariousdiagnosticapplicationssuchasELISA,Westernblot,immunofluorescence,immunohistochemistry,immunoprecipitation,andflowcytometry.Forresearchuseonly.
InVivoPlushumanIgG2isotypecontrolSpecifications
Isotype | HumanIgG2,λ |
RecommendedInVivoPureDilutionBuffer | InVivoPurepH7.0DilutionBuffer(IP0070) |
Endotoxin |
|
Purity |
|
Aggregation |
|
Formulation |
|
Sterility | 0.2μMfiltered |
Production | Purifiedfromhumanmyelomaserum |
Purification | ProteinA |
Storage | Theantibodysolutionshouldbestoredatthestockconcentrationat4°C.Donotfreeze. |
HumanPathogenTestResults |
|
MurinePathogenTestResults |
|
MolecularWeight | 150kDa |
RRID | AB_2715459 |
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
同型对照(阴性对照)管:A同型+B同型+C同型
单阳性对照
A检测管:A+B同型+C同型
B检测管:B+A同型+C同型
C检测管:C+A同型+B同型
不存在荧光重叠的两个抗体不需要调节补偿。
样本为PBMC,想用三色标记Treg细胞,分别为CD4-PECY,CD25-Fitc,Foxp3-PE,想知道如何设置荧光补偿,用的是BD的流式仪,1、是设置阴性管一个,单阳性管每种一个,样品管一个么?
荧光素强度依次为PE, PECY5 APC FITC, PE最强,FITC最弱。 所以,建议抗体组合为:
Foxp3-PE,CD4-FITC,CD25-PECy5.5或者CD25-APC。
同时购买三个相应的同型对照抗体。
样品管设置如下:
1. cell + FITC-isotype + Pecy5.5( or APC)-isotype + PE-isotype
2. Cell + FITC-isotype + CD25-mAb + PE-isotype
3. Cell + PE-mAb + FITC-isotype + Pecy5.5( or APC)-isotype
4. Cell + CD4-FITC + Foxp3-PE + CD25 -PECy5.5( or APC)。 [这一管的数据可以拿来分析用]。
在充分了解调整电压和补偿原理的基础上,也可以做一些简化。如果不太懂,就按照这个来。其中Foxp3的抗体和同型对照抗体都是在固定破膜以后再加,不是与CD4或者CD25同时加。
英 ['aɪsətaɪp]美 ['aɪsəˌtaɪp]
n. 同型动物(或植物),图形文字,象征性图像;同位型;同模;同号模式
选用和特异性抗体同种亚型的,同样荧光素标记的抗体,采用同样的染色步骤染同样浓度的细胞。然后上机检测。如果细胞有非特异性的结合,那同型对照的荧光强度可能会比未染色的阴性对照要高一些。
同型对照只用于那种阳性和阴性之间没有明确分解的情况。如果阳性细胞群非常清楚,是不需要同型对照的。另外,在多色同染的情况下,也不采用同型对照,而是采用FMO(fluorensence minus one)对照。
另外,对于同型对照的使用,也有很多反对意见。就算是同型抗体,也可能会有不同的亲和力,并不一定就能真实反应非特异性的结合。
暂无品牌问答