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RayBiotech/Human NANOG Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-NANOG-1
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RayBiotech/Human NANOG Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-NANOG-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
TFEH-NANOG-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616

Antigen Information

Accession Number:
  • Q9H9S0
Gene ID:
  • 79923
Gene Symbols:
  • NANOG
Protein Name & Synonyms:
Homeobox protein NANOG, Homeobox transcription factor Nanog (hNanog)
Target Species:
  • Human

Assay Format

Specificity:
The olionucleotide/antibody pair provided in this kit recognizes human NANOG in whole lysates and nuclear extracts.
Number of Targets Detected:
1
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Lysates
  • Nuclear Extracts
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Colorimetric
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Semi-Quantitative
Solid Support:
96-well Microplate

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Strip Microplate Kit

Introduction

Homeobox-containing transcription factor NANOG is essential in maintaining the pluripotent cells of the inner cell mass and in the derivation of embryonic stem cells (ESCs). Overexpression of NANOG is capable of maintaining the pluripotency and self-renewing characteristics of ESCs under what normally would be differentiation-inducing culture conditions. Concomitant with this essential function in pluripotent cell maintenance, expression of NANOG has restricted patterning in the inner cells of the morula, blastocyst, and epiblast during different developmental processes. Additionally, NANOG acts as a molecular gatekeeper to suppress or ensure differentiation in response to events in fluctuating environments and the presence of stimuli. NANOG has a single homeodomain that binds to DNA through the consensus sequence TAATGG. Coordinating with OCT4 and SOX2, NANOG regulates a large cohort of genes involved in pluripotency and development in later stages.

Product Features

  • Specific transcription factor-DNA binding assay
  • Perfect alternative to EMSA
  • Easy to perform in an ELISA format
  • Non-radioactive assay
  • High throughput (96-well plate format)
  • Assay can be completed within 5 hours

Application Notes

Kit Components
  • 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
  • DNA Binding Buffer
  • Positive Control Sample
  • Specific Competitor DNA probe
  • Non-specific Competitor DNA probe
  • Assay Reagent
  • DTT
  • Wash Buffer
  • Primary Antibody
  • HRP-conjugated Secondary Antibody
  • Antibody Diluent Buffer
  • TMB One-Step Substrate Reagent
  • Stop Solution
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Tubes to prepare sample dilutions
  • Absorbent paper
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • < li="">
  • Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
  2. Add 100 µl of sample or positive control to each well.
  3. Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
  4. Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
  5. Incubate 1 h at RT.
  6. Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
  7. Incubate 1 h at RT.
  8. Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
  9. Incubate 30 min at RT.
  10. Add 50 µl of Stop Solution to each well.
  11. Read at 450 nm immediately.

Typical Data

Figure 1Transcription factor activity assay of Nanog from nuclear extracts of P19 cells with the RayBio® Nanog TF-Activity Assay Kit.

Figure 2Transcription factor activity assay of Nanog from nuclear extracts of P19 cells with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of Nanog to the conserved DNA binding site.

Storage/Stability

Upon receipt, the positive control should be removed and stored at -20° or -80°C. The remainder of the kit can be stored for up to 6 months at 2-8°C from the date of shipment. Opened Microplate Wells or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge. Note: The kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.

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可以的,只要有相信的抗体,流式细胞仪能够检测到,华雅干细胞有biogems的抗体,满足各种要求
不是所有的流式抗体都适合做免疫荧光的,请查阅你的抗体说明书,看能否用于免疫荧光实验。或者查一下您的流式抗体荧光素的激发波长,是否与你荧光显微镜的激发波长一致,有时候激发波长不一致也不会出现荧光
流式抗体是什么123
桃酱fg2017-12-02
target的意思是对象 也可以值得样本名称
可以一起用的

各位免疫大咖

我想做结肠癌肠道固有层组织中CD11b+免疫细胞,尤其是免疫抑制活性的髓源性抑制细胞(MDSC)和肿瘤相关巨噬细胞(TAM)以及M2样肿瘤相关巨噬细胞(M2-likeTAM)

请教各位大侠,MDSC,TAM,M2-likeTAM这三种免疫细胞流式抗体或者标记物是什么?

非常感谢,在线等了



如题,试剂商推荐这家的,然后网上查了一下就是武汉三鹰啊,国产的,有点虚啊?请前辈指点迷津啊

小鼠,脾细胞,抗体。

利用CD3/CD4/IL-17的抗体组合(不同荧光素标记),具体步骤可按照淋巴细胞TH1/2亚型分析的protocol!
一般都是先做CD4的surface staining
然后再做IFN-gamma和IL-17的intrecellular staining
你好,

测流式后不用水洗

不用问为什么?_?
免疫荧光是直接染色还是间接法?我觉得你是想用荧光标记的抗NGF/COX-2抗体来做直接染色,这样的话可以在流式上试试。但是一般免疫荧光是用间接法,这样的话荧光抗体只anti某个种属的抗体(视一抗而定),不是anti NGF或COX-2的,这样就不能用于流式了。
如果一个抗体可以用来“做western blot,免疫荧光,免疫共沉淀,ELISA”,我估计着是HRP或碱性磷酸酶或生物素之类标记的,然后需要再加荧光标记的二抗,这类抗体也是不能做流式用的。
我只用过流式的抗体来做免疫荧光(直接染色),效果还不错,但是反过来就没试过。
楼上两位还是要仔细看下产品说明书
不一定能通用。你师姐用来做流式,是用直接标记,还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。如果你的免疫组化要用其它的标记的话,或者是间接标记的话,就有麻烦,因为荧光素的标记很可能会影响二抗和一抗的结合。
流式看m1/m2比例选什么抗体123
o猫尾控o782021-07-25
有这么几个原则:
尽量使用已经用荧光素标记好的单克隆抗体。
如果是单色实验,荧光素的亮度越强越好,比如标记了APC的抗体就要比标记了pacific blue的在相同抗原量,抗体用量相同的情况下,要亮很多
如果是多色实验,除了不要使用光谱重叠度高的荧光素以外,还要搭配染色指数。简单的说,就是用亮度强的荧光素标记的抗体来染水平低的抗原,而用较弱的荧光素标记的抗体来染高表达的抗原。
不一定能通用。你师姐用来做流式,是用直接标记,还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。如果你的免疫组化要用其它的标记的话,或者是间接标记的话,就有麻烦,因为荧光素的标记很可能会影响二抗和一抗的结合。
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