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StressMarq/StressXpress® Nitric Oxide Detection Kit/SKT-212-96/2-x-96-well
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StressMarq/StressXpress® Nitric Oxide Detection Kit/SKT-212-96/2-x-96-well
品牌 / 
StressMarq
货号 / 
SKT-212-96
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Overview:

ProductNameNitricOxideDetectionKit
Description

Colorimetricdetectionofnitrateandnitrite

SpeciesReactivitySpeciesIndependent
PlatformMicroplate
SampleTypesBuffer,Celllysates,Plasma,Saliva,Serum,TissueCultureMedia,Urine,Water
DetectionMethodColorimetricAssay
AssayTypeIndirectQuantitativeAssay
UtilityColorimetricassayusedtoquantitativelymeasureNitrateandNitritepresentinavarietyofsamples.
Sensitivity2.63µMintheNitriteand1.02µMintheTotalNitricOxide
AssayRange3.125-200µM
PrecisionIntraAssayPrecision:ThreesampleswerefurtherdilutedinAssayBufferandruninreplicatesof20inanassay.ThemeanandprecisionofthecalculatedNitriteorTotalNOconcentrationswere:Sample1(NitriteConcentration)-45.1µM,4.4%CV,Sample1(TotalNOConcentration)-70.5µM,6.8%CVSample2(NitriteConcentration)-73.3µM,9.1%CV,Sample1(TotalNOConcentration)-107.4µM,4.4%CVSample3(NitriteConcentration)-132.7µM,1.3%CV,Sample1(TotalNOConcentration)-157.8µM,1.8%CVInterAssayPrecision:ThreesampleswerefurtherdilutedinAssayBufferandruninduplicatesintwentyassaysrunovermultipledaysbythreeoperators.ThemeanandprecisionofthecalculatedNitriteorTotalNOconcentrationswere:Sample1(NitriteConcentration)-44.1µM,3.1%CV,Sample1(TotalNOConcentration)-68.8µM,7.4%CVSample2(NitriteConcentration)-66.4µM,4.0%CV,Sample1(TotalNOConcentration)-112.1µM,5.7%CVSample3(NitriteConcentration)-126.7µM,6.3%CV,Sample1(TotalNOConcentration)-154.48µM,4.1%CV
IncubationTime30minutes
NumberofSamples88samplesinduplicate
OtherResourcesKitBooklet,MSDS

Properties

StorageTemperature4ºC
ShippingTemperatureBlueIce
ProductTypeDetectionKits
AssayOverviewTheNitricOxideDetectionKitisdesignedtoquantitativelymeasureNitrateandNitritepresentinavarietyofsamples.NitricOxidecontentisderivedfromthesumofNitrate(-NO3)andNitrite(-NO2).BothNitrateandNitritestandardsareprovidedtogeneratestandardcurvesfortheassayandallsamplesshouldbereadofftheappropriatestandardcurve.ForNitritedetection,samplesaremixedwiththeColorReagentsAandBandincubatedatroomtemperaturefor5minutes.Thecoloredproductisreadat550–570nm.TheconcentrationofNitriteinthesampleiscalculated,aftermakingasuitablecorrectionforanydilutionofthesample,usingsoftwareavailablewithmostplatereaders.TotalNitricOxidecontentismeasuredafterthesampleisincubatedwithNitrateReductaseandNADH.ThereductaseincombinationwithNADHreducesNitratetoNitrite.Aftera20minuteincubationatroomtemperature,ColorReagentsAandBareaddedandincubatedatroomtemperaturefor5minutes.ThecoloredproductisreadandcalculatedaswiththeNitritedeterminationabove.TheconcentrationofNitrateinthesampleiscalculatedbysubtractingthemeasuredNitriteconcentrationfromtheTotalNitricOxideconcentrationforthesample.
KitOverview
ComponentNo.ItemQuantity/Size
SKC-212AClear96WellPlates1Each
SKC-212BNitrateStandard200µl
SKC-212CNitriteStandard200µl
SKC-212DAssayBuffer60ml
SKC-212ENADHConcentrate1.2ml
SKC-212FNitrateReductase1Vial
SKC-212GEnzymeStABIlizationBuffer1ml
SKC-212HColorReagentA5ml
SKC-212IColorReagentB5ml
CiteThisProductNitricOxideDetectionKit(StressMarqBiosciencesInc.,VictoriaBCCANADA,Catalog#SKT-212)

BIOLOGicalDescription

AlternativeNamesNitrogenmonoxide;Nitrogen(II)oxideDetectionKit
ResearchAreasCellSignaling,Neuroscience,Post-translationalModifications
ScientificBackgroundNitricoxide(NO)isadiffusIBLe,transient,reactivemoleculethathasphysiologicaleffectsinthepicomolar-to-micromolarrange.Actingthroughsolubleguanylatecyclaseactivation,NOisanimportantphysiologicalregulatorofthecardiovascular,nervous,andimmunologicalsystems(1).NOisbio-availablebytworoutes.ItcanbeendogenouslygeneratedbyconstitutiveorinducedenzymeslikeNitricOxideSynthaseoritcanbeorallyingestedasnitrates/nitritesforrapiduptakeintocirculationandsubsequentconversion(2).Thereactivenatureofnitricoxideallowsittoactasacytotoxicfactorwhenreleasedduringanimmuneresponsebycellssuchasmacrophages.ThereactivityalsoallowsNOtobeeasilyconvertedtoatoxicrADIcalthatcanproducenitrosativedamagetocells,organellesandmoleculessuchasDNA.Nitrosaylationhowevercanbearegulatedpost-translationalmodificationincellsignaling(3).Thebalanceanddynamicsoftheregulatory/damagefacetsofNOaremajorforcesinmitochondrialsignalinganddysfunction(4).NOislinkednotonlytocoronaryheartdisease,endothelialdysfunctions,erectiledysfunction,andneurologicaldisorders,butalsodiabetes,chronicperiodontitis,autism,cancer,andassortedage-relateddiseases(5-9).ThephysicalpropertiesofNitricOxidemakeitchallengingfordirectdetectionmethods.However,colorimetricmethodscanbeappliedtomeasureitsstablebreak-downproductsnitrate(-NO3)andnitrite(-NO2)(10).
References1.Moncada,SandEAHiggs.(1991)Eur.J.Clin.Invest.,21:361-374.
2.Kapil,V.etal.(2010)Heart,96:1703-1709.
3.Seth,DandStamler,JS.(2007)Curr.Opin.Chem.Biol.,15:1-8.
4.Eursalimsky,JDandMoncada,S.(2007)ATVB27:2524-2531.
5.Knott,ABandBossy-Wetzel,E.(2010)Diab.Obes.Metab.12(Suppl2):126-133.
6.VanDyke,K.etal.(2010)Ann.N.Y.Acad.Sci.1203:138-145.
7.Reher,VSG.etal.(2007)J.OralSci.49(4):271-276.
8.Sogut,S.etal.(2003)Clin.Chim.Acta331:111-117.
9.Balam.E.etal.(2002)Jpn.J.Clin.Oncol.32(5):162-166.
10.Moshage,H.(1997)Clin.Chem.43(4):553-556.

ProductImages

<p>Typical Standard Curve for Nitric Oxide Detection Kit StressXpress® – SKT-212. Assay Type: Coupled Enzyme Assay. Detection Method: Colorimetric Assay. Assay Range: 3.125 – 200 uM.</p>

TypicalStandardCurveforNitricOxideDetectionKitStressXpress®–SKT-212.AssayType:CoupledEnzymeAssay.DetectionMethod:ColorimetricAssay.AssayRange:3.125–200uM.

<p>Linearity was determined by taking two human urine samples with known Nitrite and Total Nitric Oxide Concentrations and mixing them in given ratios. The measured concentrations were compared to the expected values based on the ratios used.</p>

LinearitywasdeterminedbytakingtwohumanurinesampleswithknownNitriteandTotalNitricOxideConcentrationsandmixingthemingivenratios.Themeasuredconcentrationswerecomparedtotheexpectedvaluesbasedontheratiosused.

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2018-07-16
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杨先庭(默克密理博北京清大天一) 现代生物技术包括基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程,这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切的关系,特别是在生物医药领域,细胞培养更具有特殊的作用。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多都是通过细胞培养来实现的,基因工程乙肝疫苗大多是以CHO细胞作为载体;基因工程抗体药物的制备也离不开细胞培养。细胞 查看更多>
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如何选择缓冲溶液?_123
sweetwater2021-07-21
做试验的时候用到很多种缓冲液,Tris,triethanolamine,HEPES,还有磷酸缓冲液,不知道这些缓冲液之间有没有大的区别,选择缓冲液的依据是什么?

如果只是为了缓冲酸碱度,是不是可以用一种缓冲液来代替所有其他的?这样做试验就方便多了。谢谢指教
如题:
两个CEX方法A和B测定同一单抗,结果碱性峰比例差不多,酸性峰比例相差约7%,相应主峰也差了7%左右。
具体来说,A方法酸性峰高,主峰低,碱性峰稍微低点;B方法酸性峰低,主峰高,碱性峰稍微高点;另外也做了CIEF,结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来,AB两个方法的峰性和数量差不多,就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液,一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下:
1.两个方法哪个方法更准确,是以酸性峰高的为准还是什么?为什么?
2.这显著差异是由方法造成,具体原因是什么?柱子?
3.CIEF的结果和A方法更接近,是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好(因为CIEF更快更方便)?
欢迎讨论~
纠正下,A方法用的是Tosoh的柱子,B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料,10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少,这次信手用用,结果发现差异很大
那我现在就考虑,在以后方法开发过程中,除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离,还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度,尤其是主峰和邻近峰的分离度,获得最大分离度,自然可以做到主峰尽可能纯,但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧!
另外,CIEF和CEX方法原理还是有点差异的,所以分的是不同的异质体,原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段,哪个方法才是又快又准。CIEF(iCE280)一般15分钟一个样,比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果,是不是真的完全可以取代CEX呢?CEX分离出的峰远比CIEF的多!
欢迎大家继续讨论~
【1】酸碱缓冲溶液:其中的一般酸碱缓冲溶液是指控制溶液酸碱度的溶液.他的作用是在此溶液中,加入少量的强酸或强碱,或者将其稍加稀释时,溶液的ph值基本上保持不变.【2】可以维持溶液酸碱度稳定的原因:主要原因是因为构成一般酸碱缓冲溶液的组分是“一元共轭酸碱”.例如“醋酸-醋酸钠”酸碱缓冲溶液.由PH的计算式:pH = p Ka +log[C酸/C碱] ,可见C酸/C碱的微小改变,其PH值,基本不变.
我按下面方法配制电泳缓冲液
Tris-base15.1g
甘氨酸94g
SDS5g
H2O1000ml
听人说就这样配制,PH值就会在8.3左右,都不要怎么调PH的,但不知我这样配制后PH值在6.4左右?迷惑,配制了几次还是这样。本人初次做sds-page,请前辈们指教。
另外Tris是以前师兄留下的,几年了已经,SDS也是以前的,但是没有开封,密封的很好。甘氨酸是新买进口封装的。会不会试剂过期的原因?
求助:我目前需用离子交换法进行蛋白质的分离和纯化,但是我不知道要纯化的蛋白质的等电点,怎么样选择柱料及洗脱缓冲液呢?如果必须知道,有没有什么简便的方法测定蛋白质的等电点呢?谢谢
药典上说取本品10ml,加甲基红指示液(变色范围ph4.2-6.3,红~黄)2滴不得显红色;加溴麝香草酚蓝(变色范围ph6.0-7.6,黄~蓝)5滴不得显蓝色。
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6?能否直接用pH计测量?谢谢!
磷酸钠缓冲液的配制方法 123
高展远瞩2014-10-12
看了GE公司的NiSephrose6FastFlow说明书,说bindingbuffer建议20mMsodiumphosphate,0.5MNaCl,pH7.4,elutingbuffer中是在bindingbuffer中加了高浓度的咪唑,我想问一下,这个怎么配制啊?那个sodiumphosphate是什么?磷酸钠溶液?貌似不具有缓冲性,磷酸钠缓冲液?有可能,但是这个咋配啊?有我能想到的三个配制方法,想求助一下;
1.直接用固体磷酸钠配制成50mM的磷酸钠溶液,再调pH到7.4;(我们试着用这个做了下,发现挂不上柱)
2.配置磷酸钠盐缓冲液:按NaH2PO4:Na2HPO4以19:81的摩尔比配制成pH7.4的缓冲液?(附一张百度出来的配方


3.如果是磷酸钠盐缓冲液,可以直接将50mM的NaH2PO4的水溶液用NaOH调成pH7.4吗?
再者,2和3这两个方法配制的磷酸钠盐缓冲液有什么区别?最终效果是一样的吗?如果不一样,有什么理论的知识支撑呢?个人感觉是分析化学中酸碱理论中的缓冲液那里的知识。求帮忙解答这些疑问。
另外,我还想问一下,pH对于Ni柱对His-tagged的蛋白的分离纯化影响大吗?是怎么影响的?谢谢大家了!
我们常用的色谱柱的PH耐受大概是PH(2-9),最近摸条件,但是pH计坏了,想调一下流动相的PH,苦于PH试纸的不精确性,特此求助:

常用流动相加酸碱后PH的总结,希望大家能够提供一点自己测过的结果,谢谢先
缓冲溶液是含共轭酸碱对的,其中共轭酸与共轭碱都必须是弱酸或弱碱,这样才能组成缓冲液。因为邻苯二甲酸是弱酸,氨是弱碱,并且它们的同浓度的电离度相似,所以组成的缓冲溶液缓冲能力强。
相关疾病:高钾血症碱中毒代谢性酸中毒输入库存血,钾离子大量释放入血,会导致高钾血症,同时容易伴发代谢性碱中毒,查了相关资料解释说:大量输...
缓冲物质更重要。
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。
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