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StressMarq/StressXpress® Glutathione Detection Kit/SKT-202-96/96-well
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StressMarq/StressXpress® Glutathione Detection Kit/SKT-202-96/96-well
品牌 / 
StressMarq
货号 / 
SKT-202-96
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4000-520-616

Overview:

ProductNameGlutathioneDetectionKit
Description

FluorescentdetectionoftotalGSHcontent

SpeciesReactivitySpeciesIndependent
PlatformMicroplate
SampleTypesCelllysates,EDTAPlasma,Erythrocytes,HeparinPlasma,Serum,Tissue,Urine,WholeBlood
DetectionMethodFluorometricAssay
AssayTypeDirectQuantitativeAssay
UtilityFluorometricdetectionassaytomeasurethetotalGSHcontentinsamples.
Sensitivity45nMintheFreeGSHand48nMintheTotalGSH
AssayRange0.195-25uM
PrecisionIntraAssayPrecision:TwoeachofSSAtreatedhumanurineandwholebloodsampleswerefurtherdilutedin1%SSASampleDiluentandruninreplicatesof20inanassay.ThemeanandprecisionofthecalculatedGSHconcentrationswere:Sample1(Free)-1.27µM,4.0%CV,Sample1(Total)-2.30µM,4.7%CVSample2(Free)-2.00µM,3.1%CV,Sample2(Total)-3.80µM,4.7%CVSample3(Free)-8.33µM,4.6%CV,Sample3(Total)-9.77µM,2.7%CVSample4(Free)-3.89µM,3.0%CV,Sample4(Total)-4.45µM,2.3%CVInterAssayPrecision:TwoeachofSSAtreatedhumanurineandbloodsampleswerefurtherdilutedin1%SSASampleDiluentandruninduplicatesintwentyassaysrunovermultipledaysbytwooperators.ThemeanandprecisionofthecalculatedGSHconcentrationswere:Sample1(Free)-1.30µM,8.6%CV,Sample1(Total)-2.40µM,9.3%CVSample2(Free)-1.83µM,14.7%CV,Sample2(Total)-3.57µM,10.0%CVSample3(Free)-9.38µM,6.0%CV,Sample3(Total)-11.67µM,6.0%CVSample4(Free)-4.89µM,7.2%CV,Sample4(Total)-5.89µM,8.0%CV
NumberofSamples39samplesinduplicate
OtherResourcesKitBooklet,MSDS

Properties

StorageTemperature4ºC
ShippingTemperatureBlueIce
ProductTypeDetectionKits
AssayOverviewTheGlutathioneFluorescentDetectionkitisdesignedtoquantitativelymeasureglutathione(GSH),andoxidizedglutathione(GSSG)presentinavarietyofsamples.Thekitisuniqueinthatbothfreeandoxidizedglutathionearedetectedinthesamewellinthemicrotiterplate.Noseparationorwashingisrequired.TotalglutathioneisthesumofGSSGplusGSH.AGSHstandardisprovidedtogenerateastandardcurvefortheassayandallsamplesshouldbereadoffthestandardcurve.Thekitutilizesaproprietarynon-fluorescentmolecule,StressXpress®DetectionReagent,thatwillcovalentlybindtothefreethiolgrouponGSHtoyieldahighlyfluorescentproduct.AftermixingthesampleorstandardwiththeDetectionReagentandincubatingatroomtemperaturefor15minutes,thefluorescentproductisreadat510nminafluorescentplatereaderwithexcitationat390nm.TheconcentrationoftheGSHinthesampleiscalculated,aftermakingasuitablecorrectionforanydilutionofthesample,usingsoftwareavailablewithmostfluorescenceplatereaders.Freeglutathione,GSH,isreadfirstafter15minutes,followedbyadditionofareactionmixturethatconvertsalltheoxidizedglutathione,GSSG,intofreeGSH,whichthenreactswiththeexcessDetectionReagenttoyieldthesignalrelatedtoTotalGSHcontent.ThetotalconcentrationofGSHgeneratedinthesampleiscalculatedfromthegeneratedsignal.Wehaveprovideda96wellplateformeasurementbutthisassayisadaptableforhigherdensityplateformats.TheendusershouldensurethattheirHTSblackplateissuitableforusewiththesereagentspriortorunningsamples.
KitOverview
ComponentNo.ItemQuantity/Size
SKC-202ABlack96WellPlate1Each
SKC-202BGlutathioneStandard100µl
SKC-202CStressXpress®DetectionReagent2PlaticVials
SKC-202DDryDMSO4ml
SKC-202EAssayBuffer60ml
SKC-202FNADPHConcentrate300µl
SKC-202GGlutathioneReductaseConcentrate300µl
SKC-202HOxidizedGlutathioneControl300µl
CiteThisProductGlutathioneDetectionKit(StressMarqBiosciencesInc.,VictoriaBCCANADA,Catalog#SKT-202)

BIOLOGicalDescription

AlternativeNamesγ-L-Glutamyl-L-cysteinylglycineDetectionKit(2S)-2-Amino-5-[[(2R)-1-(carboxymethylamino)-1-oxo-3-sulfanylpropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoicacidDetectionKit
ResearchAreasCancer,OxidativeStress
ScientificBackgroundGlutathione(L-γ-glutamyl-L-cysteinylglycine;GSH)isthehighestconcentrationnon-proteinthiolinmammaliancellsandispresentinconcentrationsof0.5-10mM(1).GSHplaysakeyroleinmanybiologicalprocesses,includingthesynthesisofproteinsandDNA,thetransportofaminoacids,andtheprotectionofcellsagainstoxidation.Harmfulhydrogenperoxidecellularlevelsareminimizedbytheenzymeglutathioneperoxidase(GP)usingGSHasareductant(2).TheoxidizedGSHdimer,GSSG,isformedfromGSHandperoxidebytheGPreaction(seebelow).AnimportantroleofGSSGintheNFγBactivatingsignalcascadeissuggestedbythefactsthatthepotentNFγBinducer,tetradecanoylphorbolacetate,increasesintracellularGSSGlevelsandGSSG/GSHratios(3).GlutathioneS-transferases(GST)areanimportantgroupofenzymesthatcatalyzethenucleophilicadditionofGSHtoelectrophiles.Theyareencodedby5genefamilies;4encodecytosolicGSTandoneencodesthemicrosomalformofGST.Theyhavebeenimplicatedinanumberofdiseases.InasthmaarachidonicacidisconvertedtounstableleukotrieneA4(LTA4).LTA4iseitherhydratedtoformLTB4oritisconjugatedtoGSHbyaGST,leukotrieneC4synthase,toformleukotrieneC4.LTC4anditsderivativeLTD4areimportantmoleculesinbronchialasthma.LeukotrieneC4synthaseisthereforeanimportanttherapeutictarget.IthasalsobeenshownthatincreasedexpressionofGSTscanleadtodrugresistance.Threeglutathioneadductsofthedrugmelphalan,usedtotreatovariancancerandmultiplemyeloma,havebeenisolatedfromreactionsinvolvinghumanmicrosomalGSTs.
References1.MeisterA.(1988)TrendsBiochemSci.13(5):185-8.
2.MeisterA.(1994)JBiolChem.269(13):9397-400.
3.DrögeW.,etal.(1994)FASEBJ.8(14):1131-8.

ProductImages

<p>Typical Standard Curve of Glutathione Detection Kit StressXpress® – SKT-202. Assay Type: Direct. Detection Method: Fluorometric Assay. Assay Range: 0.195 – 25 uM</p>

TypicalStandardCurveofGlutathioneDetectionKitStressXpress®–SKT-202.AssayType:Direct.DetectionMethod:FluorometricAssay.AssayRange:0.195–25uM

<p>Linearity was determined by taking human RBCs at two different concentrations and mixed in the ratios given below. The measured concentrations were compared to the expected values based on the ratios used.</p>

LinearitywasdeterminedbytakinghumanRBCsattwodifferentconcentrationsandmixedintheratiosgivenbelow.Themeasuredconcentrationswerecomparedtotheexpectedvaluesbasedontheratiosused.

<p>We purchased and compared a popular colorimetric total glutathione assay kit (kit “T”) that uses Ellman’s reagent to detect free glutathione in the sample. Initial experiments used random human urine samples that were processed as described in each kit booklet. With kit “T”, the values obtained for urine after the recommended treatment with 4 volumes of 5% metaphosphoric acid and subsequent 10 fold dilution with assay buffer put all the values well below the lowest standard. However, the urine samples run in the StressXpress® kit gave Total GSH values between 0.63 and 4.04 ?M.</p>

Wepurchasedandcomparedapopularcolorimetrictotalglutathioneassaykit(kit“T”)thatusesEllman’sreagenttodetectfreeglutathioneinthesample.Initialexperimentsusedrandomhumanurinesamplesthatwereprocessedasdescribedineachkitbooklet.Withkit“T”,thevaluesobtainedforurineaftertherecommendedtreatmentwith4volumesof5%metaphosphoricacidandsubsequent10folddilutionwithassaybufferputallthevalueswellbelowtheloweststandard.However,theurinesamplesrunintheStressXpress®kitgaveTotalGSHvaluesbetween0.63and4.04?M.

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2018-07-16
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2021-08-07
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回答:可以耐受的啊,这个是viskase的 查看更多>
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如题:
两个CEX方法A和B测定同一单抗,结果碱性峰比例差不多,酸性峰比例相差约7%,相应主峰也差了7%左右。
具体来说,A方法酸性峰高,主峰低,碱性峰稍微低点;B方法酸性峰低,主峰高,碱性峰稍微高点;另外也做了CIEF,结果呢和A方法更接近。
仔细比较起来,AB两个方法的峰性和数量差不多,就不知道为什么会有这么大的差异。两个方法一个用的WCX柱-磷酸缓冲液,一个用SCX柱-MES缓冲液
大家帮我分析下:
1.两个方法哪个方法更准确,是以酸性峰高的为准还是什么?为什么?
2.这显著差异是由方法造成,具体原因是什么?柱子?
3.CIEF的结果和A方法更接近,是不是可以由此证明A方法更好或者CIEF的方法更好(因为CIEF更快更方便)?
欢迎讨论~
纠正下,A方法用的是Tosoh的柱子,B方法用的是SCX柱。TOSOH的柱子是7um的填料,10cm长。SCX是10um的填料。我本人TOSOH的阳离子柱子用的很少,这次信手用用,结果发现差异很大
那我现在就考虑,在以后方法开发过程中,除了通过流动相pH和组成、梯度、柱子选择来获得样品主峰和酸碱性的最大分离,还要关注各峰比例。因为之前比较方法好坏都只看分离度,尤其是主峰和邻近峰的分离度,获得最大分离度,自然可以做到主峰尽可能纯,但从未认真比较过各峰比例。这是一个大疏忽吧!
另外,CIEF和CEX方法原理还是有点差异的,所以分的是不同的异质体,原液放行两个方法肯定是都要做的。问题就是在早期细胞株筛选和工艺开发阶段,哪个方法才是又快又准。CIEF(iCE280)一般15分钟一个样,比CEX快多了。如果CIEF测得主峰要低于CEX结果,是不是真的完全可以取代CEX呢?CEX分离出的峰远比CIEF的多!
欢迎大家继续讨论~
纯化水药典2005版第二部

拼音名:Chunhuashui
英文名:PurifiedWater
【性状】本品为无色的澄清液体;无臭,无味。
【检查】酸碱度取本品10ml,加甲基红指示液2滴,不得显红色;另取10ml,加溴麝香草酚蓝指示液5滴,不得显蓝色。氯化物、流酸盐与钙盐取本品,分置三支试管中,每管各50ml。第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml,第二管中加氯化钡试液2ml,第三管中加草酸铵试液2ml,均不得发生浑浊。
硝酸盐取本品5ml置试管中,于冰浴中冷却,加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml,摇匀,缓缓滴加硫酸5ml,摇匀,将试管子50℃水浴中放置15分钟,溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液[取硝酸钾0.163g,加水溶解并稀释至100ml,摇匀,精密量取1ml,加水稀释成100ml,再精密量取10ml,加水稀释成100ml,摇匀,即得(每1ml相当于1pgNO3)0.3ml,加无硝酸盐的水4.7ml,用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(0.000006%)。
亚硝酸盐取本品10ml,置纳氏管中,加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液(1→100)lml与盐酸菜乙H肢溶液(0.l+100)1ml,产生的粉红色,与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0.750g(按干燥品计算),加水溶解,稀释至100ml,摇匀,精密量取1ml,加水稀释成100ml,摇匀,再精密量取1ml,加水稀释成50ml,摇匀,即得(每1ml相当于1μgNO2)]0.2ml,加无亚硝酸盐的水9.8ml,用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(0.000002%)。
氨取本品50ml,加碱性碘化汞钾试液2ml,放置15分钟;如显色,与氯化铵溶液(取氯化铵31.5mg,加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml)1.5ml,加元氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较,不得更深(0.00003%)。
二氧化碳取本品25ml,置50ml具塞量筒中,加氢氧化钙试液25ml,密塞振摇,放置,小时内不得发生浑浊。
易氧化物取本品100ml,加稀硫酸10ml,煮沸后,加高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)0.10ml,再煮沸10分钟,粉红色不得完全消失。
不挥发物取本品100ml,置105℃恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干,并在105℃干燥至恒重,遗留残渣不得过1mg。
重金属取本品50ml,加水18.5ml,蒸发至20ml,放冷,加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml,加硫代乙酰胺试液2ml,摇匀,放置2分钟,与标准铅溶液1.5ml加水18.5ml用同一方法处理后的颜色比较,不得更深(0.00003%)。
微生物限度取本品,采用薄膜过滤法处理后,依法检查(附录ⅪJ),细菌、霉菌和酵母菌总数每1ml不得过100个。
【贮藏】密闭保存。
【化学成分】本品为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的供药用的水,不含任何附加剂。
【分子式与分子量】H2O18.02
【药理作用】溶剂、稀释剂

这里药典纯化水标准中并无PH值项目,请问对纯化水有PH值的要求吗,范围应在多少?请说明出处?
在纯化水检测中,检验酸碱度合格,但是发现PH在8左右。如果按以上标准检验合格,是否要考虑PH值?请知道的解答,谢谢!
请问什么软件可以测蛋白质的酸碱性
【酸碱缓冲溶液的类型及选择】酸碱缓冲溶液有三种类型:
1、弱酸和它的盐(如:HAc---NaAc)的水溶液组成;
2、弱碱和它的盐(如:NH3·H2O---NH4Cl)的水溶液组成;
3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐(如:NaH2PO4---Na2HPO4)的水溶液组成。
酸碱缓冲溶液的选型一般应根据具体情况进行选择。缓冲酸性可选用碱性缓冲液,缓冲酸性可采用碱性缓冲液。常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统,生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
【酸碱缓冲溶液】由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为酸碱缓冲溶液。
磷酸钠缓冲液的配制方法 123
高展远瞩2014-10-12
看了GE公司的NiSephrose6FastFlow说明书,说bindingbuffer建议20mMsodiumphosphate,0.5MNaCl,pH7.4,elutingbuffer中是在bindingbuffer中加了高浓度的咪唑,我想问一下,这个怎么配制啊?那个sodiumphosphate是什么?磷酸钠溶液?貌似不具有缓冲性,磷酸钠缓冲液?有可能,但是这个咋配啊?有我能想到的三个配制方法,想求助一下;
1.直接用固体磷酸钠配制成50mM的磷酸钠溶液,再调pH到7.4;(我们试着用这个做了下,发现挂不上柱)
2.配置磷酸钠盐缓冲液:按NaH2PO4:Na2HPO4以19:81的摩尔比配制成pH7.4的缓冲液?(附一张百度出来的配方


3.如果是磷酸钠盐缓冲液,可以直接将50mM的NaH2PO4的水溶液用NaOH调成pH7.4吗?
再者,2和3这两个方法配制的磷酸钠盐缓冲液有什么区别?最终效果是一样的吗?如果不一样,有什么理论的知识支撑呢?个人感觉是分析化学中酸碱理论中的缓冲液那里的知识。求帮忙解答这些疑问。
另外,我还想问一下,pH对于Ni柱对His-tagged的蛋白的分离纯化影响大吗?是怎么影响的?谢谢大家了!
缓冲物质更重要。
由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液,能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响,从而保持溶液的pH值相对稳定。这种溶液称为缓冲溶液。
相关疾病:高钾血症碱中毒代谢性酸中毒输入库存血,钾离子大量释放入血,会导致高钾血症,同时容易伴发代谢性碱中毒,查了相关资料解释说:大量输...
缓冲溶液是含共轭酸碱对的,其中共轭酸与共轭碱都必须是弱酸或弱碱,这样才能组成缓冲液。因为邻苯二甲酸是弱酸,氨是弱碱,并且它们的同浓度的电离度相似,所以组成的缓冲溶液缓冲能力强。
【1】酸碱缓冲溶液:其中的一般酸碱缓冲溶液是指控制溶液酸碱度的溶液.他的作用是在此溶液中,加入少量的强酸或强碱,或者将其稍加稀释时,溶液的ph值基本上保持不变.【2】可以维持溶液酸碱度稳定的原因:主要原因是因为构成一般酸碱缓冲溶液的组分是“一元共轭酸碱”.例如“醋酸-醋酸钠”酸碱缓冲溶液.由PH的计算式:pH = p Ka +log[C酸/C碱] ,可见C酸/C碱的微小改变,其PH值,基本不变.

:)
我在做一细菌不同酸碱度生长状况时,发现这些奇怪现象:pH=3的培养基灭菌(TSB液体培养基)灭菌后pH上升到到9.2!而原来pH=9.0的降到8.7(基本没多少变化),请问各位大侠,这是什么原因?

一般做不同酸碱度生长实验时,该如何才能防止pH在湿热灭菌后基本不变化?
就是通过微弱的中和反应控制溶液的酸碱度。
药典上说取本品10ml,加甲基红指示液(变色范围ph4.2-6.3,红~黄)2滴不得显红色;加溴麝香草酚蓝(变色范围ph6.0-7.6,黄~蓝)5滴不得显蓝色。
是否可以理解为纯化水得PH范围为6.3-7.6?能否直接用pH计测量?谢谢!