TEM Diameter | Size Distribution (CV) | Example Certificate of Analysis(How do I read this?) |
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80 nm ± 4 nm | ≤ 12% | Download Example CoA |
100 nm ± 4 nm | ≤ 12% | Download Example CoA |
120 nm ± 4 nm | ≤ 12% | Download Example CoA |
200 nm ± 10 nm | ≤ 12% | Download Example CoA |
300 nm ± 30 nm | ≤ 12% | Download Example CoA |
500 nm ± 50 nm | ≤ 5% | — |
1000 nm ± 50 nm | ≤ 5% | — |
- Particle surface: silanol
- Particle form: powder
- Peak wavelength (λmax): n/a
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protocol如下:
灌注取脑后,4%多聚甲醛4℃固定24-48h。修块3-4mm。
脱水(常温):45%、55%、65%、75%、85%、95%、100%酒精各30min;
透明(常温):(100%酒精+二甲苯)/210min,二甲苯①20min,二甲苯②至完全透明(约20min)
浸蜡(60℃):(二甲苯+石蜡①)/210min,石蜡①30min,石蜡②40min;石蜡①为低熔点,石蜡②为高熔点
包埋:浸蜡后用石蜡②手动包埋;
切片厚度:6um、(8um也切的有)
展片:40℃水中展片;
烤片:60摄氏度烤片机侧烤约5min后吸去水分,转移至60℃温箱烤约4h;
脱蜡:烤片后趁蜡未凝固,进行脱蜡。二甲苯5min×2,100%酒精3min,95%酒精2min,
85%酒精2min,75%酒精2min,流水冲洗2min(放在缸子里用水泡的,换了几次水);
染色:
HE染色:苏木精5-8min(新配为5min,时间长可为8min,用前过滤),流水冲洗3min
1%盐酸酒精分化5s,流水冲洗1min,0.1%伊红1-2min,
脱水:85%酒精2min,95%酒精2min,100%酒精2min,
100%无水乙醇:二甲苯(1:1)2min
透明:二甲苯(I)3min,二甲苯(II)3min;
CV染色:浸入CV染液中10-20min,
脱水:75%乙醇2min,85%乙醇2min,95%乙醇2min,100%无水乙醇2min,
100%无水乙醇:二甲苯(1:1)2min
透明:二甲苯(I)3min,二甲苯(II)3min;
封片:中性树胶封片(整个染色过程避免干片)。
部分HE染色、CV染色片子结果如图所示,基本上没有完整的片子(染色时,片子随着在液体里的时间脱片、烂片的程度加深),另CV染色着色浅。
请教战友是什么原因?哪里出了问题,该怎么解决?
尤其是前面两个,后面的还可以从字面理解着做,前面这两个就纯把我搞晕菜了.
全量法:测水浸出物的
酒石酸铁比色法;
紫外分光光度法;
恒重法:测水含量的
谢谢谢谢
主药:50mg
mcc:20mg
l-hpc:10mg
cms-na:10mg
5%pvp50%乙醇qs
外加
ms:0.5mg
cms-na:3mg
50度干燥
以上处方不粘冲,但因上处方的辅料与主药有相互作用,导致片子变黄
现换成以下处方
处方1
主药:50mg
预胶化淀粉:20mg
淀粉:20mg
8%淀粉浆:qs
外加
ms:0.5或1mg
滑石粉:3或5mg
60度干燥
以上处方粘冲,为何?
处方2
主药:50mg
预胶化淀粉:20mg
淀粉:10mg
甘露醇:10mg
8%淀粉浆:qs
外加
ms:0.5或1mg
滑石粉:3或5mg
60度干燥
以上处方粘冲,为何
红色的是胰岛素,绿色的是胰高血糖素。都是石蜡切片~
请问下我这染出来的应该是胰岛细胞吧,背景颜色适合吗?
为什么胰高血糖素然不出来,这两种我用的方法是一样的。
方法:
1.脱蜡,水化:脱蜡前应将组织芯片在60摄氏恒温箱中烘烤1h
A:组织芯片置于二甲苯中浸泡15min,更换二甲苯后再浸泡10min(脱蜡)
B:无水乙醇中浸泡5min(水化)
C:95%乙醇中浸泡5min
D:75%乙醇中浸泡5min
2.PBS洗2次各5min
3.PBS洗2次每次5min,洗去枸橼酸钠(Ⅲ,Ⅱ)
4.3%H2O2(80%甲醇稀释)室温静置10min(去除内源性酶)
5.PBS洗2次各5min(Ⅰ、Ⅱ)
6.加入1%BSA稀释(0.01MPBS稀释)封闭液,37度恒温烘箱1h,顷去多余液体,不洗
7.滴加一抗用1%BSA稀释(1:50)或(1:100),先室温放置1h,然后4度过夜(放入湿盒)并用PBS代替一抗做阴性对照
8.PBS洗3次每次5min
9.滴加二抗(1:100)或(1:200),用1%BSA稀释37度恒温箱(放入湿盒)1h,避光
10.PBS洗3次各2min,避光,用摇床洗涤
11.加入20ul样品Hoechst液体(10ug/ml)5min用摇床避光
12.PBS洗3次各2min,避光,用摇床洗涤
13.滴加抗荧光猝灭剂,封片,镜检,绿色荧光
谁用过亲水性改性的聚丙烯膜养过细胞,最好是whatman的,效果怎么样?十分感激!:)
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新帖要有题目,且要尽量展示帖子主要内容意思~bywzmc225
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