excitation and emission spectrum of ATTO 647N
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Storage Conditions: store at -20 °C
Short term exposure (up to 1 week cumulative) to ambient temperature possible.
Shelf Life: 12 months after date of delivery
Molecular Formula: C58H75N10O8P (free acid)
Molecular Weight: 1071.25 g/mol (free acid)
Exact Mass: 1070.55 g/mol (free acid)
Purity: ≥ 95 % (HPLC)
Form: blue solution in water
Concentration: 1.0 mM - 1.1 mM
pH: 7.5 ±0.5
Spectroscopic Properties: λexc 646 nm, λem 664 nm, ε 150.0 L mmol-1 cm-1 (Tris-HCl pH 7.5)
ebiomall.com
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我是这样进行预测的：在“SearchMode:”中选择“rRNAscanonly:”，在“sorce”中选择“mito/chloroplast”,粘贴序列，运行程序。得到了21个tRNA，而鱼中应该是22个tRNA，我觉得很奇怪，在“SearchMode:”和“rRNAscanonly:”中进行其它的设置，都不能得到22个tRNA.
我看的一篇文献“CompletemitochondrialDNAsequenceoftheJapanese
flyingfishCypselurushiraii”中也是说22个tRNA,但是我把文章提交的序列（Genbank号为AB182653.）拿到网上提交，只有21个tRNA，我觉得很奇怪。
不知道是怎么回事？请高手指点，那个软件好像是比较权威的。
中文名为信使RNA，是由DNA的一条链作为模板转录而来的、携带遗传信息的能指导蛋白质合成的一类单链核糖核酸。mRNA作为蛋白质合成的模板，决定肽链的排列顺序。
tRNA
中文名为转运RNA，是具有携带并转运氨基酸功能的一类小分子核糖核酸。
rRNA
中文名为核糖体RNA，是最多的一类RNA，也是3类RNA（tRNA,mRNA,rRNA)中相对分子质量最大的一类RNA，它与蛋白质结合而形成核糖体，其功能是作为mRNA的支架，使mRNA分子在其上展开，形成肽链的合成。rRNA占RNA总量的82%左右。rRNA单独存在时不执行其功能，它与多种蛋白质结合成核糖体，作为蛋白质生物合成的“装配机”。
n.[医] （对伤处等的） 针探，探查; [医] 探针，取样器; 探测仪;探头;
vt.探索，调查; 用探针（或探测器等）探查，探测;
vt.盘问; （用试探性袭击等）侦察（敌情） ; 用尖物刺穿（物件）; 用力使向前推进;
The more they probed into his background, the more inflamed their suspicions would become
他们越调查他的背景，疑团就越多。
没法移动，也没有办法看信号强度啊？
siRNA (Small interfering RNA)，是一种小RNA分子（~21-25核苷酸），由Dicer（RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶）加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员，激发与之互补的目标mRNA的沉默。
PNA是一种人工合成的核酸的类似物，与核酸相似，它也是由携带ATGC四种碱基的四种单体首尾相连所构成的链状结构，从而保证这种物质能够像核酸一样靠碱基堆积力形成Watson-Crick碱基对，与DNA、RNA形成杂交分子PNA/DNA或PNA/RNA这就是PNA作为杂交探针的理论基础。所不同的是构成PNA骨架的单体不是通常的带负电的磷酸核糖而是N-(2-氨已基）-甘氨酸，单体之间靠酰胺键连接成长链。这种电中性的骨架结构赋予肽核酸探针优良的杂交特性。
首先PNA/DNA杂交分子的性质很稳定，从化学动力学角度看，PNA/DNA的结合常数有明显提高，一旦形成了双链，即使加入上百倍的寡核苷酸也不能使它解离。据报道，对于含有高度反向重复序列的超螺旋DNA，PNA/DNA杂交分子比DNA/DNA双链的结合常数提高了五万倍；从热力学角度看，PNA/DNA杂交分子的Tm也高于相同序列的DNA/DNA双链，通常，在100mmol/L的NaCl溶液中，PNA/DNA杂合子与相应的DNA/DNA双链相比，每个碱基对的Tm值要高出1℃。也就是说，15个碱基对的PNA/DNA平均Tm值约为70℃，比同样的DNA/DNA要高出15℃。从而使检测过程中的灵敏度大为提高。此外，中性骨架还使PNA与DNA的杂交摆脱了对杂交液盐度的依赖，这一重要性质不仅意味着杂交过程中省去了提高盐浓度的操作，更有意义的是，只要保证杂交体系足够低的离子强度，就能抑制非特异性的杂交和靶DNA序列的自身复性对灵敏度的损害。
不但如此，这种高度的灵敏度并没有像其他种类的探针一样引起特异性的下降，相反它对于碱基错配的容纳力更小。在16bp的PNA/DNA杂合子中，一个碱基的错配会导致Tm值下降15℃，而对于同样的DNA双链，Tm值只下降11℃
原文地址：http://tahepna.com/file_news_read.asp?id=59&class=%D1%D0%BE%BF%BD%F8%D5%B9&fo=4&flag=
大家好，近期在用lipo2000做悬浮细胞HL-60的siRNA转染，siRNA是由公司合成的三个siRNA，但是敲除效率很低，并且每次qPCR后做出来的结果都不一样：有时是第一个siRNA敲除作用好点，但有时是第二个或第三个siRNA效果好。由于结果不稳，并且细胞不好转我就将细胞换成了A549，但是换成了贴壁细胞后发现每次转染后进行qPCR检测时结果还是不稳，另外，我还设置了不同siRNA的组合，有时结果显示siRNA1+siRNA3效果好，但有时显示siRNA1+2+3效果好。光做这个siRNA转染已经几个月了，到现在都没有确定具体哪个片段起作用或效果最好，也没有一个稳定的趋势。请问造成这种敲除效率不稳定的原因到底是为什么？急切等待回复，谢谢！
tRNA（转运RNA）可以转运氨基酸。
mRNA（信使RNA）是由细胞核内的DNA转录来的，相当于蛋白质的设计图纸。
翻译的过程：核糖体附着在mRNA上，然后tRNA搬运氨基酸，运往到核糖体上，从而拼合成蛋白质。
编码线虫的氨基酰tRNA合成酶是否和编码大鼠的氨基酰tRNA合成酶的基因相同？
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