Fms-related tyrosine kinase 3 ligand (FLT-3 ligand) is agrowth factor that regulates hematopoietic cellproliferation. FLT-3 ligand signaling is transmittedthrough the fms-related tyrosine kinase 3 (FLT-3) receptor. FLT-3 ligand promotes the long-term expansion and differentiationof pro-B cells in the presence of interleukin 7 (IL-7) or incombination of IL-7 and interleukin 3 (IL-3).
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前段时间有个同学因为细胞状态不好，培养基里有小黑点，怀疑是支原体污染。于是检测了一下，果真是的，就买了支原体清除剂。别说效果还真好，3天后细胞状态就好了。
既然细胞状态好了，就停用了，没想到一停用，细胞状态就又差了。把培养箱、细胞房都清理一遍还是不行，就问到了我，既然这些因素都排除了，最后只有一个可能了，刚买的Gibco的胎牛血清，本来心里还想，同学实验室真是土豪啊，我就问了价格，南美胎牛1500……澳州胎牛血清3000……，简直惊讶到了，现在Gibco的血清简直是一货难求，澳州胎牛血清已经炒到了8000+了。
就断定这个血清肯定是假的，用检测试剂盒检测了一下，果然是这个问题，假血清真是害人啊，这些无良奸商……由于支原体比较小，滤器过滤不掉，所以大家买血清的时候一定要先试用，检测一下支原体（现在好多大牌子都会有支原体检测报告）
这里来分享一下支原体检测方法：
1，PCR检测法。
2支原体检测跑胶图-20084539882.jpg
这个Primers是依据支原体基因组中高度保守的16SrRNA编码域而设计的，只需简单的PCR反应就可检测M.Arginini,M.Fermentans,M.Hyorhinis,M.Orale,M.Salivarium,M.Hominis,M.Pneumonia等常见的支原体。
2，DNA萤光染色法
利用萤光染剂（bisbenzimide,Hoechst33258）侦测支原体污染。此染剂会结合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich区域，因为支原体之DNA中A-T含量占多数（55～80%），所以可将其染色而侦测。被支原体污染之细胞经染色后，在细胞核外与细胞周围可看到许多大小均一之萤光小点，即为支原体之DNA，证明有支原体之污染。
Cell+细胞卫士__MycoTestKit(支原体检测试剂盒)：
支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。
MycoTestKit是利用降落聚合酶链式反应技术（TD-PCR）对支原体16SrRNA基因高度保守区域特异性片段进行扩增检测。该方法灵敏度高，特异性强，可用于各种生物材料（如细胞培养基、实验动物分泌物、动物血清等）支原体感染的检测。
Cell+细胞卫士__NocardTreatment(支原体清除剂)：
（1）推荐NocardTreatment的稀释比例为1:1000，例如：1mL培养基加入1μL的NocardTreatment；
（2）弃去旧的培养基，用PBS将细胞清洗干净，再加入新鲜的含有NocardTreatment的培养基，1天1次，连续处理3-6天。
本人做动物实验，每组设7只，需要测定小鼠的相关指标，初次接触有几点不明白
1、测定指标时，是否可以每组7只，每只测定一次，一共测定7次？
2、是否可以每组选择3只，每只测定一次，共3次？
3、是否可以每组选择3只，每只自身平行测定3次，共9次？
4、测定指标时，是否可以前3只鼠测定A指标，后4只鼠测定B指标吗？
请问1、2、3中的三个方法哪种方法是否具有可行性？4中的测定方法是否可以？
关于一般所说的血清,在这大约要先分清楚什么叫血清,什么叫单抗治疗剂(在大陆医院及一般人也叫血清)
血清,如果正常而言是从病患犬只身上抽取血液而提炼制成的一种抗体,例如从一只患有犬瘟的患犬经过长期治疗痊愈后,将他的血液抽取出来,经过粹取提炼,而这种提炼出来的血清(免疫抗体),是有治疗加预防犬瘟的效果,同样包括其它另5种致命性病毒如细小肠炎,犬勾螺旋病毒,犬肝炎,犬黄胆等也同样是这样提炼,但是患犬经过治疗痊愈性低而且提炼血清需要大量的血液才能提炼(例如500ml的血液才经过筛检提炼为2.8ml的血清,而一只患犬需要注射治疗预防是需要2.5mlX5剂,试问这种高消耗经济成本时间的脆取提炼法,谁愿意去做)
因此早期国外会将犬只的各种致命性病毒,注射入牛,马,羊,猪等足蹄类动物身体内,再藉由这些动物的血液来脆取提炼犬病毒血清(这些病毒会在这些足蹄类动物身上起一些作用,但却不会致命!而这些动物的血液也够多够充沛来做提炼),经过多年试验中以羊只的血液提炼血清是比较有效果的!
而目前大陆中也是采用相同的方式提炼血清,但是实验对象包括牛马猪羊等足蹄动物,而再粹取血清的过程除了提炼过程严谨也要有相当的保存过程,这两者只要有一个环节有不当,提炼出的血清就会产生极大的不稳定性甚至于无效!!!
这也就是我们常说血清的由来,因为粹取对像非犬只类,加上或许运送或保存或粹取过程(这都是我们无法见到及预期的可変因素)因此血清的作用几乎就大打折扣了,一般使用血清是用于幼中期犬集体长途运输,或是对于一些大犬只因某些原因不能注射疫苗而又需要加强自身免疫时就需要注射(血清是属于一种短暂时提升免疫体的做法),而真正正本清源,是等小狗或大狗身体健康时,注射2-3剂疫苗来确定自身免疫预防!!
也就是说,很多医生或宠物店会因为不完全了解小狗自身情况如何之前,会给狗狗注射血清,希望提高狗狗的免疫抗体,而等狗狗身体和情绪稳定,再开始接种疫苗,但是,前文中也提过,有太多不可预期性会发生,如小狗太早断奶或母乳不足,血清自身因保存或运输不当!这些太多不确定因素造成血清无效外,更容易害了犬只!!
过来我们谈单抗治疗剂,这种疗剂我们称为单抗疫苗(根据犬只患病不同而施以不同的单病毒对抗疗剂,例如犬瘟单抗,细小单抗),这是属于人工合成的活化菌体,其实也很像疫苗指是因为合成为比疫苗更微弱毒性,它是需要一连施打4-5剂,才有作用的针剂,它的作用我大约解释一下,这种抗体是经过人工更弱化的病毒,而注入患犬体内是激发狗狗自身免疫力对这种病毒进行适应力而加以消灭,因此需要施打五剂,等狗狗自身免疫被激发对这种病毒产生抵抗力(排斥性),
狗自生免疫系统就会针对侵入的单种病毒进行围剿消灭,而等自身免疫力能消灭侵入病毒后,狗的身体内这单种病毒病也就会痊愈(当然这只是针对单一种病毒而言,而患病犬只通常并发并非单一种病症,因此要确实诊断使用支持对症诊疗法举个例,如犬瘟并发呼吸道葡萄球链菌引发流鼻涕咳嗽症状,既使犬瘟病毒被消灭但是葡萄球链菌并不会因犬瘟病毒被消灭而停止作怪,医生还是要针对葡萄链球菌作抗生素注射治疗),而痊愈后的狗,自生免疫力会对单一病毒产生终生排斥作用,例如犬只经过细小治愈后,这只狗终身对细小病毒免疫,既使给狗只注射六联疫苗,疫苗内的弱化细小病毒一样被狗狗自身免疫力排斥消灭,而其它五种疫苗却会再犬只身上起作用(既使得犬瘟医治好的狗能终生预防犬瘟,也同样要打疫苗,因为致命性病毒不是只有犬瘟一种,除非你加狗狗天生利害能六种病都得到而又都医治好!这种可能性太低也千万保佑别这么做狗狗和饲主都太辛苦)!
这也就是为什么患病犬只到医院被确诊为细小或犬瘟时,医生又要打血清的原因(其实是单抗),当然单抗不是万灵丹,它只是加强犬只自身激发免疫的一种催化剂,若是犬只本身体质虚弱或是病毒已经大面积侵犯犬只器官,这些治疗方式都只是一种尽人事听天命的方法了!!!
本人科研小白，研究新生！
课题准备检测血清中骨桥蛋白（OPN）含量
现在计划是先将所有血标本离心取血清先冻存，待所有标本收集齐后再统一做
大概要收集2个月，约70个病例。
现在我的问题就是：1、离心后的血清，如何分装、冻存？（具体条件、流程、用什么管子冻存，是否需要买冻存液等）
2、冻存后如何复苏？（最好有具体流程，具体复苏条件，是否需要买什么复苏液、培养基什么的）
刚来读书，一下子拿到这个题目有点懵，网上搜了一些，比较杂，比较乱，没有底，想请教各位哥哥姐姐给我提供点帮助，先谢谢了！
血清蛋白是血浆里最丰富的蛋白质。每一个蛋白分子能携带七个脂肪酸分子。这些脂肪酸分子结合在蛋白的缝隙中，它们富含碳的尾部埋藏在里面安全地避开周围的水分子。血清蛋白同样能够携带许多其它的不溶于水的分子。尤其是血清蛋白，能够携带着许多药物分子，比如布洛芬。
正因为血清蛋白是如此普遍地存在于血液中并且如此容易地被提纯，所以它成为科学家最早研究的蛋白质之一。今天，当需要一种蛋白质时，一种来源于牛体内的类似的蛋白在研究中被广泛地使用，这种蛋白叫做牛族血清蛋白或者称作BSA。许多酶在稀溶液中不稳定，解决的办法是加入一些牛族血清蛋白。在试验中它能使酶稳定，且相对地中性,不会影响酶的性质。
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