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Bio-Synthesis/Antennapedia Bak BH3 (Ant-BH3) (71-89) Fusion peptide/1 mg/10681-01
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Bio-Synthesis/Antennapedia Bak BH3 (Ant-BH3) (71-89) Fusion peptide/1 mg/10681-01
品牌 / 
Bio-Synthesis
货号 / 
10681-01
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Antennapedia Bak BH3 (Ant-BH3) (71-89) Fusion peptide
Sequence (1LC):
RQIKIWFQNRRMKWKKMGQVGRQLAIIGDDINRRY
Sequence (3LC):
H - Arg - Gln - Ile - Lys - Ile - Trp - Phe - Gln - Asn - Arg - Arg - Met - Lys - Trp - Lys - Lys - Met - Gly - Gln - Val - Gly - Arg - Gln - Leu - Ala - Ile - Ile - Gly - Asp - Asp - Ile - Asn - Arg - Arg - Tyr - OH
Catalog :
10681-01
Unit:
1 mg
Price/Unit:
$380(For other quantities please Contact Us or call 972-420-8505)
Purity:
>95%
Format:
Lyophilized solid, trifluoroacetate (TFA) salt format
Storage:
-20°C
Product Usage:
This product is for research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures.
M.W.:
4404.3
Reference/Citations:
Holinger, E. et al. J. Biol. Chem. 274, 13298 (1999).
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稳定表达细胞株(稳转细胞株)指在细胞中持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达。稳转细胞株的目的基因质粒DNA整合到细胞染色体上,使细胞长期稳定表达该基因。 在基因功能的 查看更多>
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转染(transfection)专指感受态的大肠杆菌细胞捕获和表达噬菌体DNA分子的生命过程。从本质上讲,和转化没有根本的区别。无论是转染还是转化,其关键因素都是用氯化钙处理大肠杆菌细胞,以提高细胞膜的通透性,从而使外源DNA分子能够容易进入细胞内部。所以在习惯上,人们往往也通称转染为广义的... 查看更多>
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各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certified Cells)。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各 查看更多>
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转染或PEI转染293的细胞后,一种方式加筛选压力(puromycinorhygromycin),筛选后少量细胞存活,扩大培养后,发现没有阳性,另一种方式,转染后分单克隆,扩大培养后也检测不到阳性。原本转染24-72小时转染效率至少在50%,大部分可能是瞬转,但不会一个都没有整合到基因组吧,以前我用这种方法筛选成功过几株稳转株,但是最近一段时间都失败,有遇到类似情况的吗?想和大家交流交流
请问细胞转染质粒后想获得稳定细胞系,是先用流式细胞仪筛选后再用抗性培养基筛选吗?一般是转染后多久开始进行筛选
自己操作的难度比较大。一般有一定经验的外科医生才会打这个麻醉,打不好是没有效果的。最好去专业医疗机构医院或者诊所,那里会比较专业。效果也比较好.
1.将外源基因插入慢病毒载体
2.将构建完成的载体与慢病毒包装质粒混合,共转染靶细胞
3.收集病毒液
4.用病毒液感染靶细胞
5.用载体上带的抗生素进行筛选,如果没有,可以用无限稀释法
6.获得稳转株

我用腺病毒感染稳转细胞株,用到50微升的量都感染不起来,荧光不表达,PCR验证不出来?求问如果用polybrene该怎么加,转染之前预处理还是加病毒的时候加进去?

之前转染了带GFP的质粒,冻存估计有半年了拿来复苏,想做后续实验,结果稳转的细胞荧光少还很弱,请问怎么办?急急急!
瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上,结果是短暂的高水平表达,可在外源基因导入细胞24~96h内检测表达效果,表达水平与位置无关,不会受到周围染色体元件的影响。超螺旋质粒转染更倾向于瞬时表达。
对于瞬时转染的检测:如果有报告基因,就通过报告基因的表达看转染成功与否;没有报告基因的话,就在24~96h内收获细胞通过RT-PCR和WB来鉴定。
应该是通过病毒载体质粒上的标记基因比如说荧光的eGFP或者带嘌呤霉素抗性基因的用嘌呤霉素筛选吧!
首先你得明确这个h9c2细胞的培养是否好做,操作是否稳定。
然后你得确定,这个细胞株对于你得研究来说不可或缺,具有明确的代表性。
上面两个都没有问题的话,祝你顺利。
稳转细胞系常用的方法有质粒转染和慢病毒转染进行稳定株筛选,前者操作简单,但是成功率很低,费时,假阳性高,最后可能导致几个月的工作白干了,慢病毒稳定株筛选方法比较简单,并且慢病毒本身具有稳定整合入基因组的特性,没有假阳性,慢病毒包装可能相对比质粒构建难度大,如果经费充足可以直接找公司包毒的。
这个要看细胞的状态和蛋白表达特点。推荐了解“主细胞库”“工作细胞库”这两个名词。
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时.但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理.
由于质粒的不兼容性,拥有同种复制子的质粒不能在同一细胞内稳定共存,经过几代的复制,会质粒丢失,所以并不是任何两个或两个以上质粒都可以在同一细胞内稳定存在,但是可以同时进入.
稳定转染的细胞株,就是转染后质粒可以稳定整合到基因组上不会因细胞分裂而丢失。区别于质粒瞬时转染不能长时间保留质粒在细胞里。
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