超声波清洗器英文怎么写_超声波清洗器英语怎么说_例句
货号: | WLA064b |
保存条件: | 4℃避光 |
规格: | 96T |
产品概述:碱性磷酸酶ALP几乎存在于身体各种组织中,是膜结合酶。肠上皮、肾小管、成骨细胞、肝脏、胎盘及白细胞中尤其丰富。血清中AKP主要来源于肝和骨。AKP与肠内脂质转移及骨质钙化有关。血清AKP测定对肝胆系统及骨骼系统疾病的研究有参考意义。
本试剂盒可测动物血清(浆)、组织、各种体液、灌流液、各种培养细胞以及细胞培养上清液等。
保存日期:本试剂盒自订购之日起6月内有效。
操作流程:
一、样本前处理:
1.血清(浆):可直接取样用于测定(个别含量过高的样本需要稀释后测定,如鸡血清(浆)中ALP活力较高,一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测)。
2.组织:准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水进行匀浆,2500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
3.细胞培养液:吸取细胞培养液,1000-1500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
4.培养细胞:
a.培养细胞的收集:
悬浮培养细胞:可直接通过离心收集沉淀细胞(1000rpm,离心10min,弃上清留沉淀细胞)。
贴壁培养的细胞:吸去上清,可通过细胞刮直接将细胞刮下,然后1000rpm,离心10min弃上清,留沉淀细胞,再加入1mlPBS轻轻吹打,再次1000rpm,离心10min弃上清,留沉淀细胞待用。
b.培养细胞的破碎:在细胞沉淀中加入一定量(108的细胞一般加0.3-0.5ml)的缓冲液(缓冲液可以用PBS或者是生理盐水),需保证超声探头在液面以下。功率300W,冰水浴,每3-5s超声一次,间隔4次(每次间隔时间为30s左右)
二、测定过程参考操作表如下:
充分混匀,37℃水浴,15min
轻轻振摇孔板混匀,波长520nm,酶标仪测定各孔吸光度OD值。
三、计算公式
1.血清(浆)中ALP活力计算公式:
单位定义:100ml血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
血清中ALP活力(金氏单位/100ml)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.1mg/ml)x100mlx样本测定前稀释倍数
2.组织样本中ALP活力计算公式:
单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
组织中ALP活力(金氏单位/gprot)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.1mg/ml)÷待测样本蛋白浓度(gprot/ml)
3.培养液中ALP活力计算公式:
单位定义:100ml液体在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
培养液中ALP活力(金氏单位/100ml)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.02mg/ml)x100mlx样本测定前稀释倍数
4.培养细胞ALP活力计算公式:
单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位
培养细胞中ALP活力(金氏单位/gprot)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.02mg/ml)÷待测样本蛋白浓度(gprot/ml)
详情请致电咨询:400-602-0407(转2号键)或登录公司官网 www.wanleibio.cn
操作流程:
一、样本前处理:
1.血清(浆):可直接取样用于测定(个别含量过高的样本需要稀释后测定,如鸡血清(浆)中ALP活力较高,一般需要用生理盐水5倍或10倍稀释后待测)。
2.组织:准确称取待测组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入9倍体积的生理盐水进行匀浆,2500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
3.细胞培养液:吸取细胞培养液,1000-1500rpm,离心10min,取上清液进行测定。
4.培养细胞:
a.培养细胞的收集:
悬浮培养细胞:可直接通过离心收集沉淀细胞(1000rpm,离心10min,弃上清留沉淀细胞)。
贴壁培养的细胞:吸去上清,可通过细胞刮直接将细胞刮下,然后1000rpm,离心10min弃上清,留沉淀细胞,再加入1mlPBS轻轻吹打,再次1000rpm,离心10min弃上清,留沉淀细胞待用。
b.培养细胞的破碎:在细胞沉淀中加入一定量(108的细胞一般加0.3-0.5ml)的缓冲液(缓冲液可以用PBS或者是生理盐水),需保证超声探头在液面以下。功率300W,冰水浴,每3-5s超声一次,间隔4次(每次间隔时间为30s左右)
二、测定过程参考操作表如下:
试剂名称 | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
双蒸水(μl) | 5 | ||
0.1mg/ml酚标准工作液(μl) | 5 | ||
待测样本(μl) | 5 | ||
缓冲液(μl) | 50 | 50 | 50 |
基质液(μl) | 50 | 50 | 50 |
显色剂(μl) | 150 | 150 | 150 |
三、计算公式
1.血清(浆)中ALP活力计算公式:
单位定义:100ml血清在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
血清中ALP活力(金氏单位/100ml)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.1mg/ml)x100mlx样本测定前稀释倍数
2.组织样本中ALP活力计算公式:
单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
组织中ALP活力(金氏单位/gprot)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.1mg/ml)÷待测样本蛋白浓度(gprot/ml)
3.培养液中ALP活力计算公式:
单位定义:100ml液体在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位。
培养液中ALP活力(金氏单位/100ml)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.02mg/ml)x100mlx样本测定前稀释倍数
4.培养细胞ALP活力计算公式:
单位定义:每克组织蛋白在37℃与基质作用15min产生1mg酚为1个金氏单位
培养细胞中ALP活力(金氏单位/gprot)=测定OD值-空白OD值/标准OD值-空白OD值x酚标准品浓度(0.02mg/ml)÷待测样本蛋白浓度(gprot/ml)
详情请致电咨询:400-602-0407(转2号键)或登录公司官网 www.wanleibio.cn
温馨提示:不可用于临床治疗。
免责声明 本文仅代表作者个人观点,与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺,请读者仅作参考,并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的,应该授权范围内使用,并注明“来源:蚂蚁淘”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
发布于 : 2021-09-14
阅读(601)
▍
相关分类
▍
相关文章
实验样品采集运输保存方法
西部数码网站助手解决"您未被授权查看该页"问题_老蒋部落
抗蛋白酪氨酸磷酸酶抗体高抗蛋白酪氨酸磷酸酶抗体高批发价格...
求BEND.3细胞原代培养方法 医学 基础 小木虫论坛学术科研...
小鼠丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶(STK)Elisa试剂盒_其他检测 ...
小鼠淋巴细胞因子酶联免疫(Elisa)试剂盒
人胎盘生长因子(PIGF)ELISA试剂盒说明书
细胞冻存经验谈:选对冻存培养基才是王道_RhondaNewman
如何做好慢病毒载体实验?跟着我试一下
结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值
感染性腹泻与一般腹泻有什么区别彩牛养生
小鼠白介素11(IL11)Elisa试剂盒说明书_上海微蒙生物科技有限公司
▍
相关问答