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【图文】蛋白纯化预装柱篇
来自 : mayitao

预装柱是指什么样的柱子呢?和我们通常直接买来用的柱子有什么区别哦?期待达人的解答… 预柱就是平时所说的保护柱啊,比平时分离用的色谱柱短,也会稍微粗一些,不同的实验要求有不同的保护柱,一般都是为了除杂防止堵塞柱子的。 原文由 wenshaowei-2008 发表:预柱一般是指保护柱,起到过滤作用,保护色谱柱但有的书上说两者不一样哎,你和楼上的理解一样。我说的是预装柱,不是预柱继续期待达人…… 预装柱一步纯化即得高纯度 高纯度的蛋白洗脱呈现窄峰洗脱条件温和,保护目标蛋白的活性 耐NaOH的清洗 可方便的配合注射器,蠕动泵或连接液相色谱系统使用MBPTrap HP 为纯化带有麦芽糖结合蛋白标记(MBP)的重组蛋白带来了便利。预装柱-简介 MBPTrap HP 为纯化带有麦芽糖结合蛋白标记(MBP)的重组蛋白带来了便利。这些柱子装有Dextrin Sepharose HP 凝胶。它牢固且又稳定的琼脂糖填料基架能使目标蛋白洗脱呈一狭窄的峰,从而减少了进一步浓缩的需求。纯化在物理条件下进行,温和的洗脱方式保护了目标蛋白的活性,其温和的条件甚至可以纯化完整的蛋白复合物。由于结合的高度专一性,只需一步洗脱即可达到高纯度。StrepTrap HP填料方便地提供了通过亲和层析的方法纯化Strep ( II )标记的重组蛋白。这类预装柱内装有StrepTactinTM SepharoseTM HP 凝胶。streptavidin经过特殊耦合改造成StrepTactin ,确保了其最优的结合特性。它牢固且又稳定的琼脂糖填料基架可带来高分辨率,尖锐集中的洗脱峰和高的重现性。纯化在物理条件下进行,且温和的洗脱条件确保了目标蛋白的活性。由于结合的高度专一性,只需一步洗脱即可达到高纯度。预装柱-MKF疏水填料与疏水预装柱 MKF疏水性相互作用色谱柱填料的表面具有弱疏水性特征。RPC方法是基于强疏水性作用,而疏水性相互作用色谱(HIC: hydrophobic interaction chromatography)方法则依赖于溶质与填料表面之间弱的疏水性相互作用。在高离子强度的盐水溶液淋洗条件下,蛋白质分子中的疏水性部分与填料表面产生疏水性相互作用而被吸附,当淋洗液的离子强度逐渐降低时,蛋白样品则按其疏水性特征被依次洗脱,疏水性越强,洗脱的时间越长,用此原理来实现分离。其特点是,既可以避免使用含有大量有机溶剂的淋洗体系,又能有效地保持被分离物质的生物活性。一般来说,生物大分子大都含有或强或弱的疏水区域,在不同环境中,生物样品与各种疏水介质所产生的疏水性相互作用大小亦各不相同,正是由于这种原因,才使HIC分离方法得以建立和实施。MKF的HIC填料,绝大多数是多孔结构的,它们的负载量都比较高,每毫升树脂可负载数十毫克的蛋白样品。以特定物理结构PS-DVB树脂为基质的产品,更适于在很高流速下,快速高效的精细分离纯化蛋白质等生物样品。MKF疏水作用介质有四种类型,它们有不同的化学表面和不同的疏水性,其疏水性强弱程度,依次为苯基 C8 C4 异丙基 醚链预装柱-分辨率和选择性 蛋白质在高盐浓度时吸附在树脂上的吸附强度与树脂疏水性和盐浓度直接相关。选择合适的疏水作用介质,无机盐的用量可以降低到最低,活性回收可以最大。高疏水性介质常用来分离低疏水性的蛋白。弱疏水性介质常用来纯化疏水性很强的蛋白质比如单克隆抗体和膜蛋白,如果这两种蛋白和疏水介质结合的非常牢固会导致低的回收率。 来源于百科网,仅供参考!!! 原文由 wysipi 发表:预装柱是指什么样的柱子呢?和我们通常直接买来用的柱子有什么区别哦?期待达人的解答…应该是不带柱子接头的柱子,德国有几家公司有 我们常规用的分析柱,都是预装柱的很多大的色谱柱公司,还有订做柱提供,可以根据你的要求来提供柱子特别在制备色谱领域,预装柱是指已经给你填好的柱子,还有他们卖空柱管和填料给你,你自己有装柱机,就可以自己装制备柱,可以做SAC或者DAC 塑料预装柱空柱,分为1ml,2.5ml,7ml,27ml,43ml, 70ml,140ml,210ml,385ml,580ml 空柱管,分为柱管,柱头,上下两个筛板,筛板孔径20um,可用于装填凝胶填料直接用于分离纯化,通过鲁尔接头可以接换成1/8或1/16管道,接连到AKTA等蛋白纯化仪上梯度洗脱,耐受最大压力是100Psi,可以手工装柱,也可以直接用注射器和蠕动泵使用,简单快捷。QQ:2319380339,本人专门销售塑料及不锈钢空柱。 http://shop101515740.taobao.com

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