siRNA转染细胞敲除效率不稳定
2021-08-05
问题描述:
大家好,近期在用lipo2000做悬浮细胞HL-60的siRNA转染,siRNA是由公司合成的三个siRNA,但是敲除效率很低,并且每次qPCR后做出来的结果都不一样:有时是第一个siRNA敲除作用好点,但有时是第二个或第三个siRNA效果好。由于结果不稳,并且细胞不好转我就将细胞换成了A549,但是换成了贴壁细胞后发现每次转染后进行qPCR检测时结果还是不稳,另外,我还设置了不同siRNA的组合,有时结果显示siRNA1+siRNA3效果好,但有时显示siRNA1+2+3效果好。光做这个siRNA转染已经几个月了,到现在都没有确定具体哪个片段起作用或效果最好,也没有一个稳定的趋势。请问造成这种敲除效率不稳定的原因到底是为什么?急切等待回复,谢谢!
*请输入10-500个字符
已帮助
0人
0人
Fubio-GG
用户
沉默效率不稳定,一是跟你的转染效率有关,而是跟你的siRNA序列有效性有关
已帮助
0人
0人
晨光微曦
用户
你转染的lipo:siRNA的比例是多少?另外转染方法是否正确?
已帮助
0人
0人
dxy_31w5roj3
用户
更多是实验体系:包括细胞、转染等关系密切,当然也包括时间点。
已帮助
0人
0人
dxy_aceo4212
用户
国内用的lipo2000多,就是听说敲除效率不稳定,可以试试其他的牌子,听说隔壁实验室用的是RFect
已帮助
0人
0人
dxy_aceo4212
用户
可以试试别的品牌的试剂,听说life和RFect挺不错的
▍
相关分类
▍
相关文章
東曜藥業
Paraformaldehyde Fixation of Cells
纯碱全年进出口商海关数据_
冷冻探针取样诊断ILD优于传统活检钳取样
miRNA和lncRNA: 生命科学研究领域的“富矿”
Aging Adversely Impacts Biological Properties of Human Bone ...
惊险 颅内温度探针贯穿脑实质 1 例
The Installation of Scihub Plugin | Chem_peng
Diabetes Res Clin Pract:北京大学张曼等发现尿肽可作为T2DM的...
胸部肿瘤和内镜:稳定转染HER2/neusiRNA表达质粒抑制肺癌生长
Purification of Plasmid from 50 mlculture质粒提取生物在线 Lab...
《新斗罗大陆》官方正版小说改编手游官网