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CRISPR/cas系统敲除后,如何筛选???
2021-08-02
问题描述:

我想问一个基础问题啊,用CRISPR/cas系统敲除某个基因后,如果突变株表型没法通过肉眼分辨,怎么把突变株找出来?要用到什么Marker吗?还是需要对细胞逐个测序检测?

如果是逐个检测,那就涉及到效率问题了,当效率比较低的时候,岂不是工作量很大?

还有cas9基因会残留在细胞里吗?

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木木夕7
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首先可以通过药筛筛选出耐药细胞,然后可以挑取单克隆。
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coolkid_sk
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转染后用puromycin筛选,再挑单克隆瞬转的话cas9基因不会残留
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