【求助】IgY卵黄水稀释后脂类滤不掉
2021-07-22
问题描述:
前天将卵黄用六倍水稀释,调PH值5.2,过夜沉淀后,昨天离心发现上清夜很浑浊,根本离不下来。用0.22微米滤膜过滤也还是很浑的黄色,之前水稀释时搅拌的也不是很剧烈,为什么脂质颗粒这么小呢?会不会是鸡蛋的问题?
后来加PEG沉淀效果很好,上清夜很清,但是不知道会不会对后期测效价,纯化等有影响。
有没有别的简便方法可以去除脂类?
哪位高手指教一下,感激不尽。
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我是瘦马
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有的时间是这样的,我以前也遇到过这种情况。注意自己的离心参数,蛋黄液PH值。这两个如果设置好的话一般不会出现楼主说的情况的。做IgY的人不是很多啊,希望以后大家多交流。
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YOUNGROLLAND
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磷脂本身就是类似表面活性剂性质,用PEG就是增加溶液的非极性,对于后续的检测和纯化的影响应该不会很大(只要不影响其)。PEG不会影响IgY和抗原的空间构型。对于纯化的影响是,只是PEG难于去除干净。你可能用样品直接过色谱填料,(有人会说对填料有很大影响,其实如果有沉淀可碱液清洗即可),也许你想要的成份和磷脂很容易就分开了。
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evasongsong
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展开引用YOUNGROLLAND磷脂本身就是类似表面活性剂性质,用PEG就是增加溶液的非极性,对于后续的检测和纯化的影响应该不会很大(只要不影响其)。PEG不会影响IgY和抗原的空间构型。对于纯化的影响是,只是PEG难于去除干净。你可能用样品直接过色谱填料,(有人会说对填料有很大影响,其实如果有沉淀可碱液清洗即可),也许你想要的成份和磷脂很容易就分开了。......虽然已经很久不做IgY了,看到有人回帖还是挺感激的,呵呵。我最后用AKTA纯化了,效果还行吧,不知道现在IgY研究到什么程度了
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YOUNGROLLAND
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你现在已经毕业了?还是不在研究那个课题了?
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evasongsong
用户
YOUNGROLLAND你现在已经毕业了?还是不在研究那个课题了?已经毕业了
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